LỜI CAM ĐOAN
Tôi xin cam đoan nội dung trong đồ án tốt nghiệp là công trình nghiên cứu
thực sự của tôi dưới sự hướng dẫn của TS. Trịnh Thị Lan Anh – giảng viên
trường đại học Công Nghệ TP.HCM. Đề tài được thực hiện trên cơ sở nghiên cứu
lý thuyết, tiến hành nghiên cứu thực nghiệm tại phòng thí nghiệm Công nghệ
Sinh học Thực vật – Viện Khoa Học Ứng Dụng HUTECH, trường Đại học Công
nghệ TP. HCM. Các số liệu, bảng, biểu đồ trong bài là hoàn toàn trung thực.
Đồ án không sao chép dưới bất kỳ hình thức nào, nếu có phát hiện sự gian
lận nào tôi xin chịu hoàn toàn trách nhiệm.
TP.HCM, ngày 30 tháng 7 năm 2018
Sinh viên thực hiện

Hà My Phụng Vỹ

i


LỜI CẢM ƠN
Để hoàn thành đồ án này, trong suốt quá trình thực hiện tôi đã nhận được
rất nhiều sự giúp đỡ từ thầy cô và bạn bè trong Viện Khoa Học Ứng Dụng
HUTECH.
Trước tiên em gửi lời cảm ơn chân thành đến giảng viên hướng dẫn của tôi
TS. Trịnh Thị Lan Anh, cảm ơn cô đã luôn tận tình giảng dạy, chỉ bảo, truyền đạt
những kiến thức quý báu cho tôi. Nhiệt tình hỗ trợ, động viên cho tôi và bạn bè
để hoàn thiện đồ án một cách tốt nhất.
Tôi xin chân thành cảm ơn các anh chị, các bạn, các em trong phòng thí
nghiệm Công nghệ Sinh học Thực vật đã giúp đỡ nhiệt tình, hỗ trợ, đóng góp ý
kiến cho em trong suốt quá trình làm đồ án, giúp em có thể thực hiện tốt đề tài.
Tôi cũng gửi lời cảm ơn đến trường Đại học Công Nghệ TP. HCM đã hỗ
trợ địa điểm cơ sở vật chất cho tôi hoàn thành đồ án.
Cuối cùng tôi xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, người thân và bạn bè đã cổ

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU ................................................................ 9
1.1. Thủy canh ........................................................................................................ 9
1.1.1. Khái niệm ..................................................................................................... 9
1.1.2. Các yêu cầu cơ bản của hệ thống thuỷ canh ................................................ 9
1.1.3. Dung dịch dinh dưỡng thủy canh ............................................................... 11
iii


1.2. Hệ thống thủy canh in vitro ........................................................................... 12
1.3. Tình hình nghiên cứu về phương pháp thủy canh in vitro ............................ 13
1.4. Giới thiệu về cây lan Kim Tuyến (Anoetochilus setaceus Blume.) .............. 14
1.4.1. Giới thiệu chung về cây lan Kim Tuyến .................................................... 14
1.4.2. Đặc điểm hình thái ..................................................................................... 17
1.4.2.1. Thân rễ .................................................................................................... 17
1.4.2.2. Thân khí sinh ........................................................................................... 17
1.4.2.3. Rễ ............................................................................................................ 17
1.4.2.4. Lá ............................................................................................................. 18
1.4.2.5. Hoa, quả .................................................................................................. 18
1.4.3. Nhân giống cây Lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) .......... 19
1.4.3.1. Nhân giống bằng hạt ............................................................................... 19
1.4.3.2. Nhân giống bằng cây con ........................................................................ 20
1.4.3.3. Phương pháp giâm cây ............................................................................ 20
1.4.3.4. Nhân giống in vitro ................................................................................. 20
1.5. Tình hình nghiên cứu cây lan Kim Tuyến .................................................... 21
1.5.1. Tình hình nghiên cứu trên thế giới ............................................................. 21
1.5.2. Tình hình nghiên cứu trong nước ............................................................... 21
1.6. Ảnh hưởng của điều kiện môi trường lên sự sinh trưởng và phát triển của cây
lan Kim Tuyến ............................................................................................... 22
1.6.1. Thành phần và thể tích môi trường ............................................................ 22
1.6.2. Giá thể ........................................................................................................ 22

