Luận văn thạc sĩ

Nguyễn Thị Hà Bình

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
---------------------

Đặng Thị Kiều Oanh

Xác định hàm lượng Ochratoxin trong thực phẩm bằng phương pháp sắc ký lỏng
hai lần khối phổ (LC-MS/MS)

LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC

Hà Nội

1


Luận văn thạc sĩ

Nguyễn Thị Hà Bình

MỞ ĐẦU
Vấn đề an toàn vệ sinh thực phẩm ngày càng được quan tâm bởi nó liên quan
trực tiếp tới sức khỏe của tất cả người tiêu dùng. Thời gian vừa qua trong nước liên
tiếp phát hiện các vụ ngộ độc thực phẩm trong đó có các vụ ngộ độc mycotoxin đặc
biệt nghiêm trọng …đã gây ra tâm lý lo ngại cho người tiêu dùng khi lựa chọn thực
phẩm cũng như sử dụng thực phẩm thế nào là đúng cách. Theo thống kê của Cục
An toàn thực phẩm về các vụ ngộ độc thực phẩm trong những năm gần đây trên cả

là có hại đối với gia súc gia cầm và con người. Các loại nấm này sản sinh ra các độc
tố được gọi chung là mycotoxin... Mycotoxin là chất độc sinh ra từ nấm mốc, được
hình thành khi nấm chuyển hóa các chất dinh dưỡng có trong thức ăn và nguyên
liệu. Theo tổ chức lương thực và nông nghiệp Liên Hiệp Quốc (FAO), khoảng 25%
số ngũ cốc thế giới có chứa một hàm lượng mycotoxin ở một mức độ nào đó. Tùy
vào địa lý, khả năng nhiễm mycotoxin lại khác nhau. Ở điều kiện nhiệt đới và cận
nhiệt đới, nguy cơ nhiễm mycotoxin càng cao. Đặc thù khí hậu và nền sản xuất
nông nghiệp ở Việt Nam tình trạng nhiễm độc tố nấm mốc là khá phổ biến. Sự hình
thành nấm mốc và độc tố của chúng có thể bắt đầu từ khi cây còn ở trên đồng, lúc
thu hoạch, trong khi bảo quản hoặc ngay cả trong quá trình chế biến thức ăn cho vật
nuôi. Như vậy, không nơi nào trên thế giới có thể thoát khỏi nấm mốc và độc tố từ
chúng, và tác hại của chúng là vô cùng to lớn đối với năng suất vật nuôi và sức khỏe
con người.
Để kiểm soát mức độ nhiễm ochratoxin trong thực phẩm, ở Việt Nam cũng
như trên thế giới đã có nhiều phương pháp phân tích được nghiên cứu và ứng dụng.
Nhưng với những đặc điểm ưu việt và độ chính xác cao nên các phương pháp phân
tích sắc ký lỏng khối phổ được coi là phương pháp phân tích có giá trị pháp lý để
phát hiện và định lượng nồng độ ochratoxin ở lượng vết hay siêu vết.
Xuất phát từ tính cấp thiết của xã hội và tính ưu việt của phương pháp phân
tích, chúng tôi xây dựng phương pháp nghiên cứu:
"Xác định hàm lượng Ochratoxin trong thực phẩm bằng phương pháp sắc ký lỏng
hai lần khối phổ (LC-MS/MS)”.
Mục tiêu của thực hiện đề tài nghiên cứu là:
1.

Xây dựng phương pháp xác định hàm lượng của Ochratoxin trong thực
phẩm bao gồm:

- Khảo sát các điều kiện trên máy sắc ký lỏng hai lần khối phổ
- Khảo sát các điều kiện xử lý mẫu.

thường xuyên trong thịt. Ở Anh, chúng được tìm thấy trong đậu nành, bắp bột, ca
cao. M.Nakajima năm 1997 đã ghi nhận tỷ lệ chiểm 30% ở hàm lượng OTA từ 0.1
– 17,4 µg/kg ở 47 mẫu café được nhập vào Nhật Bản từ các nước Nam Phi , và một
số nước ASIAN. Tại Việt Nam, nghiên cứu tiến hành trên 123 mẫu ngô của 2 xã
Cán Tỷ và Lùng Tám huyện Quản Bạ tỉnh Hà Giang. Kết quả cho thấy: trong 123
mẫu ngô được phân tích có tới 50 mẫu (40,7 %) phát hiện có ochratoxin A, trong số
đó có 2 mẫu (1,6 %) vượt mức dư lượng theo quy định của Bộ Y tế.
Cho tới nay đã phát hiện được 3 loại ochratoxin khác nhau. Trong khuôn khổ
luận văn chúng tôi quan tâm nghiên cứu đến ochratoxin A và B

