




SÀNG LC CÁC CÂY THUC
VIT NAM CÓ TÁC DNG C CH
XANTHIN OXIDASE IN VITRO

KHÓA LUN TT NGHI

- 2014

LI C
 hoàn thành khoá luc s  vô cùng quý báu ca các thy
cô giáo, bi thân.
c tiên tôi xin bày t li clòng bic ti TS. Nguyn
Thu , TS. Nguyn Qunh Chi, TS. Nguyn Hoàng Anh, DS. Phc Vnh - nhng
i th, tng dng viên tôi trong sut quá trình
 tài này.
Tôi xin chân thành cng y, Ban giám hiu cùng toàn th các thy cô ào
to, các b môn, phòng ban khác ca Ti hc Hà Nu kin cho tôi hc
tng kin thc b ích trong suc va qua.
Tip theo tôi xin chân thành cy, cô và các anh ch t viên B môn c
lc nhit tình ng viên và tu kin cho tôi trong sut quá trình nghiên cu và
thc hi tài.
Tôi xin gi li cn TS. Phùng Thi Vin Dc liu; TS. Trn Th Bách,
Vin Sinh thái và Tài nguyên sinh vt Vit Nam; PGS.TS. Nguyn Th Hoài, khoa Dc, Tng
i hc Hu p mu nghiên c tôi thc hi tài.
Trong quá trình tìm kim tài liu và tra cu thông tin, tôi còn nhc s  rt
nhit tình ca các anh ch c tp ti  và Group
Tôi xin chân thành c  ht s
Li cui cùng, tôi xin gi li cn nh  n bè,
nhbên cnh và ng h ht lòng, tu kin tt nhng viên và
 tôi hoàn thành khoá lun này.
Hà Ni, tháng 5 
Sinh viên
Nguyn Th Thu Hoài

2.1.1. M 17
2.1.2. Chun b mu nghiên cu 18
 19
 19
2.2. NI DUNG NGHIÊN CU 19
U 20
 20
 20
2.3.3. Tin hành 21
 23
T QU VÀ BÀN LUN 24
3.1. KT QU 24
3.1.1. Kt qu sàng lc tác dng c ch xanthin oxidase in vitro ca các
mc liu, thc vt 24
nh IC
50
ca các mu c liu, thc vt ti
39
3.2. BÀN LUN 41
3.2.1. V kt qu sàng lc 41
3.2.2. V kt qu c ch xanthin oxidase ca các cây thuc ti . 46
KT LUN 50
 XUT 51
TÀI LIU THAM KHO
PH LC DANH MC CÁC CH VIT TT VÀ KÍ HIU
VQG
:
n quc gia
XO
:
Xanthin oxidase
DANH MC CÁC BNG

Bng 2.1. B trí hn hp phn ng trong tng ging 21
Bng 3.1. ng ca các mc liu lên ho XO in vitro ti các n
100 µg/ml, 50 µg/ml, 10 µg/ml 25
Bng 3.2. ng ca các mu thc vt lên ho XO in vitro ti các n

Hình 1.2. Cu trúc không gian ca xanthin oxidase 9
Hình 2.1. Quy trình thí nghing c ch xanthin oxidase ca các
mu th 22
1

T V
c bit n tính là nguyên nhân và
là yu t  dn các bt áp, bnh tim mch, bnh
thn, bng typ II [51], [82], [100]. t là bnh lý ri lon
chuyn hóa, viêm khp mn tính ph bin nhng ngày càng 
Các thuu tr  theo y hc hi rõ
ràng, tác dng nhanh và hiu qu u tr i tt. Mt trong nh
dc lý quan trng ca các thuc h acid uric máu là xanthin oxidase, enzym
then chng sinh tng hp acid uric. Tuy nhiên, t
bnh lý ri lon chuyn hóa nên bng phi dùng thuc lâu dài. Trong
ng có giá th li cho bnh nhân nhiu
tác dng không mong mun. Vì vy, vic tìm kim ngun thuc thay th vi hiu
qu u tr  hot trng thc
ng nghiên cc quan tâm phát trin.
Vic tìm kim các hp cht làm thuc t ngun nguyên liu thiên nhiên luôn
c phát tric  nhic. Khai
thác ngun tài nguyên sinh hc t nguc lic s dng theo kinh nghim
trong nhân dân và sàng lc tác dc lý ca dch chit t c liu này là
ng tip cn phát hin và phát trin các thuc mi phc v u tr [83].
Vn là mm trong vùng nhii gió
mùa, Vit Nam có thm thc vng và phong phú vi nhi
c nghiên cu v tác dng sinh hc, nn y hc c truyn phát trin t ri.
Dân gian s dng rt nhiu các bài thuc, v thu u tr các bnh v 
khng phong (bnh gút theo y hc c truyn), phong thp n nay
c ta có 3948 loài cây thuc, thuc 307 h ca 9 ngành thc vt

1.1. 
1.1.1. 
Acid uric là sn phm chuyn hóa cui cùng ca -
nhân purin (adenin, guanin) trong          
phosphoribosyl pyrophosphatase (PRPP), nucleoside phosphorylase, xanthin
oxidase (XO) [36], [41] (H. ác base purin (adenin và guanin) là
sn phm trung gian ca quá trình thoái hóa các acid nucleic (ADN, ARN). Tip
theo, adenin và guanin b thy phân gii phóng nhóm amin to thành hypoxanthin
i tác dng ca enzym xanthin oxidase hypoxanthin b oxy hóa thành
xanthin ri thành acid uric [3].
. [41]
4




[9], [40], [96].