1.9.2.3. Trong Nông nghiệp ................................................................................. 43
1.10. Hệ thống chiếu sáng đơn sắc ....................................................................... 46

v


1.10.1. Hệ thống chiếu sáng đơn sắc trong nhân giống vô tính thực vật ............. 46
1.10.2. Vai trò của ánh sáng đơn sắc trong nghiên cứu sự tái sinh, sinh trưởng và
phát triển của thực vật ................................................................................... 47
1.11. Giai đoạn ra cây .......................................................................................... 50
CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ....................... 51
2.1. Địa điểm và thời gian tiến hành đề tài .......................................................... 51
2.1.1. Địa điểm ..................................................................................................... 51
2.1.2. Thời gian .................................................................................................... 51
2.2. Vật liệu và phương pháp ............................................................................... 51
2.2.1. Đối tượng nghiên cứu................................................................................. 51
2.2.2. Hóa chất sử dụng ........................................................................................ 51
2.2.3. Môi trường nuôi cấy ................................................................................... 52
2.2.4. Thiết bị và dụng cụ ..................................................................................... 52
2.2.5. Điều kiện nuôi cấy ..................................................................................... 52
2.2.6. Mẫu cấy ...................................................................................................... 53
2.2.7. Nội dung nghiên cứu .................................................................................. 53
2.2.8. Giá thể film nylon PE ................................................................................. 54
2.2.9. Hệ thống nuôi cấy ...................................................................................... 54
2.2.9. Hệ thống chiếu sáng ................................................................................... 55
2.2.9.1. Hệ thống chiếu sáng LED đơn sắc .......................................................... 57
2.2.9.2. Hệ thống chiếu sáng đèn LED hỗn hợp .................................................. 57
2.3. Phương pháp nghiên cứu............................................................................... 59
2.3.1. Thiết lập hệ thống thủy canh in vitro ......................................................... 59
2.3.2. Phương pháp nghiên cứu............................................................................ 59

cây hoàn chỉnh của cây lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.)
trong hệ thống thủy canh in vitro .................................................................. 68

vii


2.3.3.10. Thí nghiệm 10: Khảo sát ảnh hưởng của giá thể đến sự tăng trưởng và
tạo cây hoàn chỉnh của cây lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.)
trong hệ thống thủy canh in vitro khi bổ sung thêm nano chitosan............... 69
CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ....................................................... 70
3.1. Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng của bạc nitrate (AgNO3) đến sự tăng trưởng và tạo
cây hoàn cỉnh của lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ
thống thủy canh in vitro ................................................................................. 70
3.2. Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng của nano bạc đến sự tăng trưởng và tạo cây hoàn
chỉnh của lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống
thủy canh in vitro ........................................................................................... 77
3.3. Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng của chitosan đến sự tăng trưởng và tạo cây hoàn
chỉnh của lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống
thủy canh in vitro ........................................................................................... 84
3.4. Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng của nano chitosan đến sự tăng trưởng của lan Kim
Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro . 91
3.5. Thí nghiệm 5: Ảnh hưởng của CuSO4 đến sự tăng trưởng và tạo cây hoàn
chỉnh của lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống
thủy canh in vitro ........................................................................................... 98
3.6. Thí nghiệm 6: Ảnh hưởng của nano đồng đến sự tăng trưởng của lan Kim
Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro 105
3.7. Thí nghiệm 7: Ảnh hưởng của nguồn chiếu sáng LED đơn sắc đến sự tăng
trưởng và tạo cây hoàn chỉnh của cây lan Kim Tuyến (Anoectochilus
setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro .................................... 112
3.8. Thí nghiệm 8: Ảnh hưởng của nguồn chiếu sáng LED hỗn hợp đến sự tăng

Sodium α-naphthaleneaceticd

AC

Alternating Current

MS

Murashige và Skoog (1962)