5


Luận văn thạc sĩ

Nguyễn Thị Hà Bình

Ochratoxin B

Ochratoxin A
Hình 1.1: Cấu trúc các Ochratoxins
1.1.2.Tính chất hóa lý của Ochratoxins
Ochratoxins là đốc tố tinh thể không màu, bền với nhiệt, tan trong dung môi
hữu cơ phân cực như chloroform, methanol, …, ít tan trong nước và tan trong đệm
carbonat loãng). Ochratoxins rất bền vững với các xử lý nhiệt và hóa chất. Độc tố
được sản sinh nhiều nhất ở nhiệt độ từ 20-25 0C. Sự sản sinh ochratoxins phụ thuộc
chủng nấm mốc, hoạt tính của nước trong hạt, cơ chất, nhiệt độ. Ochratoxins dễ bị
phân hủy bởi ánh sáng, trong môi trường kiềm hoặc chất tẩy rửa.
Ochratoxin A phát huỳnh quang và hấp thụ UV cực đại tại 365nm. Ochratoxin
A có điểm nóng chảy ở 1690C. Phổ hồng ngoại trong cloroform cho các píc có độ

- Gây tổn thương tế bào gan: tất cả các trường hợp xác định sự ngộ độc
Ochratoxin đều có bệnh tích giống nhau ở chỗ gan bị hư hại nặng. Tùy theo mức độ
nhiễm ít hay nhiều, lâu hay mau mà tình trạng bệnh trên gan khác nhau. Biểu hiện
chung là ban đầu gan động vật (điển hình là gà) biến thành màu vàng tươi, mật sưng
sau đó gan sưng phồng và bắt đầu nổi các mụn nhỏ trên bề mặt làm cho nó gồ ghề
đôi khi có những nốt hoại tử màu trắng, sau cùng do nhiễm khuẩn mà gan trở nên
bở và dễ vỡ
- Thận sưng to làm cho việc đào thải chất độc ra khỏi cơ thể trở nên hết sức

7


Luận văn thạc sĩ

Nguyễn Thị Hà Bình

khó khăn, từ đó làm cho triệu chứng ngộ độc trở nên trầm trọng
- Làm giảm khả năng đề kháng của động vật, ức chế hệ thống sinh kháng thể,
có thể gây tử vong cho động vật. Khi nhiễm độc ochratoxin cơ thể rất mẫn cảm với
các loại bệnh thông thường
- Bào mòn niêm mạc của ống tiêu hóa do lớp tế bào niêm mạc bị chết bong
ra và bị khô lại hình thành nên một lớp màng bọc làm cản trở sự chuyển thức ăn đi
trong ống tiêu hóa
- Làm thay đổi hoạt động sinh lý bình thường gây rối loạn sinh sản. Ở thú
mang thai có thể gây chết thai. Đối với gia cầm có thể gây tỷ lệ chết phôi ở giai
đoạn đầu rất cao, tỷ lệ nở thấp
- Làm giảm tính ngon miệng đối với thức ăn do sự phát triển của nấm mốc
làm mất mùi thức ăn
- Làm hư hại các vitamin trong thức ăn do sự lên men phân giải của nấm
mốc

Bảng 1.1: Mức dư lượng tối đa cho phép của Ochratoxin A ở Việt Nam
Loại
Ngũ cốc chưa qua chế biến

µg/g
5

Hạt cà phê rang, cà phê bột
5
Cà phê uống liền
10
Rượu vang, nước nho ép
2
Thực phẩm dành cho trẻ dưới 36 tháng tuổi
0,5
Gia vị
30
Sản phẩm chiết xuất từ cam thảo
80
Ngũ cốc và bột ngũ cốc
3
Hiện chưa có quy định cụ thể nào về mức MRL cho ochratoxin B kể cả trong
nước và tiêu chuẩn Châu Âu (EN)
1.2 Các phương pháp xác định

