B GIÁO DO
I HC NHA TRANG

========  LAN

NGHIÊN CU TU KIN
CHIT POLYPHENOL T LÁ TRU
(PIPER BETLE LINN ) B
PHÁP B MNG  ÁN TT NGHII HC
 

B GIÁO DO
I HC NHA TRANG

========

u kin tt nh án.
c bit, em xin chân thành gi li bic ti Thy Nguyn Anh
Tun và Thy Nguyn Xuân Duy  em, cho em nhiu kin thc,
kinh nghim và quan trng li khuyên, l
phn rt l giúp em có th hoàn thi án tt nghip này.
Sau cùng, em xin c và gn bó vi em trong sut
thi gian hc tp, thc hi án tt nghip này.

Khánh Hòa, ngày 20 tháng 6 
Sinh viên thc hin  Lan
ii
MC LC
LI C i
MC LC ii
DANH MC CÁC CH VIT TT v
DANH MC BNG BIU vi
DANH M TH vii
LI M U 1
NG QUAN 4
1.1. Gii thiu v cây Tru Không 4
m và phân b sinh thái ca cây Tru Không 4

 25
 25
 26
 27
 27
ng b mng 27
1.7.1. Nguyên tc 28
1.7.2. Công dng ca RSM 29
m ca RSM 29
T LIU 30
2.1. Nguyên liu 30
2.2. Hóa cht 30
2.3. Thit k thí nghim t mng 30
2.4. Chun b dch chit 33
 33
nh hàm m 33
nh hiu sut chit 34
ng polyphenol tng 34
iv
ng flavonoid tng 35
nh hot tính kh gc t do DPPH 35
nh tc kh 35
 lý s liu 36
T QU NGHIÊN CU VÀ THO LUN 37
3.1. Kt qu tu kin chit polyphenol t lá Tru 37
3.2. ng ca các yu t chin hàm mc tiêu 38
3.3. ng ca thi gian và nhi ng polyphenol 41
3.4. ng ca thi gian và t l dung môi/nguyên ling
polyphenol 42
3.5. ng ca thi gian và n ng polyphenol 43

vi
DANH MC BNG BIU
Bng 1.1. Thành phn hóa hc ca lá Tru Không 6
Bng 2.1. Ma trn b trí thí nghim mã hóa các bic lp 31
Bng 2.2. Ma trn b trí các thí nghi 32
Bng 3.1. Kt qu b trí thí nghi theo qui hoch trc tâm quay 37
Bng 3.2. Bng phân tích ANOVA nh ng ca các bic lp (X
1,
X
2
, X
3

và X
4

Hình 3.4. ng ca nhi và thi gian ching polyphenol 41
Hình 3.5.  ng ca thi gian và t l dung môi/nguyên li n hàm
ng polyphenol 42
Hình 3.6. ng ca thi gian và n ng polyphenol. 43
Hình 3.7.  ng ca nhi  và t l dung môi/nguyên li n hàm
ng polyphenol 44
Hình 3.8. ng ca nhi và n ethanol ng polyphenol 45
Hình 3.9. ng ca t l dung môi/nguyên liu và n n
ng polyphenol 46 1

LI M U
c ta nm trong khu vc nhii gió mùa vi thm thc vt phong phú
n c liu, các loi rau c qun ca thc vt cha rt
nhiu các hp cht t nhiên có hot tính sinh hc cao. Các hp cht này giúp nâng
cao sc khi, làm gic các bnh nguy him, các hp cht
có ngun gc t t caratenoid, 
Hii làm ving áp lng hay b stress. Mà
nguyên nhân sâu xa ca các bnh nguy him là s stress oxi hóa. Stress oxi hóa là
s mt cân bng trong vic to các gc t do và s hong ca các cht chng
oxi hóa. Gc t a có tác dng không t vì nó rt d dàng phn
ng vi phân t sinh hc ca t A, lipid, protein và gây ra hàng

M tài:
T ng polyphenol t lá Tru Không.
Ni dung nghiên cu:
1.               
TPC, TFC);
2. Tt polyphenol;
  nh  ng ca các yu t và các cp yu t   ng
polyphenol trong quá trình chit t lá Tru Không.
Ý c c tài:
u kin chit polyphenol t lá Tru Không, kt qu thu
c c tài cho
, 
ng.

