LỜI CẢM ƠN
Để hoàn thành được đề tài này tôi đã nhận được sự giúp đỡ rất
nhiệt tình của thầy cô,bè bạn và gia đình .Trước hết cho tôi gửi
lời cảm ưn sâu sắc nhất đến Th.s Nguyễn Thị Thuý Liên đã chỉ
bảo và giúp đỡ tôi rất tận tình trong suốt thời gian tôi thực tập .
Tôi cũng xin chân thành cảm ơn T.S Nguyễn Ngọc Hùng –
Trưởng bộ môn CNSH –Viện nghiên cứu rau quả -Hà Nội ,cùng
cô TH.S Đoàn Thị Thuỳ Vân và anh Minh Phú và tất cả những
người trong viện nghiên cứu rau quả đã tạo điều kiện giúp tôi
hoàn thành đề tài này.
Cuối cùng cho tôi bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến gia đình ,bè
bạn những người luôn động viên ,giúp đỡ tôi trong suốt quá
trình học tập và thực hiện đề tài.
Trường Cao đẳng Nông Lâm Khoa Công nghệ sinh học
Phần 1: Mở đầu
1.Đặt vấn đề
Hoa đồng tiền (Gerrbera sp.) là một trong 10 loài hoa có nhu cầu sử
dụng nhiều nhất trên thế giới, có đặc điểm là cây lưu niên ra hoa quanh
năm, năng suất cao, hoa bền, đẹp, màu sắc phong phú, được người tiêu
dùng rất ưa chuộng. Hoa đồng tiền đã có mặt ở rất nhiều nước trên thế
giới, lượng hoa thưong mại lớn tập trung chủ yếu ở một số nước như: Hà
Lan, Đan Mạch, Bungari, Đức, Pháp…Ở Châu Á, những nước có sản
lượng hoa đồng tiền cao là Trung Quốc, Ấn Độ, Nhật Bản…Hiện nay hoa
đồng tiền đã chiếm một vị trí quan trọng trong phát triển nông nghiệp của
nhiều quốc gia trên thế giới.
Cây hoa đồng tiền được di nhập vào Việt Nam từ đầu thế kỷ 20, và
có những vùng trồng thương mại như Hà Nội, Đà Lạt và thành phố Hồ
Chí Minh. Tuy nhiên, hoa đồng tiền được trồng ban đầu chỉ là những loại
2.Mục đích yêu cầu của đề tài
Nghiên cứu hoàn thiện quy trình nhân nhanh hoa đồng tiền bằng kĩ
thuật nuôi cấy mô tế bào,trong điều kiện nuôi cấy invitro.
3 Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn
3.1 Ý nghĩa khoa học
Sử dụng công nghệ nuôi cấy mô tế bào làm tăng hệ số nhân chồi.
3.2 Ý nghĩa thực tiễn
Đưa được quy trình nhân nhanh giống hoa đồng tiền đạt hiệu quả.
Báo cáo tốt nghiệp
3
Phan Thị Thảo - 8K
Trường Cao đẳng Nông Lâm Khoa Công nghệ sinh học
Phần 2
Tổng quan tài liệu
1.Nguồn gốc cây hoa đồng tiền:
Cây hoa đồng tiền có tên khoa học là Gerbera sp., thuộc họ Compositae,
có nguồn gốc ở Nam Phi. Nó được phát hiện bởi Robert Jamerson, người
Scotsland vào năm 1880 khi đang làm ở bãi khai thác vàng gần Bardedton
vùng Trausvạl ở Nam Phi. Ông đã tặng cây này cho vườn thực vật
Durdan và người phụ trách khu vườn này là ông John Med Leywood đã
gửi những cây mẫu tới Harry Bolies ở thị trấn Cape Nam Phi. Sau đó, ông
Bolies đã gửi những cây này tới vườn thực vật hoàng Gia Anh để phân
loại và nhân biết và ông dề nghị đặt tên khoa học cho loài này là Gerbera
Jamesonii. Năm 1890, Richard Irwin Lynch ( người Anh) bắt đầu thực
hiện một chương trình tạo giống và đã tạo ra rất nhiều giống cải tiến.