1.2.1 Phương pháp ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay).
Nguyên tắc dựa trên sự kết hợp đặc hiệu giữa kháng nguyên và kháng thể.
Ochratoxin chuẩn được cộng hợp với enzyme, tạo thành phức hợp Ochratoxinenzyme và được sử dụng như một kháng nguyên ở nồng độ nhất định, cạnh tranh
với ochratoxin có trong mẫu. Kháng thể đặc hiệu với ochratoxin được gắn lên bề
mặt giếng nhựa polystryren. Dịch chiết mẫu trong methanol 70% được trộn cộng

Prazeresb, Virginia Chua, João Pedro Conde [32] đã xác định Ochratoxin trong mẫu
rượu với giới hạn phát hiện là 0,85 ng/ml. Ochratoxin được phát hiện trong dung
dịch đệm PBS với việc sử dụng cấu hình một kênh thẳng.
Kỹ thuật có ưu điểm: nhanh, đơn giản,tiết kiệm dung môi, đặc hiệu và khá
nhạy nhưng so với phương pháp HPLC thì kém hiệu quả hơn do dễ cho kết quả
dương tính giả hoặc âm tính giả
1.2.2 Phương pháp sắc ký khí (Gas chromatography-GC)
Phương pháp sắc ký khí đã được một số tác giả ứng dụng để xác định các
loại độc tố Ochratoxin. Tuy nhiên phương pháp chỉ phân tích được những chất dễ
bay hơi, còn các chất khó bay hơi thì phải tạo dẫn xuất nên tốn thời gian và hóa
chất. Hơn nữa, để phân tích được đồng thời các chất thì cần thời gian phân tích dài.
Do vậy, phương pháp ít được ứng dụng để phân tích các loại độc tố Ochratoxin này
Tác giả Yuying Jiao và các cộng sự [31] đã tiến hành xác định Ochratoxin
trong thực phẩm bằng phương pháp sắc ký khí. Ở đó Ochratoxin A được chuyển

10


Luận văn thạc sĩ

Nguyễn Thị Hà Bình

thành dạng dẫn xuất ester 0-methyl ochratoxin A và được xác định bằng sắc ký khí
khối phổ với chế độ ESI âm.

1.2.3. Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và cột ái
lực miễn dịch (IAC)
Giống như ELISA, cột ái lực miễn dịch cũng dựa trên sự kết hợp đặc hiệu
giữa kháng nguyên và kháng thể. Kháng thể đặc hiệu với ochratoxin được gắn lên
giá rắn của cột sắc ký (thường dùng Sepharose 4B), tạo cho IAC đặc tính vừa tinh


