Phúc trình thực tập nuôi cấy mô và tế bào thực vật
Họ và Tên: Lưu Hoàng Đệ
MSHV: M0514008
BÀI 1: CÁC THAO TÁC CƠ BẢN TRONG
NUÔI CẤY MÔ
1. Mục đích
Giúp học viên làm quen với các thao tác và thiết bị trong phòng nuôi cấy mô,
đồng thời giúp biết cách pha chế môi trường nuôi cấy.
2. Dụng cụ và hóa chất
a. Dụng cụ
- Ca nhựa dung tích 1 lít.
- Ống định mức dung tích một lít.
- Ống đong dung tích 100 ml, 10 ml.
- Micropipette.
- Cân điện tử.
- Đũa thủy tinh.
- Bếp điện từ hoặc lò vi sóng.
- Dụng cụ đo pH.
- Cốc đong 100 ml.
- Lọ cấy, dây thun, túi nilon trong.
- Máy khử trùng nhiệt ướt.
b. Hóa chất
- Dung dịch stock Macro MS1, MS2, MS3.
- Dung dịch stock Micro MS, FeEDTA.
- Các Vitamin B3, B1, B6.
- Chất điều hòa sinh trưởng NAA (1mg/ml), BA (0.5mg/ml).
- Đường Sucrose, Agar.
- Dung dịch chuẩn pH gồm NaOH và HCl.
3. Các bước tiến hành pha chế môi trường nuôi cấy
Khi đã có dung dich gốc (stock solutions) ta tiến hành pha chế môi trường nuôi
hòa sinh trưởng (nếu có), Agar,
Một yếu tố không kém phần quan trọng đó là pH của môi trường, chúng ta cần
đưa pH về 5.8. pH không chỉ ảnh hưởng đến khả năng hòa tan các chất khoáng mà
còn ảnh hưởng đến đặc tính của Agar nếu pH <5.5 thì Agar không đông tụ mà ở
dạng gel, pH >6.0 thì Agar trở nên cứng. Ngoài ra, pH còn ảnh hưởng đến hoạt
tính của các chất điều hòa sinh trưởng, các chất điều hòa sinh trưởng sẽ bị mất
hoạt tính nếu pH quá acid hoặc quá kiềm.