- 28 - Bảng 4.1 Kết quả đo chiều cây cao cà chua sau 5 ngày trồng
Hàng
Chiều cao (cm) cây qua các lần lập lại (LLL)

LLL1
LLL2
LLL3
LLL4
LLL5
LLL6
LLL7
LLL8
TB
H1
3,5
3
3,5
3,2
3,2
3
3
3,5
3,24
H2
2,5
3
3
3,5

3,2
3,5
3
3,2
3,11
H6
3,5
3,5
3
2,5
3,2
3
3,5
3,2
3,17
H7
3
3
2,5
3,5
3,2
3,2
3
3,5
3,11
H8
2,5
3
3
3,5

LLL1
LLL2
LLL3
LLL4
LLL5
LLL6
LLL7
LLL8
TB
H1
5,5
5
5,5
5,5
5
5
5
5,5
5,25
H2
5
5
5
5,5
4,5
4,5
5
5
4,94
H3

5,5
5,5
5,5
5,5
5
5,5
5
5
5,39
H7
5
5
4,5
5
5
5
5
5
4,94
H8
4,5
5,5
4,5
5
4
5,5
5
4,5
4,81
H9

LLL5
LLL6
LLL7
LLL8
TB
H1
9
8
9,5
10
8
9
9
9,5
9
H2
9
8,5
9,5
8,5
8,5
8,5
9
9
8,82
H3
8
9,5
10
10

9
9
9
8,5
8,125
H7
8,5
8
7,5
8
8
9
8,5
8,5
8,25
H8
8
9
8,5
9
8,5
9
8
8
8,5
H9
7,5
8,5
8,5
8

16
16
18
18,5
15
15
17
17
17,56
H2
17
17
18
17
18
16
16,5
18
17,06
H3
16
19
19
18,5
15,5
19
16
18
17,62
H4

16,5
18
17
18
17
19
18
17
17,56
H8
17
18
18
17,5
18
17
18
17,5
17,62
H9
15
16
18
17,5
15,5
16
18
16,5
17,81
H10

24
25
26
26
25,81
H2
27
27
27
26,5
27
25
26
27,5
26,37
H3
26,5
28
27,5
28
24
29
25
27
26,78
H4
26,5
26
25
27

26
28
27,5
26
26,65
H8
26,5
27
27
26
27
26
27
26
26,31
H9
25
26
27
26,5
24
26
27
25
25,81
H10
27
26
27,5
27

39,5
39
40
39
39,5
36
36
40
38,62
H3
38
40
39
40
35
42
36,5
39
38,68
H4
39
39
37
40
35
42
39,5
41
39,06
H5

39
40
40
39
40
39,5
40
39
39,56
H9
35
37
39
38
35
37
39
36
36,75
H10
39
38,5
40
40
42
39
39
41
39,81
- 31 -

Theo phương pháp phân lập và tồn trữ mẫu được trình bày ở mục 3.4.2.1 và
3.4.2.2, chúng tôi đã tiến hành phân lập và chọn lọc được 4 dòng trên cây cà chua
ở đòa bàn huyện Củ Chi thành phố Hồ Chí Minh. Mẫu sau khi phân lập được trữ
trong môi trường LB lỏng có bổ sung glycerol 70% theo tỉ lệ thể tích là 850 l dòch
nuôi cấy: 150 l glycerol và trữ ở -80
o
C.
4.3 Kết quả chọn lọc trên môi trường TZC
phương pháp xác đònh vi khuẩn R. solanacearum dựa vào các phản ứng sinh hoá
thường đơn giản, ít tốn kém. Môi trường thường được sử dụng để phân tích là môi
trường TTC và môi trường TZC (Shurfleff, 1997). Trong thí nghiệm này sử dụng
môi trường TZC, kết quả ghi nhận trong bảng 4.7.
Bảng 4.7 Kết quả chọn lọc vi khuẩn trên môi trường TZC
Tên vi khuẩn
Kết quả chọn lọc
RST001
RST003
RST006
RSBog1
RSCc1
RSCc2
RSCc3
+
+
+
-
-
+
-

Khuẩn lạc
không độc
Khuẩn lạc
độc
a
b
- 34 - Bảng 4.8 Kết quả xác đònh R. solonacearum bằng phương pháp PCR.
Dòng vi khuẩn
Kết quả chạy PCR
RST001
RST003
RST006
RSBog1
CCCC2
+
+
+
-
+

Ghi chú: (+) phản ứng PCR dương tính
(-) phản ứng PCR âm tính
Kết quả phản ứng PCR với cặp primers PI-IS-F/PI-IS-R của các dòng RST001,
RST003, RST006, RSBog1, CCCC2


Sau khi chủng bệnh và tiến hành theo dõi biểu hiện triệu chứng bệnh, chúng tôi
ghi nhân chưa có triệu chứng héo xanh xuất hiện sau khi chủng 14 ngày.
Theo Toyoda và ctv (2001) các dòng cà chua thương mại khi trồng trong hệ
thống thủy canh thường xuất hiện héo xanh trong khoảng 5 -9 ngày sau khi chũng
vi khuẩn Ralstonia solanacearum.
Theo Phạm Đăng Minh (2003) thì 57 dòng vi khuẩn R .solonacearum. gây chết
héo xanh trên cây ký chủ cà chua điều cho phản ứng dương tính khi chạy PCR với
cặp primers PI-IS-F/PI-IS-R.
Như vậy triệu chứng héo xanh chưa xuất hiện sau 14 ngày chủng trong thí
nghiệm của chúng tôi, có thể là do chưa tìm được mật số chủng ban đầu thích hợp,
hoặc các dòng vi khuẩn đem chủng có tính độc thấp.
3.6 Xác đònh mật số vi khuẩn R. solanacearum trong hệ thống thuỷ canh
Qua thí nghiệm đánh giá tính kháng, để biết được các dòng vi khuẩn được chủng
có khả năng sinh trưởng và phát triển trong hệ thống thủy canh hay không, chúng
tôi đã tiến hành đếm mật số vi khuẩn R. solanacearum sau khi chủng và kết quả
thu được như sau.
Bảng 3.12 mật số vi khuẩn có trong 1ml dung dòch dinh dưỡng
Dòng vi khuẩn
Khi chủng
(cfu/ml)
2NST
3NST
4NST
RST001
RSCc2
RSBog1
Đối chứng
2,75x10
8
2,25x10

0,55x10
16

0,00

- 36 - Như vậy tất cả các dòng vi khuẩn đem chủng bệnh đều có khả năng sinh trưởng
và phát triển trong dung dòch dinh dưỡng thuỷ canh. vì vậy có thể sử dụng hệ thống
và dung dòch này để đánh giá tính kháng bệnh héo xanh của cây cà chua.