bản, nó là phương pháp sắc ký lỏng sử dụng bộ phận phát hiện là detector khối phổ.
Phương pháp có nhiều ưu điểm như độ chọn lọc cao, giới hạn phát hiện thấp, thời
gian phân tích nhanh, có thể định lượng đồng thời các chất có thời gian lưu giống
nhau mà phương pháp sắc kí lỏng thường không làm được.
R. Vatinnoa, D. Vuckovica, C.G. Zamboninb, J. Pawliszyna [28] đã tiến
hành xác định Ochratoxin trong 96 mẫu nước tiểu bằng phương pháp vi chiết pha
rắn kết hợp với sắc ký lỏng khối phổ. Mẫu được chỉnh pH về 3 bằng đệm
photphatsalin 0,5 M trước khi vi chiết pha rắn. Chương trình sắc ký lỏng được
gradient ở khoảng 8 phút đã có thể cho ra chất phân tích với tín hiệu tốt. Độ thu hồi,
độ chụm được tiến hành đo ở 3 mức nồng độ 1, 10, 50 ng/ml. Giới hạn phát hiện và
giới hạn định lượng ở trong nước tiểu tương ứng là 0,3 và 0,7 ng/ml. Cột sắc ký sử
dụng là cột C18 – Waters, tốc độ dòng 0,5 ml/phút. Pha động: 90% kênh A (nướu,
acetonitril, aceticacid 90:10:0,1) trong 1 phút, tăng tỷ lệ 60% A/40%B (acetonitril
và acetic acid 100:0,1) trong 6 phút, đưa về 90% B ở giây tiếp theo và giữ trong
vòng 1 phút. Tổng thời gian chậy sắc ký là 8 phút. Detector khối phổ thực hiện ở
chế độ ion âm, IS=-4V, nhiệt độ nguốn 4000C, với ochratoxin A có các thông số
tương ứng: DP=-20V, FP=-74V, EP=-8,6, CE=-25V, CXP=-9,5V, với ochratoxin B
có các thông số tương ứng: DP=-20V, FP=-86, EP=-8,6, CE=-44,41V, CXP=15,11V. Ion định dạng: OTA: m/z 402.1->357.9, OTB: m/z 368.0->133.1. ở trong
nghiên cứu này tác giả coi ochratoxin B như là một nội chuẩn, được thêm vào từ
đầu để kiểm soát hiệu suất thu hồi. Đầu vi chiết pha rắn được nhúng vào 1 ml mẫu ở
tốc độ khuấy 850 rpm, thời gian hấp thụ và giải hấp thụ là 1 giờ 15 phút. Phương
pháp có ưu điểm tính tự động hóa cao, ít độc hại cho người phân tích.
Tại Viện nghiên cứu thuốc trừ sâu và nước, Đại học Jaume, Tây Ban Nha,
nhóm tác giả Eduardo Beltrán [20] đã nghiên cứu xác định một số mycotoxin
trong thực phẩm và sữa bằng sắc ký lỏng khối phổ. Mẫu được chiết bởi acetonitril:
nước (80:20), làm sạch mẫu bằng cột ái lực miễn dịch (Aflaochra HPLCTM) được
cung cấp bởi Vicam (Tecasa, Madrid, Tây Ban Nha). Phương pháp cho độ thu hồi
80-110% tại mức thêm chuẩn 0,025 và 0,1 ng/g, RSD nhỏ hơn 15%.




Luận văn thạc sĩ

Nguyễn Thị Hà Bình

động là chất lỏng. Mẫu phân tích được chuyển lên cột tách dưới dạng dung dịch.
Khi tiến hành chạy sắc ký, các chất phân tích được phân bố liên tục giữa pha động
và pha tĩnh. Trong hỗn hợp các chất phân tích, do cấu trúc phân tử và tính chất lí
hoá của các chất khác nhau, nên khả năng tương tác của chúng với pha tĩnh và pha
động khác nhau. Do vậy, chúng di chuyển với tốc độ khác nhau và tách ra khỏi
nhau.

Sắc ký lỏng

Ion hóa

Bộ phân
tích khối

Detector/ Lưu
giữ số liệu

Hình 1.3: Sơ đồ đơn giản của hệ thống sắc ký lỏng.
Trong HPLC, pha tĩnh chính là chất nhồi cột làm nhiệm vụ tách hỗn hợp chất
phân tích, đó là những chất rắn, xốp và kích thước hạt rất nhỏ, từ 3 – 7 µm. Tuỳ
theo bản chất của pha tĩnh, trong phương pháp sắc ký lỏng thường chia làm 2 loại:
sắc ký pha thường (NP-HPLC) và sắc ký pha ngược (RP-HPLC)
 Sắc ký pha thường: pha tĩnh có bề mặt là các chất phân cực (đó là các silica trần
hoặc các silica được gắn các nhóm ankyl có ít cacbon mang các nhóm chức

Detector là bộ phận quan trọng quyết định độ nhạy của phương pháp. Tuỳ
thuộc bản chất lí hoá của chất phân tích mà lựa chọn detector cho phù hợp. Một số
loại detector dùng trong HPLC như: Detector quang phổ hấp thụ phân tử (UV-VIS),
detector huỳnh quang (RF), detector độ dẫn, detector mảng diot (DAD), detector
khối phổ (MS).
1.3.2 Khối phổ (Mass Spectrometry)
Khối phổ là thiết bị phân tích dựa trên cơ sở xác định khối lượng phân tử của
các hợp chất hóa học bằng việc phân tách các ion phân tử theo tỉ số giữa khối lượng
và điện tích (m/z) của chúng. Các ion có thể tạo ra bằng cách thêm hay bớt điện tích
của chúng như loại bỏ electron, proton hóa,... Các ion tạo thành này được tách theo
tỉ số m/z và phát hiện, từ đó có thể cho thông tin về khối lượng hoặc cấu trúc phân
tử của hợp chất.