thích hợp có thể ra hoa quanh năm. Tỷ lệ cành cắt và tỷ lệ hoa thương
phẩm đều cao. Kỹ thuật trồng trọt và chăm sóc đơn giản, ít tốn công, đầu
tư một lần có thể cho thu hoạch liên tục từ 4 – 5 năm [Đặng Văn Đông và
Đinh Thế Lộc (2004) [ Công nghệ mới trồng hoa cho thu nhập cao ]
Hiện nay, ở Việt Nam trong các loài hoa đã được chú ý phát triển,
thì hoa đồng tiền kép mới nhập nội còn gọi là đồng tiền Nam Phi nổi lên
như một cây cho hiệu quả kinh tế cao nhất. Từ một sào đồng tiền giống
mới, chăm sóc đúng kỹ thuật có thể cho thu nhập gần 50 triệu đồng/sào
(Nguyễn Quang Thạch,2004)
Theo Đặng Văn Đông và Đinh Thế Lộc (2004) , trồng hoa đồng
tiền mang lại giá trị thu nhập cao nhất trong các loài hoa thông dụng hiện
nay. Trồng một sào đồng tiền, chăm sóc theo đúng yêu cầu kỹ thuật thì
một năm thu được 60.000 bông/sào (mật độ 2000 cây/sào). Với giá bán
buôn tại vườn là 700 - 1500 đồng/ bông, trung bình 900 đồng/bông, tổng
thu sẽ là 54 triệu đồng/ sào /năm. Như vậy, nếu thực hiện canh tác đúng
kỹ thuật với mức giá bán khiêm tốn thì ngay năm đầu trồng hoa đồng tiền
đã thu hồi toàn bộ vốn bỏ ra là 29.700.000đồng/sào, đồng thời còn lãi sấp
xỉ 24 triệu đồng/sào.
Năm 1993, hoa đồng tiền đứng thứ 7 trong số 10 loại hoa cắt có giá
trị kinh tế trên thế giới, đến năm 1994, nó đã vươn lên vị trí thứ 5. Sức
Báo cáo tốt nghiệp
5
Phan Thị Thảo - 8K
Trường Cao đẳng Nông Lâm Khoa Công nghệ sinh học
tiêu thụ hoa thương mại của Hà Lan tăng 12,1% chỉ qua 1 năm (từ 1993 1994). Trong tương lai nhu cầu về hoa đồng tiền trên thế giới còn tăng
6
Phan Thị Thảo - 8K
Trường Cao đẳng Nông Lâm Khoa Công nghệ sinh học
590 triệu USD. Nghề trồng hoa đồng tiền ở Hà Lan đã áp dụng rộng rãi
công nghiệp hoá, tự động hoá và trên 80% hoa được trồng trong môi
trường không cần đất. Trình độ tạo giống của Hà Lan rất cao, phần lớn các
giống đồng tiền mới, hoa to được trồng rộng rãi trong sản xuất là do các
nhà chọn tạo giống Hà Lan lai tạo ra.Công ty Forist của Hà Lan là cơ sở
dẫn đầu thế giới về tạo giống, nghiên cứu, sản xuất và buôn bán hoa đồng
tiền...Công ty có lực lượng rất mạnh về nghiên cứu khoa học, thiết bị sản
xuất, tạo ra rất nhiều giống, sản lượng ngày càng nhiều, việc sử lý sau thu
hoạch, bảo quản, đánh giá... đều ở trình độ rất cao.
Ở Ba Lan, hoa đồng tiền là loại hoa cắt quan trọng nhất và cũng là
cây trồng chính của sản phẩm nuôi cấy mô. Nó chiếm khoảng 90% tổng
sản phẩm nuôi cấy mô năm 1984. Thời vụ hoa đồng tiền chỉ kéo dài trong
tháng 6 và tháng 7, do đó việc bảo quản cây invitro đã ra rễ được khai
thác tốt (Teresa Hempel và cộng sự, 2004 ).
