Bộ giáo dục và đào tạo
Trường Đại Học Mở Tp.HCM
Khoa công nghệ sinh học


Bacillus subtilis 
!Escherichia coli
ĐT VN ĐÊ
Enzyme Lipase được ứng dụng rộng rãi
trong tất cả các ngành công nghiệp: chế
biến thực phẩm, dược phẩm, hóa dầu
Enzyme Lipase được tìm thấy ở một số
loài thực vật, động vật, đặc biệt hiện diện ở
nhiều loài vi sinh vật (Candida Sp,
Aspergillus oryzae, Bacillus subtilis…).
Giới thiệu về enzyme Lipase
•
Lipase: có trọng lượng phân tử từ 19-20 kDa,
hoạt động thủy phân liên kết ester carboxyl của
acylglycerols để giải phóng các axit béo và
glycerol.
•
Phản ứng thủy phân triacylglycerol

•
Sự hoạt động của lipase phụ thuộc vào pH
•
Lipase không cần cofactor nhưng các cation
hóa trị 2 như Ca
2+
thì kích thích lipase hoạt

nhưng lipase từ vi khuẩn thì có ý nghĩa thương
mại hơn vì giảm chi phí sản xuất, ổn định cao,
sẵn có hơn lipase thực vật và động vật.
Aspergillus oryzae : Tổng hợp acid béo.
Aspergillus sp: Tổng hợp hương vị.
Bacillus subtilis: Sản xuất bánh mì.
Candida rugosa: Tổng hợp hương vị.

Kĩ thuật tạo dòng:

Phương pháp xác định hoạt tính

 !" #$
$"
%&
'()*+,
/01/234
-5
6
7897:
;
%<<
6
=>7?@)
A7BCD=EF75G" ;)
1HI1)
;
JBKBL
6
BM+7"M:

4 + + - + - +
5 + + + + - +
6 - + + + - +
7 + + + + - +
8 - +* + + - +
9 - - - - + +
10 + - - + + +
11 - + + + + +
12 - + + + + +
13 - + + + - +
14 + + + + - +
15 + + + + - +

:; $().
("< .=>)0
 8/9:0?@/A/BC
D2EFGHF0
C/5I/JHK//LF
-20/2

M":;C4/C/
B:NOO*>OO0

:;/B"+
//L.A./5/ P2
/5//Q+.RS,T.
$5/5R>2
Hình. 2. Trình tự Nucleotide của GHlip lipase (số nhập liệu FJ481899).
+!&
,-& .

*,(a+/5/L-(a

e.
fgaR)*Rh/ //Q+
f1gaR)*(a*Rh[0.12
c8.i25
*(ae.-E>=
gij"*Rh*iD[/ //Q+
-E>=gij"*(*Rh.0.
F-2i0/2
8/9:
0[R:J
R/9:/+[//4
C)_=Mk/0.//Q+12
c8l-(aCFA-20/
%-")N2


i7/W//4/5/
0.//Q+12c8l-(a. 
\/A+C0:F
+//5/0.F//Q
+2
/X


;
F;12mTc.
-(")*iD2
* 8/56/750)Ni/L

Mồi ngược LG2 5'-cgcggatccattaattcgtattctggcc-3'.
Bài báo 2 -Cặp mồi thu nhận gen lipA từ B.subtilis 168
FWBSLA 5'-TCT A,. ,,.,,.TAT TAT GAA ATT TG
BKBSLA 5'-GCA TGC CA .A TTC GTA TTC TGG CC
Bài báo 3 - Cặp mồi thu nhận gen lipase từ B.pumilis
BPUM1F-GAGTCGTATAAGATGAATAAGGGGG
AATG
BPUM1R- TTAATTCGTATTTTGTCCTCCGCCGTTC
- Cặp mồi thu nhận gen lipase từ dầu oliu
Mồi xuôi OPL1F-GAATTTTTTTAGGAGGACACTAT
GAGTG
Mồi ngược OPL1RCCCTGCAGCTTATTTACCCCCA
TTATAAGTGGTTTGATTTTAGGCC
8rR(ns
t
U

0)33
t
F;3J/L
K//\A-.#?A4
&C-20/[0u/3
t
//J
[/+!/]/
5///Q+/5/0.122

0"-v/J//3
t
a./

-20/I7d= )
Z
aSbO_%&BM>7B$
, b87
Z
7?K !" #$I !" 

Z
$= )
Z
/$=
Z
%Q@= )
IM7 b87=>M)
$N) 