I HM HÀ NI 2
KHOA SINH - KTNN THM NGHIÊN CU QUY TRÌNH NHÂN NHANH
GING MÍA ROC10 (Saccharum officinarum L.)
BNG CÔNG NGH NUÔI CY IN VITRO
KHÓA LUN TT NGHII HC
Chuyên
Hà Ni, 2014
KHOA SINH - KTNN
THM NGHIÊN CU QUY TRÌNH NHÂN NHANH
GING MÍA ROC10 (Saccharum officinarum L.)
, tháng 5
Sinh viên
Tôi xi
Sinh viên
Hình
Tên hình
Trang
1.1
4
1.2
Ging mía ROC10
15
1.3
Mt s chu ting dùng
5
2.1
22
2.2
23
3.1
Kt qu nuôi cy chi nách sau 7 ngày nuôi cy
24
3.2
25
3.3
ng ca t hn kh
nhân nhanh chi mía ROC10
28
3.4
ng ca n - n kh o
r ca ging mía ROC10
32
. 17
17
17
17
17
17
18
19
19
19
19
2.5.4
in vitro 21
2.5.5-
22
. 24
24
3.2 24
ROC10 27
3.4- 31
36
37
38
chng chu khc trng nhm cung cp
ngun nguyên liu ch l - Tuyên Quang.
Ging mía ROC10 do vin nghiên cu o. Ging
mía này có nhm nông sinh hc: ny mng thi gian
m, thi gian sau t nhánh kho, thích
ht màu mt mn, chu thâm canh, kháng bnh than và mt s bnh
khác, t l t cao. ng thì
vic cp thit là phi cung cp cho nông dân ngun ging tt cao,
sch b có m nhu cng
t nuôi cy in vitro là mt li th ln. t này giúp bo
tn ngun gen thc vt. Xut phát t nhng lý do trên chúng tôi tin hành
thc hi tài u quy trình nhân nhanh ging mía ROC10 bng
công ngh nuôi cy in vitro
2. Mc tiêu nghiên cu
Nhân nhanh thành công ging mía ROC10 bng công ngh nuôi cy mô
t bào in vitro.
- trùng, nuôi cnh ng và chi nách
- ng công ngh t bào
- o r
- áp hun luyn và tri
4.
- Nghiên cu to vt liu sch bnh bng nuôi cng và
chi nách t các cá th .
- Xây dng quy trình nhân ging mía ROC10 bng công ngh in vitro.
- Tin hành ra r
- Tin hành tru kii
3
14].
chuyên :
Hình 1.1
[3]
10].
Là nhân t quan trng quynh s thành công ca quá trình nuôi
cy. Hu hng nhân tc s d nuôi cy
mô và t bào thc vu bao gm các thành phn sau:
- Các nguyên t mui khoáng
+ Nguyên t ng: Các nguyên t ng bao gm: Fe, N, P, K, S,
T bào phôi
sinh
S phân hóa t
Tên chng
N s dng (mg/l)
2,4D [dichlorrophennoxy]
-NAA [naphtylaxetic axit]
-IAA [indol axetic axit]
IBA [indol butyric axit]
Kinetin [6 finfuryl amino purine]
BA [6-BAP][6benzy 1 amino purine]
2-IP[N6-Dimetylally1amino purine]
GA
3
[Gibberelic axit]
0,2-5
0,1-5
0,1-5
0,1-2
0,1-2
0,1-2
0,1-2
0,1-2
6
-t s hp chc b ng
+ c da: Là hp chc s dng nhiu . Cht có
ho c da hi c chng minh là myo-inositol (m-
inositol) và mt s c dng
nuôi cng khá ln chim 10 - 20% th ng [2], [16].
+
+ ng
ng nuôi cy phc hoàn toàn sch ion. Thông
i ta s dc ct hai ln [2].
+ Than hot tính
hp thu các cht màu, các hp cht phenol, các sn phm
i th cng tr nên sm
khi có than ht tính, có th kích thích s ng ca r [2].
+ pH cng
- 5,8
gar.
in vitro
V n quy trình nhân gin [17].
1.1.3.1. Giai đoạn 1: Giai đoạn vào mẫu
nh ti toàn b quy
trình nhân gin này phm bc các yêu cu sau:
- T l cht thp.
- T l sng cao.
- Mô cng và phát trin tt.
8
Mt s hoá chng dùng HgCl
2
, CaOCl
2
, NaOCl, H
2
O
2,
- 1960,,
in vitro
nhiên kin vitro
].
in vitro
].
].
Heinz,
].
10
c bii
vi các cây trng nhi d hp t cao. Hu hu có th
ng vô tính in vitro vi mi hoá trên quy mô
ln (theo tài liu Zimmerman, 1986; Ketchum, 1987; Picrik, 1987) [9].
Vit Nam, các ngành khoa hc nói chung và công ngh nuôi cy mô
0,1% trong 5 phút.
n nhân nhanh to cm chi kt qu i vi 2 ging mía
CP5243 và VN 72234 thì n BAP thích hp nht cho s phát sinh cm
chi vi hai ging mía ROC10 và Ving thì
n BAP thích hp nht cho s phát sinh cm chi là 0,3 mg/l môi
ng [14].
].
n Th Thu H
thut nhân nhanh ging mía VN84-422 và VN85-1427 bin
vitro, s dng nguyên liu nuôi cy là mt mm. Kt qu nghiên cc
là: n nhân nhanh chi vi 2 ging mía VN84-422 và VN85-
1427 thì n 0,5 mg/l kinetin + 1,5 - 2 mg/l BAP thích hp nht và h s
t 2,8 ln sau 3 - 4 tun. n ra r to cây hoàn chnh
n 2 - -NAA là thích hp nht [5].
Nguyn Th Nhn (2005) nghiên c t nhân nhanh các ging
mía Qu ng 15 và F134 bin vitro. Kt qu nghiên cu
c: n to vt liu khu in vitro i vi mô cnh
ng và các mt ng trên thân cây vic kh trùng bng Hypocloric
canxi 5% trong 15 phút là phù hp. n nhân nhanh in vitro môi
ng phù hp là: MS + 0,5 mg/l -NAA + 1 mg/l BA. n ra r to
12
cây hoàn chng thích hp là: MS + 0,5 mg/l -NAA (hoc 7,5%
Saccaroza) [13].
Bã mía có
,
- -
bình , tro
15%, protein 5%, sáp
-,
c
lít
-
.
- -
hân
-
14
a
-
-
trung du
Hình 1.310 [26]
16
-
-
-
- >10%
- [26].