Ở Trung Quốc, ngay từ những năm 1920 đã sản xuất hoa đồng tiền
cắt cành ở Mai Long - Thượng Hải, nhưng do giống bị thoái hoá nghiêm
trọng nên không phát triển. Đến năm 1987, do vận dụng kỹ thuật nuôi cấy
mô nên khắc phục được tình trạng thoái hoá giống, khi đó hoa đồng tiền
mới được khôi phục, phát triển. Hiện nay, Thượng Hải là nơi có diện tích
trồng hoa đồng tiền lớn nhất, đạt 35 ha. Sau Thượng Hải, Giang tô cũng
là nơi phát triển mạnh cây hoa đồng tiền. Năm 1995 mới có trên 6 ha, đến
năm1999 đã có tới 600 ha. Ngoài ra, Viện nghiên cứu Rau hoa, Viện
nghiên cứu khoa học nông nghiệp và Nông trường Liên Vân là những đơn
vị có diện tích trồng hoa đồng tiền lớn, kỹ thuật tương đối cao ( Hà Tiểu
lại đây.
Theo Đặng Văn Đông , năm 2005, trong tổng số diện tích trồng hoa
của cả nước, thì cây đồng tiền chiếm 9%, tăng 1,8 lầnso với năm 1995,
tăng xấp xỉ 1,3 lần so với năm 2000.
Tại vùng Trung du và miền núi phía Bắc diện tích hoa của toàn
vùng có 135,7 ha, Trong đó, cây đồng tiền có 9,7 ha chiếm khoảng 0,07%
trong cơ cấu tổng diện tích. Sản lượng hoa của vùng đạt 44,08 triệu bông,
trong đó sản lượng hoa đồng tiền đạt 3,1 triệu bông.
Tại Lào Cai, hiện nay toàn tỉnh có 97,5 ha hoa các loại, sản lượng
khoảng 25 - 30 triệu bông, trong đó, hoa đồng tiền có diện tích là 5 ha,
sản lượng đạt 1,6 triệu bông, được trồng tập trung tại thị xã Lào Cai và
huyện Bảo Thắng
Tại Hà Giang, toàn tỉnh có 28 ha trồng hoa, sản lượng đạt 6,1 triệu
Báo cáo tốt nghiệp
8
Phan Thị Thảo - 8K
Trường Cao đẳng Nông Lâm Khoa Công nghệ sinh học
bông. Trong đó, diện tích trồng hoa dồng tiền là 1,2 ha, sản lượng đạt
0,38 triệu bông, tập trung chủ yếu tại huyện Quản Bạ và huyện Đồng
Văn.
Tại Sơn La, diện tích trồng hoa toàn tỉnh là 22 ha, sản lượng đạt
6,86 triệu bông. Riêng cây đồng tiền có diện tích 3,5 ha chiếm khoảng
0,16% tồng diện tích trồng hoa, sản lượng đạt 1,12 triệu bông.
Do trồng hoa đồng tiền mang lại thu nhập rất cao nên nhièu năm qua
nhiêu năm qua, nhiều địa phương, hộ gia đình đã tự tìm hiểu để phát triển,
Qua nhiều năm chọn tạo giống cho trồng chậu đã tạo ra rất nhiều giống
hoa trồng chậu ưu thế lai F1 đáp ứng nhu cầu thị hiếu của thị trường.
Những đặc điểm các giống hoa đồng tiền ưu thế lại tập trung vào 5 nhóm
chủ yếu:
+ Đồng nhất về màu hoa
+ Tập tính nở hoa
+ Số hoa trên cây
+ Chất lượng hoa
+ Thời gian sinh trưởng ngắn
Kết quả các giống hoa được trồng thử nghiệm và cho những kết quả
rất hứa hẹn và bà đã có những chia sẻ đóng góp cho cho những người
trồng hoa trên thế giới.
