TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÁI NGUYÊN
KHOA CHĂN NUÔI THÚ Y


Bài tiểu luận
Hãy trình bày những hiểu biết của em về kỹ thuật plasmit và ứng
dụng của nó trong chăn nuôi thú y?

Lớp : thú y-k44
Nhóm : 4
Năm : 2014

NỘI DUNG CHÍNH:
I. Mở đầu
II. Nội dung
1. Khái niệm plasmit
2. Kĩ thuật Plasmit
3. Ứng dụng của plasmit trong chăn nuôi thú y
III. Kết luận
IV. Tài liệu tham khảo
I. Mở đầu

Plasmid có hiều loại chứa những gen sản xuất
kháng sinh mà chúng ta có thể tận dụng và sản
xuất kháng sinh chữa bệnh cho người và động vật.

Xét về mặt chuyển giao gen trong môi trường,
Plasmid là những phương tiện hết sức linh hoạt
vận chuyển AND từ cá thể này sang cá thể khác.

Khai thác các đặc tính sinh học của plasmid, ngày

origin of replication), mang
lại cho plasmid khả năng tự
sao chép độc lập với DNA
nhiễm sắc thể

Các loại plasmid
•
dựa vào khả năng truyền sang vi
khuẩn khác của chúng:

Plasmid tiếp hợp (conjugative)
chứa các tra-genes, giúp thực hiện
một quá trình phức tạp gọi là tiếp
hợp (conjugation), chuyển một
plasmid sang vi khuẩn khác

Plasmid không tiếp hợp là những
plasmid không có khả năng tự
thực hiện tiếp hợp, vì thế chúng
chỉ có thể được chuyển sang một
vi khuẩn khác khi có sự trợ giúp
(ngẫu nhiên) của plasmid tiếp hợp.
Sơ đồ về tiếp hợp ở vi
khuẩn 1 DNA nhiễm sắc thể.
2 Plasmids. 3 Pilus.
•
Phân loại plasmid là dựa vào chức năng. Có 5 nhóm chính:

Plasmid giới tính mang các tra gene, có khả năng tiếp hợp.


Enzim cắt
Enzim cắt

Khái niệm
Các bước của kỹ thuật cấy gen
Bước 1
Bước 2
Bước 3
Là kĩ thuật
chuyển một
đoạn ADN từ
tế bào cho sang
tế bào nhận
bằng cách
dùng plasmit
(hoặc thể thực
khuẩn) làm thể
truyền
Tách ADN NST
của tế bào cho
và tách plasmid
ra khỏi tế bào vi
khuẩn.
Cắt và nối đoạn
ADN của tế bào
cho và ADN
plasmid ở
những điểm xác
định tạo nên
ADN tái tổ hợp.

•
Enzim cắt (restrictaza) và enzim nối (ligaza)

Cách tiến hành:
•
- Tách chiết thể truyền và gen cần chuyển ra khỏi tế
bào
•
- Xử lí bằng một loại enzim giới hạn (restrictaza) để
tạo ra cùng 1 loại đầu dính
•
- Dùng enzim nối để gắn chúng tạo ADN tái tổ hợp

B2: Đưa ADN tái tổ hợp vào tế bào nhận

Dùng muối CaCl2 hoặc xung điện cao áp làm dãn
màng sinh chất của tế bào để ADN tái tổ hợp dễ dàng
đi qua màng.

B3: Phân lập
dòng tế bào
chứa ADN tái
tổ hợp
•
Chọn thể
truyền có gen
đánh dấu
•
- Bằng các kỹ
thuật nhất định

- Cấy phôi đã được chuyển gen vào tử cung con vật khác để nó
mang thai sinh đẻ
•
- Tạo giống bò chuyển gen: có 2 cách

* Phương pháp vi tiêm:
•
Lấy trứng ra khỏi con vật rồi cho thụ tinh trong ống nghiệm.
•
+ Tiêm gen cần chuyển vào hợp tử (nhân non) và nuôi
hợp tử phát triển thành phôi.
•
+ Cấy phôi vào tử cung con cái khác để nó mang thai và
đẻ bình thường g con vật biến đổi gen

Phương pháp cấy nhân có gen đã cải biến:
•
Nuôi tế bào và bổ sung ADN mang gen cải biến.
•
Chọn lọc tế bào thay thế gen.
•
Dung hợp với tế bào trứng đã loại nhân.
•
Tế bào dung hợp được cấy vào bò mẹ.

Thành tựu thu được :
•
- Chuyển gen prôtêin người vào cừu tạo cừu biến đổi gen
sản sinh prôtêin người trong sữa cừu.
•


Tạo chủng vi khuẩn E.coli sản xuất insulin của người

- Insulin là hormone của tuyến tụy có chức năng điều hòa glucose
trong máu. Trường hợp insulin do cơ thể sản xuất không đủ hoặc
mất chức năng sẽ gây bệnh tiểu đường do glucose bị thải ra qua
nước tiểu.

- Gen tổng hợp insulin được tách từ cơ thể người và chuyển vào vi
khuẩn E.coli bằng plasmid. Sau đó, nuôi cấy vi khuẩn để sản xuất
insulin trên qui mô công nghiệp đáp ứng nhu cầu chữa bệnh cho
con người

Tạo chủng vi khuẩn E.coli sản xuất somatostatin

- Somatostatin là loại hormone đặc biệt được tổng hợp từ não
động vật, có chức năng điều hòa hormone sinh trưởng và insulin đi
vào máu

- Bằng công nghệ gen hiện nay đã tạo được chủng E.coli sản xuất
somatostatin

Mục tiêu tạo động vật chuyển gen:

Tạo nên giống mới có năng suất và chất lượng cao
hơn

Sinh vật biến đổi gen có thể được tạo ra dùng trong
ngành công nghiệp dược phẩm (như nhà máy sinh
học sản suất thuốc cho con người)