 
i

TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
 Nguyễn Thị Thu Hƣơng
NGHI£N CøU TINH S¹CH Vµ X¸C §ÞNH TIÒM N¡NG
CHèNG UNG TH¦ CñA PIPERINE Tõ Hå TI£U §EN
(PIPER NIGRUM L.) 
 2013

 
ii


TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN


Nguyễn Thị Thu Hƣơng

truyền, khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà
Nội đã luôn quan tâm, giúp đỡ tôi hoàn thành nghiên cứu.
Bên cạnh đó, tôi xin gửi lời cảm ơn đến toàn thể các anh chị, các bạn, các
em trong các phòng thí nghiệm thuộc Bộ môn Di truyền học, Bộ môn Sinh lý thực
vật - Hóa sinh và Bộ môn Sinh học tế bào đã nhiệt tình chỉ bảo, chia sẻ kinh
nghiệm, giúp đỡ, động viên tôi trong suốt thời gian học tập và làm việc.
Cuối cùng, tôi xin gửi lời cảm ơn đến những người thân trong gia đình cùng
những người bạn đã hết lòng ủng hộ, cổ vũ và giúp đỡ tôi trong học tập cũng
như cuộc sống, giúp tôi yên tâm hoàn thành công việc.
Hà Nội, ngày 24 tháng 12 năm
2013.
Nguyễn Thị Thu Hương

 
iv
DANH MỤC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT
Ký hiệu
Viết đầy đủ
ATCC
American Type Culture Collection
CDK
Cyclin dependent kinase
CTHH
Công thc hóa h
CTPT
Công thc phân t
DMEM
Dulbecco's Modified Eagle Medium
FBS
Fetal bovine serum  

v
DANH MỤC HÌNH
 4
 7
Hình 3. Henrietta Lacks và  11
-7 [38] 12
 13
 15
 16
 [23] 21
 22
 24
 27
 32

- 7  39

 40
 42
 : n-hexane : ethyl acetate (trái )và
n - hexane : ethyl  43
n - hexane : ethyl acetate (trái) hexane :
       
 44
n-hexane : ethyl acetate
 45
 46

 48


Hìn
 67  
vii
DANH MỤC BẢNG

 1. Danh sách 
29
 41

 47

 51
 52
 56

 7 62

50
 7 62

 67

50
 68

 
viii

 
ix
CHƢƠNG 2 – ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29
2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 29
2.2 Hóa chất, thiết bị và sinh phẩm 29
2.2.1  29
2.2.2  30
2.2.3  30
2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 30
2.3.1  30
2.3.2  32
2.3.3  33
2.3.4 
 34
2.3.4.1  34
2.3.4.2  36
2.3.5  37
2.3.5.1  37
2.3.5.2  38
2.3.6 và
MCF  7 38
2.3.6.1  7 39
2.3.6.2  40
CHƢƠNG 3 – KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 41
3.1 Kết quả tinh sạch Piperine từ Hồ tiêu đen 41
3.1.1  41
3.1.2  42
3.1.3  45
3.1.4 
 47

Ngay t thi c i, con ngi  bi  dng các lo cây c  nhiên 
cha m s  thông ng   ngoài da, cm máu, ho, s  y h
  phát tri kèm theo là s phát hin r nhi các các lo  c
  khám phá c hàng lo công dng c chúng và sáng t ra hàng trm
ngàn các bài thu cha a vào  ph hp các lo  dc. Tuy nhiên,
  các bài thu  truy  c  phát t kinh nghim dân gian,
   s khoa h  v tác d   thu 
, các loài  dc h   có thành ph , bao gm  thành
ph có  sinh h  không có  tính sinh h  chí là
thành ph gây    qu cha b  tho dc 
.   ph nhng nh này, các chng trình sàng l 
c  hành da trên vi phân tích thành ph th dc, t  tìm ra thành
 có  tính, các  tác d    nó  tinh s và bi chúng thành
các  thu tân c khác nhau [3,6].
Mi  có kho các loài thc v nhi i  c nghiên cu 

 
2
nc phm, do  k ìm kim c các lo hp  các loài nhi
i  ng  cho vi sàng l thu mi là r ln [32]. i  
ti ng khai thác dc  c  Nam, m trong nhng nc i có
mc   thc vrkh quan.
Piper nigrum 


 
“Nghiên cứu tinh sạch và xác định tiềm năng chống ung thƣ của
Piperine từ Hồ tiêu đen (Piper nigrum L. )”tiêu là ti
Piperine   xác


  
 hình thành 


 [26]
 hình thành h
lên nhau. K 

 hình thành 
(Hình 1) [2, 13, 31] khác nhau


 
4


 [29].

Hình 1. Quá trình phát sinh và di căn ung thƣ [31]
  thành 3



0. [12].
1.1.2 Cơ chế di truyền gây bệnh ung thư
 hình thành là 
4 pha: G1, S, G2
và M
    .



 
6
  
  
(anti - 

 Khi các gen 

pRB và gen TP53.Gen pRB 
 
TP53 




  -     
nhau. 

 hình thành 




 


 
.





 
8
1.1.3 Các phương pháp điều trị
,
tuy n      
                
         
.


  kích th 
.

 tiêu            
chúng. Tuy nhiên
. 


 quá trình tiêu 


 

 h
tiêu 
 
  

30 - 40 cm. 
 - 

 
10
S trong chu trì [53].
               
Ganoderma lucidum, lim.  Hongbo 
(2002)
  
 - 7 [28, 49].
  
V  


p
h

 chính là Piperine 
 
 Piperine 
]
dò-18 [42]
      




c 
nhau trchú 


thanh [14].
1.1.4.2 Dòng tế bào ung thư vú MCF-7


  1 (Insulinlike Grow Factor-
 s ].
Dòng MCF  
  
 , 53]. 
  (Hình 4).

Hình 4. Dòng tế bào ung thƣ vú MCF-7 [38]
1.2 Hồ tiêu (Piper nigrum L.) và Piperine
1.2.1 Hồ tiêu (Piper nigrum L.)
1.2.1.1 Đặc điểm sinh học
  , , 
Piper nigrum L.,  cây leo có hoa   (Piperaceae

 
13
   (Hình 5).
 có thâkhông mang lông, bám vào các cây khác
 


Hình 

 , 







 .   ,






 .  , 







 a
, [3, 21].
 .
 . 







, 

. , 2 - 3 


, ; , 










 . 


, 



.

Hình 5. Cây và quả Hồ tiêu

 
14
K 






 , 



20 - 30 µm, n
ông,  .   , ,
 .  

, ,




51 - 75 µm. , 

ng  .
   


               
 (hay                

               
   


Piperine 
khét. Piperine 
 
0
 

2
SO
4
 [23, 40].
 7. 

Trích đoạn Phân đoạn dịch chiết tổng số, tinh sạch Piperine bằng sắc ký cột Định lượng dịch chiết tổng số và xác định độ tinh sạch của Piperine bằng Kết quả định tính Piperine bằng sắc ký bản mỏng(TLC) Kết quả tinh sạch Piperine bằng sắc ký cột

---