TỔNG HỢP MỘT SỐ DẪN XUẤT TỪ HESPERETIN VÀ XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG
GÂY ĐỘC TẾ BÀO CỦA CHÚNG
Hoàng Thị Kim Dung
1
, Nguyễn Cửu Khoa
1
, Nguyễn Ngọc Hạnh
1
Nguyễn Thụy Vy
2
, Hồ Huỳnh Thùy Dương
2
1
Viện Công nghệ Hóa học, Viện KH & CN Việt Nam
2
Phòng Sinh học phân tử, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên
Summary
Synthesized and determined antiproliferative activity of some hesperetin derivatives.
We synthesized 4 hesperetin derivatives and determined their structure by using
physical chemistry analyses (IR, LC-MS, 1H-NMR,
13
C-NMR, HSQC, HMBC). The
result when we tested antiproliferative activity of these products showed that the
synthetic compounds (at 100µg/ml) exhibited antiproliferative activity similar to
hesperetin (63-86% compare with 63-78%) on HeLa, MCF-7, NCI-H460 tumor cells,
however, the IC
50
values were higher.
1. Đặt vấn đề:
Các nghiên cứu của một số nhà khoa học trên thế giới về tác động của flavonoids họ
cam chanh lên các dòng tế bào ung thư ở người thấy rằng các hợp chất tổng hợp có khả năng

4
K
2
CO
3
acetone, t
o
s
CH
3
CH
2
CH
2
Br
K
2
CO
3
acetone, t
o
s
O
OCH
2
CH
2
CH
3
OCH

OOH
HO
(72%)
(68%)
Hesperetin (1mmol) được ether hoá bằng dimethyl sulfat hoặc 1-bromopropane (4.5
mmol)với xúc tác K
2
CO
3
(3g) trong acetone (50ml), hỗn hợp được đun hồi lưu và theo dõi
phản ứng bằng sắc ký lớp mỏng. Sản phẩm tạo thành được làm sạch bằng sắc ký cột và phân
tích cấu trúc dựa trên các phổ IR, LC-MS,
1
H-NMR,
13
C-NMR.
2.3. Phương pháp tổng hợp các dẫn xuất halogen của Hesperetin: [3]
Oxone (KHSO
5
.KHSO
4
.K
2
SO
4
) (2.2mmol) được cho vào một hỗn hợp gồm hesperetin
(1mmol), KCl (hay KBr) (2.2mmol) trong acetone (15ml). Phản ứng được khuấy liên tục và
duy trì ở nhiệt độ 20
o
C, theo dõi phản ứng bằng sắc ký lớp mỏng. Sau phản ứng, hỗn hợp được

C-NMR δ ppm HMBC
1
H→
13
C
OCH
3
3,813 (3H, s) 55,480 H → C
4’
OCH
3
x 2 3,818 (3H, s)
3,830 (3H, s)
55,585 H → C
7
H → C
3’
OCH
3
3,888 (3H, s) 56,098 H → C
9
2 7,590 (1H, dd, J=15,5) 142,992 H
2
→ C
3,1’,2’
3 7,636 (1H, dd, J=15,5) 125,188 H
3
→ C
2,1’,4
4 192,247

- Sản phẩm thu được có dạng tinh thể hình kim, màu cam, độ sạch > 97%.
- Phổ IR (cm
-1
): 2961, 2939, 2937, 2873, 1623, 1507, 1431, 1260, 1216, 1188, 1138, 1016,
841, 806, 764, 610.
- Khối phổ MS cho pick [M+H
+
] = 429 tương ứng với trọng lượng phân tử là 428.
- Phổ
1
H-NMR (DMSO, δ ppm),
13
C-NMR (DMSO, δ ppm) kết hợp với DEPT, HSQC,
HMBC:
Vị trí C/H
1
H-NMR δ ppm (số H; dạng
mũi; J=Hz)
13
C-NMR δ ppm HMBC
1
H→
13
C
CH
3
x 3 0,972-1,004 (9H) 10,235-10,496 H → C
CH2, OCH2
CH
2

10 105,803
1’ 127,574
2’ 7,247 (1H, d, J=2) 111,028 H
2’
→ C
6’, 3’,2,1’
3’ 148,337
4’ 151,351
5’ 7,011 (1H, d, J=8) 111,840 H
5’
→ C
1’,3’,4’
6’ 7,221 (1H, dd, J=2 và 8) 123,405 H
6’
→ C
2,4’,5’
OH 13,969 H → C
6,10,5
3.1.3. Nhận dạng 6,8-chloro-3’,5,7-trihydroxy-4’-methoxyflavanone:
- Sản phẩm thu được có dạng bột, màu vàng nhạt, độ sạch > 96%.
- Phổ IR (cm
-1
): 3529, 3360, 2944, 2902, 2846, 1630, 1516, 1443, 1346, 1264, 1181, 1128,
1096, 883, 796, 552.
- Khối phổ MS cho pick [M+H
+
] = 370 tương ứng với trọng lượng phân tử là 369.
- Phổ
1
H-NMR δ (ppm): 3.782 (3H, s, -CH