3

c tin c tài:
T kt qu nghiên cu c tài, s   ng polyphenol cao
nht, t  ng dc chit t lá Tru Không vào trong ngành
công ngh thc phm, y hc, thc phm ch phng thi, giúp t
 

Tru Không là loi dây leo bám, thân là dây leo bám to
thành tt ni vi nhau, cành hình tr, nhn, có khía dc, bén r  nhng mu
ni. Lá có hình trái tim, mc so le, cung có b, dài 1,5  3,5 cm, phin lá hình trái
xoan, dài 10-13 cm, phía cung hình tim, u lá nhn dài, mt trên lá sm bóng, mt
5

i lá có gân ni rt rõ, cung lá có b kéo dài ga lá.
Hoa mc thành c k lá trên thành cm có
c dài có cung có lông, hoa cái dài khong 5 cm, cung
ph lông dày, bu có lông  nh.
Qu mng và tròn. Toàn thân có tinh dng, khi nm có v nóng
và cay.
Phân b sinh thái
Cây Tru Không có ngun gc  mi c trng
t c,  Trung Quc, Tru
Kc ghi chép t i nhà Tn 618-u th k XV,
cây Tru Không b       Ngày nay, Tru K c
trng ph bin  c nhii Châu Á, vic trng cây Tru Không gn lin
vi tp tu và làm thuc cha bnh trong dân gian. Riêng  Vit Nam, cây
Tru K   vào truyn thuyt dân tc. Tru K c nh n trong
truyn c tích Tru - Cau, t th
Tru Không thuc lo   m và m, thích ánh sáng, d trng, sinh
ng mm. Tru Kc trng bng dây, cn thân
cây tru dài t 40-n thân phi có r mc ra t t nn thân tru s
c vùi sâu xung 20-t màu m   t dây tri
t,  cnh mng hay  cng, có th  dây tru leo
bám và phát trin.
Cây Tru Không trng t 3-. Mun cho cây tru luôn
tt thì ph  m và thnh thong bón thêm phân, vôi bt và bi thêm mt lp
mt bùn vào gc. Nu dây Trc trng t t ánh sáng

Cht béo
%
3,2
6
Protein
%
2,3
7
Tinh bt
%
0,8
8

%
3,1
9
Tannin
%
1,0-1,3
10
Vitamin C
mg/kg
50
11
Tinh du
%
0,8-1,8

    ng t 80-85% trong lá Tru Không. Tannin gi
chung là hp cht polyphenol có mt trong lá Tru Không t 1,0-1,3%. Các hp

4-allylpyrocatechol) chim t l cao khong 25-70% và là thành phn chính ca tinh
du lá Tru Không [5].
1.1.3. Công dng ca lá Tru Không
Theo y hc c truyn:
Tru Không có v cay nc, tính m có tác dng tr phòng
thp, h m, sát trùng.
Y hc dân gian nhic có kinh nghim dùng c sc lá Tru K
ra vng ch l loét ngoài da. Ti Malaysia, lá Tru Kc
 chu, viêm khp.  Thái Lan, lá Tr ch
Indonesia, dùng lá Tr làm thuc kháng sinh, kháng khun, dit nm. Lá Tru
có th   tr nhc sát trùng
ng hô hp.  , lá và tinh du Tru K u tr bnh phi
8

và làm thup, thuc súc ming hoc thuc ngi trong bnh bch hu. Lá Tru
Không có trong thành phn ch phm thuc c truyn  phi hp vi mt s
c li tr hen ph qun.
 Vit Nam, b phn s dng là lá và rng s dng là lá nhiu
ru K tr hàn thp, nhc m ng
không tiêu, bm trùng có mn khi
thi tii, nhu, khó th, nu thành cao chNhiu n
còn s dng lá Tru K r  ra vt loét,
mm nga, viêm hch bch huyc pha lá Tru K làm
thuc nh mt cha viêm kt mc, cha chàm mt  tr em.
Giã nát lá Tru Không ri cho thêm mu có th cha ph
cha cm mo, tr phong thp nhc mc ép có th nh  tr b
c biu kt hp vi vôi, cau ci  c
hôi ming, làm cho chn tràng, d ru có th 
m lên, súc ming bc ép lá Tru s phòng bnh viêm hng.
Theo y hc hii:

Chng viêm nhim: Lá Tru Không có tác dng cha bnh thp khp và
viêm tinh hoàn.
Làm lành v Khi b c ct t lá Tru K ra
vi dùng lá tru không sch ph i. V khô, kín
ming sau 2 ngày.
Gi Dùng lá Tru Kc ct lá Tru Không
trn vi du da rp vào th giúp gi
Bc sôi: Ly lá Tru K  lá mm ra ri pht mt lp du
thu du rt lên vt bng. C sau vài gi li thay mt lá Tru Không mi. Sau
vài ln, dch trong vt bng s tiêu ht, ch rp không mc, không gây m.
B tc sa:  tc tuyn sa, hãy ly lá Tru Không tm
mt chút du gió s kích thích sa chy nhanh và tun hoàn dòng sa tt.

