Thí nghiệm vi sinh vật học ThS.Lê Xuân Phương
77
BÀI 8 : PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG TẠO SẢN
PHẨM BẬC HAI Ở VI SINH VẬT

I. Xác định khả năng sinh kháng sinh của vi sinh vật
1.1. Phân lập giống vi sinh vật
- Cân 1g đất
- Nghiền đất trong cối sứ
- Hoà đất với 10ml nước vô khuẩn
- Cho vào bình tam giác dung tích 200ml với 90ml nước vô khuẩn
- Tiến hành pha loãng cho tới khi tách được từng tế bào riêng biệt.
- Tách tế bào trên môi trường thạch đĩa bằng phương pháp cấy gạt - Ủ
thạch đĩa ở 37
0
C trong 1-2 ngày
- Khi khuẩn lạc nhỏ hình thành, phân lập và nuôi trên môi trường thạch
nghiêng.
- Dùng các giống đã phân lập, nuôi chúng trong môi trường lỏng ở máy lắc,
nhiệt độ phòng.
- Xác định hoạt tính chất kháng sinh
- Xác định hoạt tính chất kháng sinh được tạo ra trong dung dịch lên men
như trình bày dưới đây.
1.2. Xác định hoạt tính chất kháng sinh
a/ Phương pháp kiểm tra sơ bộ (phương pháp Kolmen và Boerner)
- Trên môi trường thạch đĩa , cấy vi sinh vật kiểm tra theo một đường
thẳng.
-
Ủ trong điều kiện nhiệt độ bình thường
- Sau đó cấy vi khuẩn có khả năng bị ức chế bởi kháng sinh nghiên cứu
- Đem ủ ở nhiệt độ tương tự như trên

vật kiểm định sao cho những miếng giấy này có một khoảng cách đều nhau.
- Đặt đĩa petri có những miếng giấy trên vào tủ ấm 37
0
C trong thời gian 16-
18 giờ.
- Lấy ra đo vòng vô khuẩn.