[58], [63].



[12], [36]. 

id uric máu


hot dch khp, trong mô s dn bp mn tính
do gút; các vi tinh th urat lng ti mô mm, bao gân to nên ht tophi [12],
[40].
gút [40]

gút càng cao [128].
 d uric máu và các bnh khác liên quan
Ghiu các nghiên cu  ra rng g acid 
mc bnh thn, b
ng [51], [82], [96], [118]. Các nghiên cu can thip gp
bng chng cho thy, gim urat khi s dng allopurinol có th làm chm tin trin
ca suy thn mn tính, bnh tim mch [40], [52], [96].
h
.
6

1.1.
   ca các thuc u tr     hin nay là c ch
xanthin oxidase hoc gây thi tr acid uric c tiu. Ngoài ra, nhóm thuc tiêu
n th nghim lâm sàng, tuy nhiên nhóm thuc này
gp phi nhng hn ch nhc ng du tr 
uric máu mn tính.
1.1.3.1. Gim tng hp acid uric thông qua c ch enzym xanthin oxidase
      

 Allopurinol
- : Allopurinol  
 [2], [92].
- : Allop
 [2]. 

 u có enzyme uricase, mt loi enzym chuyn hóa acid uric thành allantoin
d    i t  [40], [97]. Vì vy, truy     c
chng minh có tác dng phân gii acid uric [90]ng này m ng
u tr mi cho nhng bnh ng vi các thuu tr 
uric máu mn tính n nay.
Rasburicase: là mt uricase tái t hc FDA cho phép s d h
acid uric ngn ngày trên trên tr em mc hi chng phân gii khi u (tumour lysis
syndrome)  [115]. Tuy nhiên quá trình s d
ng yêu c u tr    mn tính b hn ch bi tính kháng
nguyên cao, t
1/2
ngn và kh dung np kém.
8

PEGylated uricase: là mt dng dn cht cc gn thêm chui
 làm gim tính kháng nguyên và kéo dài thi gian bán thi
i uricase [49].
1.2. ENZYM XANTHIN OXIDASE
1.2.1. 
Xanthin oxidase là mt enzym có vai trò then chng to ra
c chuyn hóa thành hypoxanthin và xanthin,
i tác dng xúc tác ca enzym XO chúnc oxy hóa thành acid uric. Enzym
XO có vai trò quan tru hòa n acid uric máu, bt kì tác
ng nào n hong cn s to thành acid
uric [3], [20]. Vì vy, enzym XO là mt trong nhc lý chính
mà các thuu tr ng ti.
1.2.2. 
1.2.2.1. Ngun gc, phân b

[14]. Trong c ng

0

 
. 

0

0
C [44], [65]. 
   

0

- pH: 
 7,5  8,0 [65].
10

- g ( : Hg
2+
, Ag
+


[3], [14].
1.2.4.  
 
- 
 :
Xanthin + H
2

O + 2O
2















Acid uric + 2H
2
O
2

Acid uric + O
2








[79].
 
             
   y,
x 
qua   
0
C [39].

11

 
  :       -amino-4-hydroxypteridin (AHP)



[103].
1.3. CÁC NGHIÊN    
ASE IN VITRO
Xanthin oxidase 
in vitro 


  oxidase

1.3.1. 
in vitro, 

 :

50
< 50 µg/ml [110].
, nghiên cu sàng lc tác dng c ch c tin hành vi 18
dch chic, methanol và hn hc - methanol t c lic ngi
dân b a   s dng theo kinh nghi  u tr bnh gút và các triu
chng liên quan. Kt qu cho thy 14 dch chit th hin tác dng c ch XO 
n 100 µg/mlch chit có tác dng c ch lt
tính XO và IC
50
< 100 µg/ml. Bn dch chit methanol th hin tác dng c ch XO
in vitro mnh nht: Coccinia grandis (IC
50
= 29,79 µg/ml), Datura metel (IC
50
=
76,75 µg/ml), Strychnos nux-vomica (IC
50
= 6,8 µg/ml) và Vitex negundo (IC
50
=
78,75  tác dng h acid uric in vivo trên mô hình gây
p bng kali oxonat [116].
ng s n hành nghiên cu sàng lc tác dng
c ch XO in vitro ca 84 dch chit ethanol và methylen clorid-methanol t 27
13

c li c s dng theo kinh nghi  u tr bnh gút, viêm khp hoc
bnh thp khp ca Cng hòa Séc và khu vc min Trung - t qu cho
thy, khong 50% s loài th hin tác dng c ch XO  n 200 µg/ml. Trong
  hin tác dng mnh nht là dch chit methylen chlorid-methanol ca


  
            
in vitro
[27], [29], [38], [40]. 

nghi   

[76]. 
               
enzym, Li 
       ) là: myricetin (IC
50
=62,7µg/ml), luteolin
(IC
50
=3,29 µg/ml) [74]. 
XO in vitro      sepigallocatechin, acacatechin, myricetin,
naringenin, daidz

50
-


50
24 ± 0,28 µg/ml [117].
1.3.2. 
       




50
= 3,9 µM [84]. N
     Chrysanthemum sinense   1


    
50
dao   -      
allopurinol (IC
50
= 2,5 µM) [86].  Tetracera
scandens -

50
= 1,9 µM) 
50
= 2,5 µM) [87].
, T
 in
vitro  
             
16

   t
 
0 µg/ml  50 µg/ml 
10 µg/ml      ,
 trên 50%.  tác



- 

cây      
   
 
 .
 
 
.
-  thông tin và
+ 
 

[6], [13], [16].
+ 
 