PLB

protocorm-like body

PE

POLYETHYLENE

SAM

(TIỀN CHẤT CỦA EHTYLENE

ACC

aminocyclopropane-1-carboxylic acid

DNA

Deoxyribonucleic Acid


thống thủy canh in vitro ........................................................................ 61
Bảng 2.3. Khảo sát ảnh hưởng của chitosan đến sự tăng trưởng và tạo cây hoàn
chỉnh của lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ
thống thủy canh in vitro ........................................................................ 63
Bảng 2.4. Khảo sát ảnh hưởng của nano chitosan đến sự tăng trưởng và tạo cây
hoàn chỉnh của lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong
hệ thống thủy canh in vitro ................................................................... 64
Bảng 2.5. Khảo sát ảnh hưởng của CuSO4 đến sự tăng trưởng và tạo cây hoàn
chỉnh của lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ
thống thủy canh in vitro ........................................................................ 65
Bảng 2.6. Khảo sát ảnh hưởng của nano đồng đến sự tăng trưởng và tạo cây hoàn
chỉnh của lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ
thống thủy canh in vitro ........................................................................ 66
Bảng 2.7. Khảo sát ảnh hưởng ánh sáng LED đơn sắc đến sự tăng trưởng và tạo
cây hoàn chỉnh của cây lan kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.)
trong hệ thống nuôi cấy thủy canh in vitro. .......................................... 67
Bảng 2.8. Khảo sát ảnh hưởng của nguồn chiếu sáng LED hỗn hợp đến sự tăng
trưởng và tạo cây hoàn chỉnh của cây lan Kim Tuyến (Anoectochilus
setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro ............................. 68
Bảng 2.9. Khảo sát ảnh hưởng của giá thể đến sự tăng trưởng và tạo cây hoàn
chỉnh của cây lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ
thống thủy canh in vitro ........................................................................ 68

xi


Bảng 2.10. Khảo sát ảnh hưởng của giá thể đến sự tăng trưởng và tạo cây hoàn
chỉnh của cây lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ
thống thủy canh in vitro khi bổ sung thêm nano chitosan .................... 69
Bảng 3.1. Ảnh hưởng của bạc nitrate (AgNO3) đến sự tăng trưởng và tạo cây

Bảng 3.10. Ảnh hưởng của giá thể đến sự tăng trưởng và tạo cây hoàn chỉnh của
cây lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống
thủy canh in vitro khi bổ sung thêm nano chitosan sau 8 tuần nuôi cấy
............................................................................................................. 134

xiii


DANH MỤC BIỂU ĐỒ
Biểu đồ 3.1. Ảnh hưởng của bạc nitrate (AgNO3) đến sự tăng trưởng của lan Kim
Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in
vitro sau 8 tuần nuôi cấy................................................................... 72
Biểu đồ 3.2. Ảnh hưởng của bạc nitrate (AgNO3) đến sự tăng trưởng của lan
Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy
canh in vitro sau 8 tuần nuôi cấy ...................................................... 73
Biểu đồ 3.3. Ảnh hưởng của nano bạc đến sự tăng trưởng của lan Kim Tuyến
(Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro
sau 8 tuần nuôi cấy ........................................................................... 79
Biểu đồ 3.4. Ảnh hưởng của nano bạc lên khả năng tăng trưởng của lan Kim
Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in
vitro sau 8 tuần nuôi cấy................................................................... 80
Biểu đồ 3.5. Ảnh hưởng của chitosan đến sự tăng trưởng của lan Kim Tuyến
(Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro
sau 8 tuần nuôi cấy ........................................................................... 86
Biểu đồ 3.6. Ảnh hưởng của chitosan đến sự tăng trưởng của lan Kim Tuyến
(Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro
sau 8 tuần nuôi cấy ........................................................................... 87
Biểu đồ 3.7. Ảnh hưởng của nano chitosan đến sự tăng trưởng của lan Kim
Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in
vitro sau 8 tuần nuôi cấy................................................................... 93

và tạo cây hoàn chỉnh của cây lan Kim Tuyến (Anoectochilus
setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro sau 8 tuần nuôi
cấy................................................................................................... 122
Biểu đồ 3.17. Ảnh hưởng của giá thể đến sự tăng trưởng và tạo cây hoàn chỉnh
của cây lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ
thống thủy canh in vitro sau 8 tuần nuôi cấy.................................. 128
Biểu đồ 3.18. Ảnh hưởng của giá thể đến sự tăng trưởng và tạo cây hoàn chỉnh
của cây lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ
thống thủy canh in vitro sau 8 tuần nuôi cấy.................................. 129
Biểu đồ 3.19. Ảnh hưởng của giá thể đến sự tăng trưởng và tạo cây hoàn chỉnh
của cây lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ
thống thủy canh in vitro khi bổ sung thêm nano chitosan sau 8 tuần
nuôi cấy .......................................................................................... 135
xv