15


Luận văn thạc sĩ

Nguyễn Thị Hà Bình

Tránh ion phân tích va chạm
với ion trong không khí

Chân không cao

Nguồn ion

Phân tích
khối




Luận văn thạc sĩ

Nguyễn Thị Hà Bình

Hình 1.5: Bộ nguồn ion hóa.
Khi dung dịch mẫu ra khỏi cột sắc ký, được đưa vào ống mao quản bằng kim
loại. Đầu mao quản này được áp điện thế cao (4-6 kV). Khi điện tích dư trên đầu
mao quản vượt qua sức căng bề mặt của dịch mẫu thì sẽ tạo thành các giọt mang
điện tích. Tiếp đó các giọt mang điện này được làm giảm kích thước nhờ hai quá
trình liên tục xảy ra, đó là sự hóa hơi dung môi nhờ dòng khí N 2 được liên tục thổi
vào và sự bắn phá của các giọt tích điện cùng dấu. Cuối cùng dẫn đến sự hình thành
pha hơi của các ion. Nhờ lực hút tĩnh điện mà các ion này được dẫn vào bộ phân
tích khối phổ qua một cửa sổ rất nhỏ. Dung môi và khí trơ N 2 được hút ra ngoài do
một dòng khí (Curtain Gas).
Có 2 chế độ bắn phá: bắn phá với chế độ ion dương và ion âm.


Loại hình thành ion dương.

o

Phù hợp nhất cho phân tích các loại thuốc có tính bazo.

o

Thường hình thành nên ion [M+H]+.

o

chất có khối lượng phân tử trung bình. Kĩ thuật này có thể bắn phá ở 2 chế độ: ion
âm và ion dương.


Bộ phận phân tích khối
Là trái tim của máy khối phổ, có nhiệm vụ phân tách các ion có trị số m/z

khác nhau thành từng phần riệng biệt, có nhiều bộ phân tích khối khác nhau như:
Bộ phân tích tứ cực, phân tích tứ cực chặp ba, phân tích bẫy ion, phân tích thời gian
bay... Hiện nay, có ba loại phân tích khối thường được sử dụng nhất, đó là:


Bộ phân tích tứ cực (Quadrupole Analyser)- Phân giải bằng tổ hợp điện.
Máy tứ cực dựa trên nguyên tắc các ion có khối lượng khác nhau sẽ dao

động khác nhau theo điện áp tổng hợp một chiều và xoay chiều đặt vào môi trường
di chuyển của nó.
Máy gồm 4 thanh cực ghép song song nối với nhau từng đôi một đối diện
nhau, tạo thành hai cặp, sau đó chúng nối với điện áp một chiều tạo thành 2 cặp
dương và âm. Ngoài điện áp một chiều, hai cặp điện cực còn được nối với điện áp
xoay chiều. Tổ hợp điện áp này đặc biệt là điện áp xoay chiều sẽ thay đổi theo chu
kỳ để quét khối lượng các ion:
+ Ion cộng hưởng
+ Ion không cộng hưởng.

18


Luận văn thạc sĩ


Q0

Q1

Q2

Q3

Hình 1.7: Mô hình bộ phân tích tứ cực chặp ba
Trong đó:
Q0: Nguồn ion mẹ.
Q1: Bộ tứ cực thứ nhất, có nhiệm vụ tách các ion. Lựa chọn ion mẹ với m/z nhất

19


Luận văn thạc sĩ

Nguyễn Thị Hà Bình

định từ nguồn ion chuyển đến để chuyển đến Q2.
Q2: Bộ tứ cực thứ hai, ở điều kiện áp suất cao, các ion mẹ bị phân li do va chạm
với khí trơ có mặt như khí N2, Ar, He. Bộ Q2 tạo ra phân ly do các ion mẹ bị phân
mảnh tiếp theo tạo ra các ion nhỏ hơn, ion con (daughter ions). Q2 không đóng vai
trò là bộ lọc ion mà nó chấp nhận tất cả các ion do Q1 chuyển đến. Sau đó tất cả các
ion con được chuyển qua bộ tách Q3.
Q3: Bộ tứ cực thứ ba làm nhiệm vụ tách các ion được chuyển từ Q2 để đi tới bộ
phận phát hiện.
Thiết bị khối phổ ba tứ cực thường được gọi là máy khối phổ hai lần (LCMS/MS).



