TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY NGUYÊN
KHOA KHTN & CN
BÀI TIỂU LUẬN
MÔN: HÓA SINH ỨNG DỤNG
NHÓM 1
1. Nguyễn Đình Thư
2. Nguyễn Thị Dung
3. Nguyễn Thị Trinh
4. Nguyễn Thị Hạnh
5. Nguyễn Thị Thùy Trinh
6. Nguyễn Thị Thanh Huyền
7. Nguyễn Khả Thị Giang
8. Lê Thị Huyền Trang
9. Trương Thị Hồng Oanh
10. Đỗ Thúy Kiều
SINH TỔNG HỢP KHÁNG SINH STREPTOMYCIN
1. Khái quát
1. Khái quát
2. Lên men sản xuất
2. Lên men sản xuất
3. Tách chiết và tinh sạch
3. Tách chiết và tinh sạch
4. Ứng dụng
4. Ứng dụng
STREPTOMYCIN
1. Khái quát

Kháng sinh là các chất có khả năng ức chế hoặc tiêu diệt vi sinh vật.

Streptomycin là một kháng sinh dùng phổ biến trong y học, thú y và
bảo vệ thực vật.

Aminoglycosides
NDP-N-methyl-L-glucosamine
D - glucose
Sơ đồ sinh tổng hợp streptomycin
1.2. Xác định hoạt tính kháng sinh của streptomycin
Theo phương pháp của Loo, Y.H. et al., (1945) và Waksman S.A (1945) bằng phương pháp khuyếch tán trên
thạch.

Môi trường khoáng: pH = 7,3

Trước khi xác định bổ sung thạch 1,5%, glucose 0,5% đã thanh trùng bằng phương pháp lọc và 1ml dung
dịch muối vào môi trường thạch nóng chảy sau khi làm lạnh xuống 55
o
C. Sau đó lắc đều và đổ 30ml môi
trường vào đĩa peptri vô trùng(φ= 100mm) và để đông lại. Độ dày của môi trường thạch 2,0± 0.2mm.

Vi sinh vật kiểm định được sử dụng là E.coli. Giống ban đầu được bảo quản trong môi trường thạch
nghiêng ở 4
o
C.
Thành ph nầ KH
2
PO
4
K
2
HPO
4
NaCl (NH
4

( g) 3 5 10 5
Thành
ph nầ
Dextrose Cao th t- peptonị NaCl Kali phosphat Amon
sunphat
MgSO
4
.7H
2
O CaCO
3
(g) 10 1 5 1 2,5 0,25 3,5
Nhân giống
Nhân giống
•
Cấy bào tử vào môi trường nhân giống trong bình tam giác, lắc 180 – 220 vòng 26 –
28
o
C/30-70 giờ.
•
Cho vào nồi nhân giống (có sục khí và khuấy) 20 – 40 giờ
•
Cấy bào tử vào môi trường nhân giống trong bình tam giác, lắc 180 – 220 vòng 26 –
28
o
C/30-70 giờ.
•
Cho vào nồi nhân giống (có sục khí và khuấy) 20 – 40 giờ
Lên men
2 pha

và phân nhánh rất yếu, tế bào chất kiềm
Pha 2
•
Khuẩn ty không phát triển
•
Cuối ngày thứ ba sợi xạ khuẩn bị chia nhỏ và bắt dầu
tự phân
Pha 2
•
Khuẩn ty không phát triển
•
Cuối ngày thứ ba sợi xạ khuẩn bị chia nhỏ và bắt dầu
tự phân
2.3. Quá trình lên men sản xuất
Phương pháp lên men: nuôi cấy chìm gồm 2 pha
3. Tách chiết và tinh sạch
3.1. Tách chiết bằng dung môi
 Điều chế streptomycin sunphat
100l dịch lên men + 250g than hoạt tính, khuấy trộn 30 phút
Sản phẩm là bột màu trắng có 600đv/ml, hiệu suất thu hồi 60%, độ sạch đạt 400đv/mg
Lọc ép khung bản với 2000g bột trợ lọc diatomit, rửa bằng 10l nước
Hỗn hợp dịch lọc với dịch rủa được trung hòa đến pH=7 bằng NaOH và khuấy với 1000g than hoạt tính trong 30 phút
Than hoạt tính chứa streptomycin lọc ép với bột trợ diatomit và rửa sạch 2 lần với 10l nước
Tách Streptomycin ra khỏi than hoạt tính bằng 3,5l aceton (5-10%) đã acid hóa đến pH=2,5 bằng H
2
SO
4
Dịch streptomycin được khuấy với 3 lần thể tích (28,5l) aceton để rửa streptomycin sunphat
Ướp lạnh ở 4
o

được loại bỏ bằng cách ly tâm và rửa sạch.

Dịch lọc nhận được được làm lạnh đông và sấy khô. Streptomycin hydrochlorid thu được là 905mg bột
màu trắng với hoạt tính là 590đv/mg, hiệu suất đạt 84% từ streptomycin sunphat.
Dịch lên men
Dịch lên men
Thu hoạch
Thu hoạch
Lọc
Lọc
Pha loãng
Pha loãng
Qua cột
nhụa
Qua cột
nhụa
Loại bỏ tạp
chất
Loại bỏ tạp
chất
Streptomycin
sunphat tinh khiết
Streptomycin
sunphat tinh khiết
Cô đặc chân
không
Cô đặc chân
không
Sấy khô
Sấy khô