Biểu đồ 3.20. Ảnh hưởng của giá thể đến sự tăng trưởng và tạo cây hoàn chỉnh
của cây lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ
thống thủy canh in vitro khi bổ sung thêm nano chitosan sau 8 tuần
nuôi cấy .......................................................................................... 136

xvi


DANH MỤC HÌNH ẢNH
Hình 1.1. Lan Kim Tuyến .................................................................................... 15
Hình 1.2. Cây (A) và hoa (B) lan kim Tuyến Anoectochilus setaceus Blume .... 19
Hình 1.3. Công thức phân tử của AgNO3 ............................................................ 27
Hình 1.4. Công thức cấu tạo nano chitosan (nguồn Internet) .............................. 36
Hình 1.5. Hình ảnh TEM và SEM của hạt nano đồng tổng hợp từ các phương

vitro sau 8 tuần nuôi cấy ..................................................................... 75
Hình 3.3. Ảnh hưởng của nano bạc lên khả năng tăng trưởng của lan Kim Tuyến
(Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro sau
8 tuần nuôi cấy .................................................................................... 81
Hình 3.4. Ảnh hưởng của nano bạc lên khả năng tăng trưởng của lan Kim Tuyến
(Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro sau
8 tuần nuôi cấy .................................................................................... 82
Hình 3.5. Ảnh hưởng của chitosan đến sự tăng trưởng của lan Kim Tuyến
(Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro sau
8 tuần nuôi cấy .................................................................................... 88
Hình 3.6. Ảnh hưởng của chitosan đến sự tăng trưởng của lan Kim Tuyến
(Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro sau
8 tuần nuôi cấy .................................................................................... 89
Hình 3.7. Ảnh hưởng của nano chitosan đến sự tăng trưởng của lan Kim Tuyến
(Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro sau
8 tuần nuôi cấy .................................................................................... 95
Hình 3.8. Ảnh hưởng của nano chitosan đến sự tăng trưởng của lan Kim Tuyến
(Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro sau
8 tuần nuôi cấy .................................................................................... 96
Hình 3.9. Ảnh hưởng của CuSO4 đến sự tăng trưởng của lan Kim Tuyến
(Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro sau
8 tuần nuôi cấy .................................................................................. 102
Hình 3.10. Ảnh hưởng của CuSO4 đến sự tăng trưởng của lan Kim Tuyến
(Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro sau
8 tuần nuôi cấy .................................................................................. 103
Hình 3.11. Ảnh hưởng của nano đồng đến sự tăng trưởng của lan Kim Tuyến
(Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro sau
8 tuần nuôi cấy .................................................................................. 109

xviii

nuôi cấy ............................................................................................. 138

