Thông số Normal Phase Reverse Phase
Độ phân cực của cộtCao Thấp
Độ phân cực của dung
môi
ThấpCao
Thứ tự rửa giảiChất kém phân cực
ra trước
Chất phân cực ra
trước
Tăng độ phân cực dung
môi
Rửa giải nhanh
hơn
Rửa giải chậm hơn
So sánh Normal phase và Reversed phase
32
• Normal Phase
– Tách tốt các đồng phân lập thể, ví
dụ như Vitamin E etc…
–Thời gian lưu kém ổn định
• Reversed Phase
– Độ lặp lại thời gian lưu tốt .
– Pha tĩnh không đồng đều nhau.
So sánh Normal phase và Reversed phase
33
Sắc ký cặp ion pha đảo
Reversed Phase Ion-Pair Chromatography
Chất ghép cặp ion
34
Các chất ghép cặp
• Ghép cặp với các Anion

 Injection volume : 10 uL
Peaks
1. Nicotinic acid 6. Thiamine
2. Nicotinamide 7. Caffeine
3. Pantothenate 8. Folic acid
4. Pyridoxine 9. Biotin
5. Riboflavin 10. Riboflavin
Phosphate
37
Những lưu ý quan trọng trong
sắc ký ghép cặp ion
• Loại chất ghép cặp
• Nồng độ chất ghép cặp
• pH của pha động
R-COOH RCOO
-
+ H
+
(pKa=4.5)
R-NH
2
+ H
+
R-NH
3
+
(pKa=6.0)
38
Ảnh hưởng của chất ghép cặp
Mobile Phase: H