Khảo sát thành phần hóa học cây giảo cổ lam Gynostemma pentaphyllum

HVCH: Đào Thị Ngọc Minh -44- CBHD: TS. Trần Lê Quan
4. THỰC NGHIỆM
4.1 Điều kiện thực nghiệm
Việc nghiên cứu thành phần hóa học của cây giảo cổ lam được thực hiện với
các điều kiện sau:
Nguyên liệu: Mẫu cây giảo cổ lam khô thu hái ở vùng núi Phanxipang
(thuộc dãy núi Hoàng Liên Sơn) vào tháng 9 năm 2006 do công ty TNHH Tuệ Linh
(Cầu Giấy, Hà Nội) cung cấp. Mẫu cây khô được xay thành bột mịn.
Sắc ký cột:
- Silica gel pha thường (Merck, Kielselgel 60).
- Silica gel pha đảo (RP C-18 silica gel, Merck).
Sắc ký lớp mỏng:
- Silica gel pha thường (Merck, Kielselgel 60 F
254
, 250 µm).
- Silica gel pha đảo RP
18
(Merck, RP C-18 F
254
).
Thuốc thử:
- Dung dịch acid sulfuric đậm đặc
Máy ghi phổ cộng hưởng từ hạt nhân:
- Máy Bruker Avance 500 [500 MHz (
1
H) và 125 MHz (
13

chiết. Quá trình trích ly các loại cao được trình bày trong Sơ đồ 1
Khảo sát thành phần hóa học cây giảo cổ lam Gynostemma pentaphyllum

HVCH: Đào Thị Ngọc Minh -46- CBHD: TS. Trần Lê Quan
4.3 Quá trình cô lập
Trong luận văn này, chúng tôi tiến hành khảo sát thành phần hóa học của cao
butanol được trích từ phần trên mặt đất của cây giảo cổ lam.
Sắc ký cột hấp phụ cao butanol (95g) trên silica gel pha thường với hệ dung
ly cloroform:metanol (9:1) rồi hệ dung ly cloroform:metanol:nước có độ phân cực
tăng dần (9:1:0.1 → 8:2:0.2 → 20:6:1 → 14:6:1 → 10:5:1 → 6:4:1 → 100%
metanol). Dựa trên sắc ký lớp mỏng hiện hình bằng dung dịch acid sulfuric

đặc
nóng, chúng tôi thu được chín phân đoạn (B1 → B9). Sau đó tiếp tục khảo sát các
phân đoạn B2, B4, B6, B8. Quá trình xử lý cao n-butanol được trình bày trong Sơ
đồ 2.
Khảo sát thành phần hóa học cây giảo cổ lam Gynostemma pentaphyllum

HVCH: Đào Thị Ngọc Minh -47- CBHD: TS. Trần Lê Quan
4.3.1 Khảo sát phân đoạn B2
Sắc ký cột hấp phụ trên silica gel phân đoạn B2 (2.1g) với hệ dung ly
Khảo sát thành phần hóa học cây giảo cổ lam Gynostemma pentaphyllum

HVCH: Đào Thị Ngọc Minh -48- CBHD: TS. Trần Lê Quan
4.3.2 Khảo sát phân đoạn B4
Sắc ký cột hấp phụ trên silica gel phân đoạn B4 (3g) với hệ dung ly
cloroform:metanol:nước có độ phân cực tăng dần (cloroform:metanol:nước 9:1:0 →
20:6:1 → 14:6:1 → 6:4:1 → 100% metanol), dựa trên sắc ký lớp mỏng hiện màu
bằng dung dịch acid sulfuric

đặc nóng thu được bốn phân đoạn (B4.1→B4.4). Sắc
ký cột hấp phụ trên silica gel pha đảo phân đoạn B4.3 (1.2 g) nhiều lần với hệ dung
ly cloroform:metanol:nước, thu được kết tủa kết tủa vô định hình, màu vàng, ký
hiệu là BM1 (50 mg). Quá trình cô lập hợp chất BM1 được trình bày trong Sơ đồ 4