10
), 112.082 (C
2’
), 114.005 (C
5’
), 117.598 (C
6’
), 130.355 (C
1’
), 146.504 (C
3’
),
148.032 (C
4’
), 155.886 (C
9
), 156.576 (C
5
), 156.965 (C
7
), 196.530 (C
4
).
3.1.4. Nhận dạng 6,8-dibromo-3’,5,7-trihydroxy-4’-methoxyflavanone:
- Sản phẩm thu được có dạng bột, màu vàng nhạt, độ sạch khoảng 93%.
- Phổ IR (cm
-1
): 3542, 3387, 2973, 2937, 2841, 1635, 1560, 1516, 1442, 1401, 1347, 1298,
1258, 1179, 1130, 1103, 1074, 1020, 965, 869, 829, 789, 725, 688, 628, 591, 551.
- Khối phổ MS cho pick [M+H

→ C
10,1’,4
H
3
→ C
2,1’,4
4 196,623
5 158,394
6 90,675
7 159,029
8 89,801
9 157,648
10 102,788
1’ 130,398
2’ 6,947 (1H, d, J=2) 112,038 H
2’
→ C
6’, 3’,2,1’
3’ 146,504
4’ 148,004
5’ 6,964 (1H, d, J=8,5) 113,983 H
5’
→ C
1’,4’,2,6’
6’ 6,883 (1H, dd, J=2 và 8,5) 117,546 H
6’
→ C
2,5’,4’
OH 9,104
OH 12,866 H → C

2’,3,4,4’-tetramethoxy-6’-
hydroxychalcone
77.01 61.17 64.07 67.42 ± 8.43
2
2’,3,4’-tripropoxy-4-methoxy-
6’-hydroxychalcone
32.77 21.88 38.78 31.14 ± 8.56
3
6,8-chloro-3’,5,7-trihydroxy-
4’-methoxyflavanone
63.70 65.19 62.61 63.83 ± 1.30
4
6,8-dibromo-3’,5,7-trihydroxy-
4’-methoxyflavanone
68.65 69.34 70.92 69.63 ± 1.17
5 Hesperetin 79.85 76.05 78.43 78.11 ± 1.92
6
Chứng dương (camptothecin
0.01 µg/ml)
48.67 53.89 48.37 50.31 ± 3.11
 Dòng tế bào: Ung thư phổi NCI-H460
STT Mẫu
Tỉ lệ (%) gây độc tế bào
Lần 1 Lần 2 Lần 3 TB ± ĐLC
1
2’,3,4,4’-tetramethoxy-6’-
hydroxychalcone
77.01 61.17 64.07 67.42 ± 8.43
2
2’,3,4’-tripropoxy-4-methoxy-

4’-methoxyflavanone
70.52 69.32 72.05
70.63 ± 1.37
3 Hesperetin
34.19 39.43 39.34
37.65 ± 3.00
TB, ĐLC: trung bình, độ lệch chuẩn
Kết luận: chúng tôi đã tồng hợp thành công các dẫn xuất của Hesperetin và kết quả thử nghiệm
sàng lọc thô ở nồng độ 100(µg/ml) trên 3 dòng tế bào ung thư cổ tử cung HeLa, ung thư vú
MCF-7 và ung thư phổi NCI-H460 cho thấy ngoại trừ 2’,3,4’-tripropoxy-4-methoxy-6’-
hydroxychalcone có khả năng gây độc tế bào yếu thì các chất còn lại đều có khả năng gây độc
tế bào (63-86%) tương tự như Hesperetin (63-78%), khả năng gây độc chêch lệch ít giữa các
dòng tế bào. Tuy nhiên giá trị IC
50
trên dòng MCF-7 của hai dẫn xuất halogen lại cao hơn
hesperetin cho thấy khả năng gây độc của các hợp chất này vẫn còn thấp, cần có nhiều nghiên
cứu tổng hợp thêm các hợp chất khác.
Tài liệu tham khảo
1. Yanling Li, Hao Fang, Wenfang Xu, Recent advance in the research of flavonoids as
anticancer agents, Mini-Reviews in Medicinal Chemistry, 2007, 7, 663-678.
2. Hoàng Thị Kim Dung, Nguyễn Cửu Khoa, Nguyễn Ngọc Hạnh, Nguyễn Thị Thu
Hương, Hồ Việt Anh, So sánh hoạt tính chống oxy hóa của một số flavonoid (dạng
glucosid và dạng genin) chiết từ hoa hòe và vỏ quýt, Tạp chí Dược liệu, Tập 11, số 5,
trang 185-188 (2006).
3. Regioselective bromination of aromatics using KBr/oxone, Synth. Comm., 2002, 32
(15), 2313-18.
4. Hồ Huỳnh Thùy Dương, Báo cáo tổng kết đề tài Xây dựng và hoàn chỉnh các quy trình
dùng trong sàng lọc tính kháng phân bào của cây thuốc ở mức độ tế bào và phân tử,
Chương trình Nghiên cứu cơ bản, Sở Khoa học và Công nghệ Tp.HCM 2007.