xix


MỞ ĐẦU
1. Tính cấp thiết của đề tài
Lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) thuộc họ Phong lan
(Orchidaceae) là một trong những loại thảo dược quý hiếm của Việt Nam. Theo
khảo sát, nước ta có tới 12 loài lan Kim Tuyến trong đó loài Anoectochilus
setaceus Blume. thường gặp nhất và có giá trị thương mại rất cao, gấp hàng chục
lần so khác các loài khác (Phùng Văn Phê và cộng sự, 2010). Chúng mọc dưới
tán rừng nguyên sinh, hầu hết là nguyên thủy, rậm thường xanh nhiệt đới mưa
mùa cây lá rộng trên sườn núi đá granit, riôlit, phiến sét, ở độ cao 500 – 1600 m,
rải rác thành từng nhóm vài ba cây trên đất ẩm, rất giàu mùn và lá cây rụng.
Trong Đông y, lan Kim Tuyến là loài lan quý được biết đến với nhiều khả
năng trong việc chữa trị các bệnh lao phổi, khô phổi, ho ra máu, thần kinh suy
nhược, tăng cường sức khỏe,... Trong y học, lan Kim Tuyến được sử dụng làm
thuốc trị lao phổi, ho do phế nhiệt, phong thấp, đau nhức khớp xương, chấn
thương, viêm dạ dày mãn tính, viêm khí quản, viêm gan mãn tính, suy nhược
thần kinh; giúp tăng cường sức khoẻ, làm khí huyết lưu thông, có tính kháng
khuẩn. Bên cạnh ở một số nghiên cứu gần đây còn cho thấy rằng Lan Kim Tuyến
còn có khả năng ngăn ngừa khối ưu ác tính, dược phẩm hữu ích cho bảo vệ gan,
chống loãng xương, cải thiện trí nhớ,…
Thành phần hóa học của lan kim tuyến bao gồm các chất như quercetin,
isoharmnetin-3-O-beta-D-glucopyranosid,kaempferol-3-O-beta-D-lucopyranosid,
5-hydroxy-3'-4'-7'-trimethoxyflavonol-3-O-beta-D-rutinosid và isorhamnetin-3O-beta-D-rutinosid.
Đặc biệt, cách đây vài năm, rộ lên cơn sốt lan Kim Tuyến khi các đầu mối
Hàn Quốc, Đài Loan, Trung Quốc mua lại với giá khoảng 3,5 – 4 triệu đồng /1
kg tươi. Vì vậy, rất nhiều người dân đã lặn lội trong rừng sâu, lùng hái lá Lan

Chitosan, chất dẫn xuất khử acetyl (deacetylated) của chitin có nguồn gốc
từ vách tế bào của nấm, vỏ của các loài giáp xác, biểu bì của côn trùng và một số
loài tảo đã được ứng dụng nhiều trong nông nghiệp như là chất thân thiện với
môi trường vì nó dễ dàng phân hủy và không ảnh hưởng sức khỏe con người.
Chitosan và các dẫn xuất của nó là đáp ứng tự vệ của thực vật và được sử dụng
như là hợp chất tự nhiên để chống lại các bệnh tiền và sau thu hoạch
(Uthairatanakij et al., 2007). Thêm vào đó, nhiều báo cáo cho thấy chitosan giúp
gia tăng sự sinh trưởng của cây trồng. Mới đây, chitosan được ghi nhận là chất
kích thích sinh trưởng ở một số loài thực vật, trong đó có cây lan. Trong nhân
2


giống in vitro, chitosan đã được sử dụng và có hiệu quả cải thiện chất lượng cây
con, góp phần tạo điều kiện thuận lợi cho sự thuần dưỡng cây con ở điều kiện ex
vitro (Nge et al., 2006). Hiệu quả của chitosan lên sự sinh trưởng và phát triển
của lan Dendrobium dưới dạng phun lên cây trồng bên ngoài cũng như bổ sung
vào môi trường nuôi cấy in vitro đã được báo cáo (Chandrkrachang, 2002;
Limpanavech et al., 2003; Nge et al., 2006).
AgNO3 là chất có khả năng điều khiển quá trình sinh trưởng, phát triển của
chồi thông qua tác động vào quá trình trao đổi ethylene (Biddington 1992),
AgNO3 ức chế hoạt động của ethylene (Beyer, 1976), nên khi bổ sung chất này
vào môi trường nuôi cấy có thể ức chế việc tổng hợp ethylene hoặc chức năng
của ethylene bằng cách tác động lên quá trình tổng hợp hoặc tác động lên tính
hiệu trao đổi chất (Pua và Chi, 1993), qua đó ảnh hưởng đến sinh trưởng và phát
triển của cây trồng. Tao và Li (2006) cũng quan sát được hiêu quả khi cho bạc
nitrate lên sự sinh trưởng chồi của loài Torenia Fournieri ở nồng độ 25mg/l.
CuSO4 và Co(NO3)2 có khả năng ức chế tổng hợp ethylene (Lau và Yang,
1976), bên cạnh 2 chất này còn là nguồn kháng ảnh hưởng đến sự phát sinh hình
thái ở thực vật nuôi cấy như tạo rễ bất định. Schwambach và cộng sự (2005)
chứng minh Cu, Co, Ca và Zn trong môi trường nuôi cấy đã có ảnh hưởng đáng

