Download miễn phí Khóa luận Quy trình phát hiện listeria monocytogenes trong thủy hải sản đông lạnh

LỜI MỞ ðẦU
Listeria monocytogenes những năm gần ñây nổi lên như một tác nhân gây bệnh
từ thực phẩm quan trọng. ðây là một loại trực khuẩn Gram dương ngắn, nhỏ,
không sinh bào tử, thường có kiểu chuyển ñộng xoay tròn quanh trục thân thành
từng ñợt rất ñặc trưng trong tiêu bản giọt treo. Chúng có thể phát triển trên môi
trường nuôi cấy ñơn giản ở vùng pH giữa 5 và 9. Trên môi trường thạch rắn,
khuẩn lạc của chúng trông như những giọt sương trong suốt, hơi nhuốm màu lam
nhạt khi nhìn qua anh sang phản chiếu dưới góc 450
.
Về mặt sinh hóa Listeria monocytogenes dễ bị nhầm với những vi sinh vật như
Lactobacillus, Brochothrix, Erysipelothrix và Kurthia. Một số thử nghiệm sinh
hóa ñã ñược áp dụng ñể phân biệt Listeria monocytogenes với các loài Listeria
khác như Listeria innocua, Listeria welshimeri và Listerisamurrayi. Xác ñịnh
kiểu huyết thanh cũng là một cách ñịnh danh quan trọng ñối với vi sinh vật này.
Listeria thuộc loại ưa lạnh, có thể phát tirển ở nhiệt ñộ thấp ñến 2,50C và cao ñến
440C. Các chuyên gia FDA khuyến cáo cần lưu ý việc làm vệ sinh ống dẫn lạnh
trên trần vì ñó là nơi có ñiều kiện thuận lợi cho Listeria phát triển và tích tụ.
Liều lượng gây bệnh của Listeria monocytogenes hiện vẫn chưa ñược biết. Bệnh
bắt ñầu từ ñường tiêu hóa với những triệu chứng như tiêu chảy, sốt nhẹ. Trường
hợp nặng, chủng gây bệnh có thể sinh sản trong các ñại thực bào và gây nhiễm
trùng máu. Vi khuẩn tác ñộng lên hệ thần kinh trung ương, tim, mắt và có thể
xâm nhập vào bào thai trong bệnh mẹ gây sẩy thai, ñẻ non hay nhiễm trùng thai
nhi.
Listeria monocytogenes ñã ñược phân lập từ nhiều loại thực phẩm khác nhau như
thịt, cá, rau, sữa và cà bề mặt nước. Cần lưu ý kiểm tra sự hiện diện của vi sinh
vật ở mọi công ñoạn trong quá trình chế biến thực phẩm, từ môi trường, nguyên
Danh mục các hình. iv
Danh mục các bảng, sơ đồ . iv
LỜI MỞ đẦU . 1
CHƯƠNG 1: MỞ đẦU . 3
1.1: đặt vấn đề . 3
1.2. Mục tiêu nghiên cứu. 4
CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN. 5
2.1: Giới thiệu vềthủy hải sản và tình hình nhiễm khuẩn của thủy hải sản ởViệt Nam
và trên thếgiới. 5
2.1.1. Giới thiệu chung vềthủy hải sản. 5
2.1.2. Tình hình nhiễm khuẩn của thủy hải sản Việt Nam . 6
2.1.3. Tình hình nhiễm khuẩn của thủy hải sản trên thếgiới . 6
2.2. Giới thiệu vềvi khuẩn Listeria monocytogenes. 8
2.2.1. Lịch sửphát hiện . 8
2.2.2 Phân loại . 10
2.2.3. đặc điểm chung của chi Listeria. 11
2.2.4. đặc điểm hình thái và kháng nguyên. 12
2.2.5. Cấu trúc . 14
2.2.5.1. Cấu trúc di truyền. 14
2.2.5.2. Cấu trúc tếbào . 15
2.2.6. Yếu tố độc lực . 18
2.2.6.1. Tổhợp gen của Listeria monocytogen . 18
2.2.6.2. độc tốlisteriolysin A (LLO) . 19
2.2.6.3. Vai trò của yếu tố độc lực. 19
2.2.7. Bệnh và triệu chứng của bệnh do vi khuẩn “Listeria monocytogenes” gây ra22
2.2.7.1. Bệnh do vi khuẩn “Listeria monocytogenes” gây ra. 22
2.2.7.2.Các triệu chứng của bệnh do vi khuẩn “Listeria monocytogenes” gây ra . 26
2.2.8. Cơchếgây bệnh . 26
2.2.9. Tình hình nhiễm listeria monocytogenes ởViệt Nam và trên thếgiới . 29
2.2.10. Nguyên tắc điều trị . 31
2.2.11. Cách phòng ngừa. 33
CHƯƠNG 3:PHƯƠNG PHÁP XÁC đỊNH VI KHUẨN L.MNOCYTOGENES. 34
3.1. Phương pháp xác định truyền thống . 34
3.1.1. Nguyên lý và phương pháp . 34
3.1.2. Phạm vi phát hiện vi khuẩn . 34
3.1.3. Dụng cụsửdụng . 3
3.1.4.Môi trường đểnuôi cấy . 34
3.1.5.Quy trình phân tích vi khuẩn Listeria Monocytogenes . 35
3.1.5.1. Quy trình kiểm nghiệm vi khuẩn Listeria monocytogenes . 35
3.1.5.2. Thuyết minh quy trình. 37
3.2. Phương pháp hiện đại. 43
3.2.1. Phương pháp ELISA . 43
3.2.1.1. Nguyên tắc . 43
3.2.1.2. Quy trình thực hiện phân tích. 44
3.2.2. Phương pháp lai phân tử . 45
3.2.2.1.Nguyên tắc . 46
3.2.2.2. Cách làm. 46
3.2.3.Phương pháp PCR . 47
3.2.3.1. Nguyên tắc . 47
3.2.3.2. Cách làm. 47
CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ . 51
4.1 Kết luận . 51
4.2. Kiến nghị . 51
Tài liệu tham khảo. 52


3f49FgvyPb1NLSa

---