B. PHẢN ỨNG TỦA CỦA PROTEIN
I.1. Cách làm:
-
Cho vào ống nghiệm 3ml lòng trắng trứng nguyên chất,
thêm vào 3ml dd (NH
4
)
2
SO
4
bảo hòa , lắc đều. Để 5 phút,
lọc qua giấy lọc đã thấm ướt bằng dd (NH
4
)
2
SO
4
bảo hòa.
Cho vào dịch lọc một ít tinh thể (NH
4
)
2
SO
4
. Lắc đều.
I. TỦA THUẬN NGHỊCH
I.2. Quan sát:
-
Khi cho dd (NH
4
)
-
C
O
O
H
Thủy phân
R – COO
-
-
N
H
3
+
-
C
O
O
-
H
+
, OH
-
Lớp áo nước
-
Khi cho các muối (NH
4
SO
4
vào tức làm cho dung dịch lọc ở
trạng thái bảo hòa, lúc này albumin có hiện tượng kết tủa.
I.4. Kết luận:
-
Phản ứng tủa bằng phương pháp muối kết chỉ thực hiện
được trong môi trường axit yếu hoặc kiềm yếu.
-
Dùng phản ứng tủa thuận nghịch này để chiết protein
dưới dạng tinh khiết, điều chế những sản phẩm men, nội
tiết tố. Vì trong quá trình, muối kết protein không mất đi
các tính chất vật lí, hóa học và sinh học đặc hiệu.
II.1.1. Cách làm: cho vào 5 ống nghiệm mỗi ống 5 giọt
dd protein trứng.
-
Ống nghiệm 1: đun sôi.
-
Ống nghiệm 2: thêm 1 giọt axit axetic 1%, đun sôi.
-
Ống nghiệm 3: thêm 5 giọt axit axetic 1%, đun sôi.
-
Ống nghiệm 4: thêm 5 giọt axit axetic 1% và 2 giọt dd
NaCl bảo hòa, đun sôi.
-
Ống nghiệm 5: thêm 2 giọt NaOH 10%, đun sôi.
II. TỦA KHÔNG THUẬN NGHỊCH
II.1. TỦA PROTEIN BẰNG PP ĐUN SÔI
II.1.2. Quan sát:
-
O
O
H
Thủy phân
R – COO
-
-
N
H
3
+
-
C
O
O
-
H
+
Axit yếu
R – COO
-
-
N
H
3
C
O
O
H
Thủy phân
R – COO
-
-
N
H
3
+
-
C
O
O
-
2H
+
Axit mạnh
R – COOH
-
N
H
3