10

1.2. Hot tính sinh hc t lá Tru
1.2.1. Kh ng oxi hóa ca lá Tru Không
Các nghiên cnh các hp cht phenolic trong thc vt nói chung
có hiu qu cao trong hong chng oxi hóa. Hong này mnh hay yu không
nhng ph thuc vào tng phenolic có trong nó, mà còn ph thuc vào
bn cht ca phenol mà nó chng.
Tính chng oxi hóa ca lá Tru Kc là do s có mt ca các hp
cht phenolic vng nhnh ca chúng trong lá Tru Không, ch yu là
eugenol, chavibetol, chavicol, 4-
 ch chng oxi hóa ca các hp cht polyphenol [6]
Theo Jovavovic (2000); Nicole (2001); Marfak (2003); Van Camp (2005)
trích dn b chng oxi hóa ca các cht phenol:
Vô hot các gc t do.
To phc dng chelat vi các ion Fe
2+


Các ion kim lo    phân tách hydro thành dng alkoxyl và gc
peroxyl, gây ra kích thích s oxi hóa lipid:

Các kim loi này có th tham gia phn ng Fenton và Haber-Weiss:

Phn ng Fenton
Phn ng Haber-Weiss
Cu trúc flavonoid cho phép chúng to phc bn dng chelat vi các ion kim
lon s to gc t do gây nên bi kim lo
 3: Kìm hãm enzyeme xanthine oxydase
Hong ct ngun to các gc t do. Khi có
mt ca oxi, enzyeme này xúc tác s oxi hóa xanthine thành acid uric, phân t oxi
nhn t và tr thành ion superoxide.

Các flavonoid có cu t
cht kìm hãm cnh tranh c      a s to ion
superoxide(Nicole, 2001).
12

Nhiu hp ch hin nhng tác dng tt ci v
th  kh ng oxi hóa. Các flavonoid có tác dng bo v
n ng  ng mch, tai bin mch, lão hóa, thoái hóa gan, tn
c x. Flavonoid làm bn thành mng hp
ri lon chi lon tun hoàn võng m
tác dng chc, làm gim n gan. Nhiu flavonoid thuc nhóm flavon,
flavanon, flavanol có tác dng li tiu rõ rt, có trong lá dip cá, cây râu
n hp các catechin ca trà
có tác d co bóp tim.
Ngày nay, nhc liu và hoa qu c

v  ng nh. Thành phn chính ca các cht hòa tan trong ete là
allypyrocatechol (2, y, thành phn chính ca tinh du Tru là các
hp cht phenol và tecpen, t l ca chúng khác nhau tùy thuc vào ngun gc
ca lá Tru.
Chavibetol:
Công thc phân t: C
10
H
12
O
2

Trng ng phân t: 164,2 g/mol
Công thc cu to: Chavibetol là mt trong nhng thành phn chính ca tinh du t lá Tru, nó
là mt hp ch
Metyl chavibetol:
Công thc phân t: C
11
H
14
O
2

Trng ng phân t: 178,23 g/mol
Công thc cu to:
2

Trng ng phân t: 162,188 g/mol
Công thc cu to:

Eugenol:
Công thc phân t: C
10
H
12
O
2

Trng ng phân t:164,20 g/mol
Công thc cu to: 15

Zing H. W. cùng các cng s    c piperol A, piperol B,
piperbetol, metylpiperbetol t lá Tru Không Piper betle L. có kh c ch s
qun t huyt t a thc gây kích thích bng nhân t hot hóa huyt
t  ph thuc vào n. Hình 1.2. Công thc cu to ca piperol A, piperol B, piperbetol,
metylpiperbetol
Cha các polyphenol
n bi kh ng oxy hóa ca chúng. Chúng
có kh n electron trong chui hô h.

O
H
H
H
3
CO
HO
AcO
OCH
3
O
H
H
3
C
H
3
CO
H
3
CO
AcO
OCH
3
O
H
H
3
C
piperol A piperol B

trc tip vi nhau gi là quá trình khuch tán. Quá trình tách cht hòa tan trong
nguyên liu bng dung môi chính là quá trình chit nguyên liu và nguyên liu là
pha rn, dung môi là pha lng.
Khi 2 pha chuyng tip xúc vi nhau thì trên b mt phân chia pha to
thành lp màng.  lp màng luôn có ch  chuyng dòng và  gia dòng có
th có chuyng xoáy.
Trong lp màng, quá trình di chuyn vt chn là nh s tip xúc gia
các phân t và s tác d gich tán qua
c gi là quá trình khuch tán phân t. Trong nhân ca dòng, quá trình
di chuyn vt cht nh vào s xáo trn phân t ca dòng, vì th gi là khuch tán

1.4.2. Khuch tán thm thu [2]
Là quá trình khuch tán gia 2 pha lng qua mt màng có tính cht bán
th 

Trích đoạn Phƣơng pháp chiết uất bán liên tục Nguyên tắc Công dụng của RSM

---