cấp những cơ sở khoa học cho công tác nhân giống thủy canh in vitro cây trồng
nói chung và cây lan Kim Tuyến nói riêng. Cung cấp cơ sở khoa học cho bảo vệ
nguồn gene lan Kim Tuyến là một trong những mối quan tâm hàng đầu hiện nay.
Nghiên cứu ảnh hưởng đèn LED đến sự sinh trưởng của cây lan Kim Tuyến cung
cấp cơ sở khoa học để đánh giá ảnh hưởng của đèn LED đến nuôi cấy thủy canh
in vitro lan Kim Tuyến. Bên cạnh đó nhằm đánh giá được ảnh hưởng của muối
kim loại và nano kim loại đến sự tăng trưởng của lan Kim Tuyến.
2.2. Ý nghĩa thực tiễn của đề tài
Nghiên cứu quá trình nhân nhanh chồi, rễ cũng như sự tăng trưởng và tạo
cây hoàn chỉnh sẽ góp phần phần rất lớn trong công tác nhân nhanh lan Kim
Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.). Từ đó, có thể tạo ra số lượng lớn cây
con có chất lượng tốt, làm giảm giá thành, đáp ứng được nhu cầu lan Kim Tuyến
trên thị trường và giúp bảo tồn nguồn dược liệu quý.
3. Tình hình nghiên cứu
Hiện nay để đáp ứng được nhu cầu của thị trường và để bảo tồn nguồn cây
quý đã có nhiều các nghiên cứu về nhân nhanh cây lan Kim Tuyến nhưng đều
chủ yếu thực hiện bằng phương pháp nhân giống in vitro.
4


Nguyễn Quang Thạch và Phí Thị Cẩm Niệm (2012), đã thiết lập quy trình
nhân nhanh in vitro hoàn chỉnh loài lan Kim Tuyến Anoectochilus setaceus với
nguyên liệu là chồi và mắt đốt ngang thân. Trương Thị Bích Phượng và Phan
Ngọc Khoa (2013) cũng đã nhân lan Kim Tuyến qua nuôi cấy cụm protocorm
(2,0 × 2,0 mm) được hình thành từ hạt. Trước nhu cầu rất lớn về lan Kim Tuyến
dùng để làm thuốc, thực phẩm chức năng của các công ty dược và người dân,
một số trung tâm nuôi cấy mô đã chuyển hướng nghiên cứu nhân nhanh giống
lan Kim Tuyến in vitro.
Nguyễn Thị Hồng Gấm và cộng sự (2010) đã nghiên cứu nghiên cứu kỹ
thuật nhân nhanh chồi in vitro loài lan Kim Tuyến Anoectochilus roxburghii

sản xuất PLB của cây địa lan (Cymbidium spp.).
4. Mục đích Nghiên cứu
Xác định ảnh hưởng của muối kim loại, dung dịch nano kim loại, hệ thống
nguồn chiếu sáng LED, cũng như các loại giá thể đến sự tăng trưởng và tạo cây
hoàn chỉnh từ chồi lan Kim Tuyến nhằm thiết lập môi trường thích hợp nhất cho
sự sinh trưởng và phát triển của chồi, rễ lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus
Blume.) trong hệ thống thủy canh in vitro nhằm góp phần nhân nhanh lan Kim
Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.), giúp hạ giá thành và bảo tồn loài dược
liệu quý này của Việt Nam.
5. Nhiệm vụ nghiên cứu
-

Khảo sát ảnh hưởng của bạc nitrate (AgNO3) đến sự tăng trưởng và tạo
cây hoàn chỉnh của lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong
hệ thống thủy canh in vitro.

-

Khảo sát ảnh hưởng của đồng sulfate (CuSO4) đến sự tăng trưởng và tạo
cây hoàn chỉnh của lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong
hệ thống thủy canh in vitro.

-

Khảo sát ảnh hưởng của chitosan đến sự tăng trưởng và tạo cây hoàn
chỉnh của lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus Blume.) trong hệ thống
thủy canh in vitro.

-