1
KYÕ THUAÄT DI TRUYEÀN
2
QUA
Ù
T
RÌNH NGHIÊN C
Ư
ÙU GENE
CÔ LẬP
GENE
Tách chiêt
DNA, RNA
Phân tích
đònh tính,
đònh lượng
Tạo
dòng
PCR,
RT-PCR
THU NHẬN
GENE
Giải
trình tự
Các phương
pháp
in silico
XÁC ĐỊNH CẤU
TRÚC GENE
TÌM HIỂU CHỨC
NĂNG CỦA GENE

8. Biến đổi vật liệu di truyền và chuyển vật liệu di truyền đã
biến đổi vào tế bào
4
THU HỒI NUCLEIC ACID
1. PHƯƠNG PHÁP TÁCH CHIẾT
- Tách chiết DNA
- Tách chiết RNA
2. PHƯƠNG PHÁP LY TÂM
- Ly tâm phân đoạn
- Ly tâm đẳng tỷ trọng – Thu nhận nucleic acid tinh sạch
3. PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
Thu mRNA
5
TÁCH CHIẾT DNA & RNA
DNA RNA
Thiocyanate
1. Phá màng tế bào, màng nhân Chất tẩy (SDS) guanidinium
+ siêu âm, LiCl, Urea,
+ cơ học,
2. Loại protein Phenol pH8 : Phenol pH4 :
Chloroform:IAA Chloroform:IAA
Khác Khác
3. Thu hồi nucleic acid :
Tủa Ethanol tuyệt đối Ethanol tuyệt đối
Isopropanol, Isopropanol,
Boom Hấp phụ trên silica Hấp phụ trên silica
Lọc Thu trên màng lọc Thu trên màng lọc
6
PHA
Ù

nhóm phần tử.
Dung dòch ly tâm có tỷ
trọng thấp hơn các
phần tử cần phân tách
8
LY TÂM ĐẲNG TỶ TRỌNG
Ly tâm đẳng tỷ trọng
(isopycnic) phân tách
các phần tử trong hỗn
hợp dựa trên tỷ trọng
của chúng.
Thời gian và lực ly tâm
là chung cho các nhóm
phần tử.
Dung dòch ly tâm có tỷ
trọng với giá trò đi từ
thấp hơn đến cao hơn
tỷ trọng của các phần
tử cần phân tách
9
T
HU HOI NUCLEIC ACID, PHAGE SAU LY TAM
ẹANG TY TROẽNG
10
CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
Sắc ký
lọc gel
Sắc ký
trao
đổi ion