Bộ Giáo Dục Và Đào Tạo
Trường Đại Học Yersin Đà Lạt
Khoa: Công nghệ sinh học
NHÓM 4
VAI TRÒ CỦA SUCROSE VÀ SỰ KHÁC NHAU CỦA CYTOKININ TRONG ỐNG NGHIỆM ĐỐI VỚI SỰ PHÁT SINH HÌNH DẠNG CỦA HOA HỒNG (HYBRID TRÀ) CV.GVHD: PGS.TS. Dương Tấn Nhựt
Thạc sĩ. Nguyễn Thanh Hải
SINH LÝ CHỨC NĂNG THỰC VẬTCác thành viên của nhóm

Võ Thị Kim Hiền

Phạm Kim Ngọc Hiệp

Nguyễn Văn Hiếu

Bùi Thị Hoa

Hòang Thị Hồng Hoa


Hoa là một cơ chế phức tạp, nhạy cảm với môi trường,
có ý nghĩa trong khoa học phát triển và sinh lý học và là
một trong những nền tảng cơ bản nhất của nông nghiệp.
Khả năng nuôi cấy để tạo thành hoa trong ống nghiệm
phụ thuộc vào rất nhiều yếu tố, nội bộ và bên ngoài, hóa
học và vật lý, và hầu như tất cả đều tương tác bằng
nhiều cách phức tạp và không thể đoán trước

Hoa hồng đáng yêu với màu sắc khác nhau, hình dáng
đẹp và mùi hấp dẫn đã được yêu thích nhất hoa trang trí
cho một thời gian dài. Ngày nay, chúng được trồng trên
toàn thế giới như hoa cắt, trồng cây trong chậu và trang
trí cho khu vườn.
Trong sự phát sinh hình dạng của hoa hồng thì sucrose và cytokinin đóng vai trò quan trọng.
Trong sự phát sinh hình dạng của hoa hồng thì sucrose và cytokinin đóng vai trò quan trọng.
cytokinin có tác dụng kích thích về hoa cảm ứng,
cytokinin có tác dụng kích thích về hoa cảm ứng,
ngược lại nó
ngược lại nó
ức chế có hoa, nhưng
ức chế có hoa, nhưng
kích thích tăng trưởng sinh dưỡng.
kích thích tăng trưởng sinh dưỡng.Về cơ bản, sucrose được biết đến là nguồn cacbon của sự lựa chọn cho nền văn hóa trong các nghiên cứu in vitro hoa

hồng ở Đà Lạt .
Vật liệu nuôi cấy: Chủ yếu là những khối mô và cơ
quan tách rời: mô phân sinh, đỉnh sinh trưởng,

Các bước tiến hành:
+ Lựa chọn vật liệu
+ Khử trùng vật liệu nuôi cấy
+ Cấy vào môi trường mẫu
+ Nhân nhanh chồi
+ Chuyển sang môi trường tạo rễ,tạo cây hoàn chỉnh.
Bước 1: Lựa chọn vật liệu
Chọn những cành cây khỏe mạnh gồm 8-9 chồi xanh không hoạt động.

Bước 2: Khử trùng vật liệu nuôi cấy
Tất cả tiết điểm đã được tẩy rửa trong buồng vô trùng và đặt dưới nước sinh hoạt trong vòng 40 phút, sau đó khử trùng bằng HgCl2 0,1% trong 10 phút, rồi xả lại bốn lần với nước cất. Cuối
cùng, bắn một ít mô ngoại vi vào chồi không hoạt động ( đường kính khoảng 0.5cm) đã được vô trùng ngăn cách với tiết điểm phần và đặt trên các môi trường nuôi cấy ban đầu. Bước 3: Cấy vào môi trường mẫu
MS được sử dụng như là môi trường nuôi
cấy cơ bản. Tất cả môi trường nuôi cấy đã được
điều chỉnh để pH 5,8 với KOH 1N hoặc HCl 1N
trước khi khử trùng tại 121
o
C, 1 atm trong vòng
40 phút. Phytohormones đã được thêm vào
trước khi khử trùng.

là MT dinh dưỡng thích
hợp bổ sung chất KT auxin,
IBA.
- Chuyển cây sang MT thích
ứng gần giống với MT tự
nhiên về: nhiệt độ, độ ẩm,
ánh sáng 3. Vai trò sucrose và cytokinin
trong thí nghiệm in vitro:
•
a. Sucrose: (đường)
- Vai trò quan trọng của sucrose đã được quan sát thấy trong sự thích ứng ở nhiều loài. Đường đã được xem là nguồn cacbon cần thiết trong môi trường nuôi cấy và sự phát triển của
hoa (Scorza, 1982). Jumin và Nito (1996) quy định rằng việc bổ sung các sucrose 3-7% vào môi trường là cần thiết cho sự thích ứng của hoa Fortunella hindsii.
- Sự hình thành của hoa Pisum sativum L. chỉ được quan sát thấy khi sucrose tập trung được ở 30-60 g ml-1 (Franklin et al., 2000).Vai trò của sucrose trên sự phát sinh hình
dạng của hoa
Ảnh hưởng của sucrose trên các cành
mang nụ hoa được ghi nhận sau 3 tháng
nuôi

Vai trò của sucrose trong sự phát sinh hình dạng
của hoa sau 2 tháng nuôi.


hạn sucrose ảnh hưởng lên sự thích ứng của hoa.
- Hơn nữa, quan sát thấy nụ hoa bị héo khi chúng đạt
được đường kính từ 1-2 mm. Điều này cho thấy rằng
sucrose là một yếu tố cần thiết trong sự thích ứng của
nụ hoa hoặc phát triển ban đầu, khác yếu tố (s) là bắt
buộc để giúp chúng phát triển đầy đủ trong giai đoạn
sinh trưởng và phát triển của hoa trong ống nghiệm.b. Cytokinin
( chất điều hoà phân chia tế bào thực vật)

Cytokinin được định nghĩa là những chất hoá học có hoạt tính giống với
trans-zeatin

- Kích thích phân chia
tế bào mô sẹo
- Kích thích hình
thành rễ/chồi trong
mô sẹo
- Làm chậm quá trình
già hóa của lá
- Kích thích phát
triển của lá mầm Về cấu trúc, đa số cytokinin có dạng
purine được thay thế N tại vị trí C6
Zeatin




Vai trò của cytokinin trong sự phát sinh hình
dạng hoa, đặc biệt là sự phát sinh hình dạng của
nụ hoa, được quy định trong các báo cáo. Bernier
et al. (1993) đã tìm thấy cytokinin là thành phần
kích thích hoa vận chuyển trong mạch libe tới
đỉnh để đáp lại sự thích ứng của hoa . Cytokinin
được yêu cầu phải duy trì các chu trình phân chia
tế bào, nhưng cũng có thể tham gia trong việc thúc
đẩy sự chuyển đổi từ không biệt hoá tế bào gốc
đến biệt hóa tế bào (Werner et al., 2001).