2.1.1. Đối tượng nghiên cứu
- Ochratoxin là độc tố gây tác hại vào các cơ quan quan trọng của cơ thể như:
thần kinh, gan, thận và hệ miễn dịch. Ochratoxin A gây hậu quả nghiêm trọng đối
với người và động vật nuôi ở nồng độ cực thấp (ppb). Ochratoxin B có tính độc ít
hơn ochratoxin A , tuy nhiên chúng đều là chất độc thuộc nhóm IIB theo Tổ chức
nghiên cứu ung thư Quốc tế IARC.
- Nền mẫu phân tích: ngũ cốc và các sản phẩm từ ngũ cốc, các loại rượu lên
men.

2.1.2. Nội dung nghiên cứu
Nội dung nghiên cứu bao gồm:
 Tối ưu hóa điều kiện chạy máy xác định độc tố Ochratoxin có trong sản
phẩm rượu lên men, ngũ cốc và sản phẩm từ các loại ngũ cốc bằng phương pháp sắc

21


Luận văn thạc sĩ

Nguyễn Thị Hà Bình

ký lỏng khối phổ (LC-MS/MS).
 Xây dựng quy trình tách chiết chất phân tích.
 Thẩm định phương pháp:
 Độ đặc hiệu/chọn lọc của phương pháp.
 Giới hạn phát hiện LOD, giới hạn định lượng LOQ
 Khoảng tuyến tính.
 Độ chính xác của phương pháp (độ đúng và độ chụm)
 Áp dụng phương pháp để xác định Ochratoxins trong các loại mẫu thực

Model: AB sciex Triplequard 5500

Cột sắc ký: Water- cột C18 (250mm × 2,1mm × 5μm) và tiền cột C18 (4mm ×

2,1mm × 3μm)


Máy lắc Vortex.

22


Luận văn thạc sĩ

Nguyễn Thị Hà Bình



Cân phân tích (có độ chính xác 0,1mg và 0,01mg) (Metter Toledo).



Cân kĩ thuật (có độ chính xác 0,01g) (Metter Toledo).



Máy cất quay chân không (Eyela).





2.3.2. Dung môi, hóa chất
Các loại hoá chất sử dụng đều thuộc loại tinh khiết phân tích.
o

Chất chuẩn của Supelco, độ tinh khiết 99,8 %.

o

Methanol (Merk) , độ tinh khiết 99,8 %.

o

n-hexan (Merk) , độ tinh khiết 99,8 %.

o

Amoniacetat CH3COONH4 (Merk) , độ tinh khiết 99,8 %.

o

Axit acetic (Merk), acetonitril (Merk) , độ tinh khiết 99,8 %.

o

Nước cất 2 lần
* Chuẩn bị dung dịch chuẩn.
- Dung dịch chuẩn trung gian 500 µg/l: Lấy chính xác khoảng 10µl chất chuẩn

lần lượt của từng chuẩn gốc có nồng độ 50000 µg/l vào một vial màu nâu nắp kín,

50

50

50

25

100

100

500

200

100

1

1

1

1

1

50


3.1.1.1 Khảo sát ion mẹ và ion con
Vì ochratoxin A, B là những chất có khối lượng phân tử không lớn và độ
phân cực trung bình. Qua tham khảo tài liệu chúng tôi tiến hành khảo sát xác định
các ochratoxin bằng kĩ thuật ion hóa phun điện tử ESI với chế độ bắn phá ion âm.
Để tối ưu hóa điều kiện khối phổ, dùng xilanh bơm hỗn hợp 2 chất chuẩn 50 ng/ml
tiêm trực tiếp vào detector khối phổ để khảo sát. Chọn chế độ khảo sát tự động đối
với từng chất để chọn được ion mẹ, ion con dùng để định lượng và định tính đối với
từng chất.
Ion mẹ của từng chất được chỉ ra ở bảng 3.1.
Bảng 3.1: Ion mẹ của từng chất
Chất

Khối lượng phân tử (g/mol)

Ion mẹ (m/z)

Ochratoxin A

403

402 [M-H]-

Ochratoxin B

369

368[M-H]-

25