Link tải luận văn miễn phí cho ae Kết nối
Nghiên cứu đã đánh giá tác dụng ức chế sáu dòng tế bào ung thư của ba phân đoạn SM1, SM2, SM3 phân lập từ dịch chiết củ Stephania dielsiana Y.C.Wu, bao gồm tế bào ung thư cổ tử cung (Hela), tế bào ung thư biểu mô cuống phổi và phế nang ở người (H358), tế bào ung thư buồng trứng (OVCAR-8), tế bào ung thư dạ dày (N87), tế bào ung thư vú (MDA-MB-231), tế bào ung thư gan (HepG2) và một dòng tể bào lành là tế bào thận ở phôi người (HEK293) bằng phương pháp MTS. Kết quả thu được cho thấy phân đoạn SM2 có tác dụng ức chế tốt trên cả sáu dòng tế bào ung thư và ức chế yếu hơn trên dòng tế bào lành (HEK293), với IC 50 lần lượt là 22,84; 30,09; 12,21; 10,27; 18,24; 26,18; 48,12 ug/ml, phân đoạn SMl có tác dụng yếu và phân đoạn SM3 không có tác dụng trên các dòng tế bào ung thư.
Từ khóa: Stephania dieỉsiana Y. c. Wu, ức chế dòng tế bào ung thư.
Tóm tắt
Nghiên cứu đã đánh giá tác dụng ức chế sáu dòng tế bào ung thư của ba
phân đoạn SMỈ, SM2, SM3 phân lập từ dịch chiết củ Stephania dieỉsiana
Y.C.Wu, bao gồm tế bào ung thư cổ tử cung (Hela), tế bào ung thư biểu mô
cuống phổi và phế nang ở người (H358), tế bào ung thư buồng trứng (OVCAR-
8), tế bào ung thư dạ dày (N87), tế bào ung thư vú (MDA-MB-231), tế bào ung
thư gan (HepG2) và một dòng tể bào lành là tế bào thận ở phôi người (HEK293)
bằng phương pháp MTS. Kết quả thu được cho thấy phân đoạn SM2 có tác dụng
ức chế tốt trên cả sáu dòng tế bào ung thư và ức chế yếu hơn trên dòng tê bào
lành (HEK293), với IC50 lần lư 0 là 22,84; 30,09; 12,21; 10,27; 18,24; 26,18;
48,12 ụ.g/ml, phân đoạn SMl có tác dụng yếu và phân đoạn SM3 không có tác
dụng trên các dòng tế bào ung thư.
Đặt vấn đề
Những năm gần đây, sổ lượng bệnh nhân mắc ung thư trên thế giới và Việt
Nam ngày càng gia tăng. Thực tế đó đòi hỏi cần tàng cưÒTTig nghiên cửu các
phương pháp cũng như các thuốc và hóa chất điều trị ung thư. Trong quá trình
nghiên cứu tác dụng của một sổ họp chất từ chi Stephania Lour, trên một số dòng
tế bào ung thư, Nguyễn Quốc Huy, Phạm Thanh Kỳ và Lê Mai Hương đã phát
hiện được tác dụng ức chế sự tăng trưởng tế bào ung thư của họp chất
oxostephanin được phân lập từ củ loài Stephania dielsiana Y.C.Wu trên các dòng
tế bào ung thư gan (HepG2), ung thư phổi (LU), ung thư màng tim (RD) [3].
Nhằm tiếp tục nghiên cứu tác dụng ức chế các dòng tế bào ung thư của củ loài
Stephania dielsiana Y.C.Wu và lựa chọn phân đoạn dịch chiết từ củ có tác dụng
ức chế tốt tế bào ung thư, tiến tới phân lập và lựa chọn được các hoạt chất có tác
dụng, chúng tui thực hiện nghiên cứu "Đánh giá tác dụng ức chế một sổ dòng tế
bào ung thư của các phân đoạn từ củ của loài Stephania dieỉsiana Y.c. Wu". Sau
đây là một số kết quả thu được từ nghiên cứu.
Nguyên liệu và phương pháp nghiên cứu
Nguyên liệu
Cắn các phân đoạn dịch chiết SMl, SM2, SM3 phân lập từ dịch chiết củ
loài Stephania dielsiana Y.C.Wu (Ba Vì, Hà Nội, 4/2013)
Các dòng tế bào ung thư: tế bào ung thư cổ tử cung (Hela ATCC), tế bào
ung thư biểu mô cuống phổi và phế nang ở người (H358 ATCC), tế bào ung thư
buồng trứng (OVCAR-8 ATCC), tế bào ung thư dạ dày (N87 ATCC), tế bào ung
thư vú (MDA-MB-231 ATCC), tế bào ung thư gan (HEPG2 ATCC). Dòng tế bào
lành: tể bào thận ở phôi người (HEK293 ATCC).
Chất đối chứng dưong Taxol.
Thiết bị và hóa chất
Thiết bị
Máy cất quay áp suất giảm, bình gạn, kính hiển vi soi ngược, máy ly tâm,
máy Elisa, tủ ấm 5% CO2, tủ hút, buồng đếm tế bào, đĩa nuôi cấy đa giếng, ống
bảo quản mẫu, ống Falcon, ống ly tâm.
Hóa chất
Dung môi chiết: methanol, acid acetic, nước cất, dung dịch amoniac 6N,
n-hexan, diclomethan, ethylacetat.
Môi ừường nuôi cấy tế bào: các dòng tế bào được nuôi cấy trong môi
trường DMEM hay RPMI có bổ sung 10% huyết thanh thai bò FBS và 1%
kháng sinh penicillin/streptomycin.
Các hóa chất khác: thuốc nhuộm Blue Trypan, bộ kit xác định lượng tế
bào CellTiter 96® Non-Radioactive Cell Prolifération Assay, dung dịch PBS,
dung dịch Trypsin - EDTA.
Phương pháp nghiên cứu
Chiết xuất và phân đoạn dịch chiết từ loài Stephania dielsiana Y.C.Wu
Cân 500 g bột dược liệu, thấm ẩm bằng hỗn hợp dung môi methanol:acid
acetic 5% (3:2) tại pH 4-5, chiết với dung môi methano:acid acetic 5% (3:2) pH
4-5 bằng phương pháp ngấm kiệt. Dịch chiết được cất thu hồi dung môi rồi chiết
lần lượt với n-hexan, diclomethan, ethylacetat. Phần dịch chiết nước còn lại được
kiếm hóa bằng dung dịch amoniac đến pH 9-10 và được chiết lần lượt với
diclomethan, ethylacetat. cất thu hồi dung môi các phân đoạn n-hexan,
diclomethan, ethylacetat tại pH 4-5 và pH 9-10 ở 60°c [1,4].
062i52iMx7970t2