Đồng tiền rất khó kết hạt, hạt lại rất nhỏ sức sống kém nên trước đây
đồng tiền chủ yếu được nhân giống bằng phương pháp tách chồi. Hiện
nay công nghệ nuôi cấy mô tế bào được áp dụng rộng rãi trong việc nhân
giống hoa đồng tiền giúp cải thiện đáng kể trong vấn đề cây giống.
Giống đồng tiền cứng, hoa ngắn 6 inch trồng trong chậu được giới thiệu ở
nhật Bản vào năm 1980, sau đó người ta đã sử dụng công nghệ nuôi cấy
mô để nhân giống. Hiện nay chúng được trồng ở nhiều nước trên thế giới.
- Năm 2000, Viện nghiên cứu rau quả quốc tế đã lai tạo thành công
một giống đồng tiền mới có tên Raon, đây là kết quả của việc lai giữa
giống Kippros có màu vàng, hoa bán kép với giống Rora có màu vàng
hoa đơn. Raon là giống sản xuất hoa cắt có đường kính hoa cắt lớn, màu
cam sẫm, dạng hoa kép, độ bền hoa cắm khoảng 11 ngày, chúng đang
được trồng phổ biến ở Hàn Quốc.
Phương pháp nuôi cấy mô tế bào là phương pháp chủ yếu trong
nhân giống hoa đồng tiền, chính vì thế, từ lâu trên thế giới đã có rất nhiều
nhà khoa học nghiên cứu về vấn đề này
Báo cáo tốt nghiệp
Gerbera jamesonni in invitro.Neth.J. Agr.Sci: 341 – 346)
- Năm 1985, Hempel và cộng sự đã nghiên cứu ảnh hưởng của
Kinetin, BAP v à 2iP đến quá trình nhân giống invitro đối với giống
Marleeen và cho thấy: 23,23µM Kinetin thích hợp cho nhân chồi và
5,5µM BAP cho số rễ tối đa. Khi bổ sung 9,84µM IBAvào môi trường sẽ
làm tăng số lượng rễ và tăng sức đề kháng của cây. (Hempel M, et al,
1985. The influence of citokinins on multiplication and subsequent
rooting of gerbera in vitro. Acta Hort: 301 -305)
- Pinto JEBP lại cho rằng môi trường tốt nhất cho tái sinh cây là
MS có bổ sung 3 - 9 mg/lBA, môi trường nhân nhanh chồi l à 1/2MS +
2,27mg/lBA, còn môi trường tạo rế tốt nhất là không có BA. (Barbosa
Báo cáo tốt nghiệp
11
Phan Thị Thảo - 8K
Trường Cao đẳng Nông Lâm Khoa Công nghệ sinh học
MHP, Pinto JEBP, Pinto CABP, Innecco R. Revista-Ceres, 1994. In vitro
propagation of Gerbera jamesonii Bolus ex Hook cv. Appelbloesem using
young capitulums. 41: 236, 386-395; 10 ref.
4.1.2Các nghiên cứu khác
- Khi nghiên cứu ảnh hưởng của lai gần đến năng suất hoa cắt của
đồng tiền, Huang H cho rằng lai gần làm tăng năng suất hoa từ 10,3 lên
28,3 bông/cây.
- Điều kiện môi trường sống ảnh hưởng đến sinh trưởng và chất
lượng hoa đồng tiền. Điều này được thể hiện trong nghiên cứu của Hahn
Eun Joo .Ông đã tiến hành nghiên cứu 6 giống đồng tiền (Ensophy, Estel,
đồng tiền ở nhiều vùng trồng hoa và nhận được những sự quan tâm của
các nhà khoa học trong nước
Năm 1996, Nguyễn Quang Thạch và cộng sự đã nghiên cứu phương
pháp nuôi cấy invitro giống hoa đồng tiền từ Tiệp Khắc và bước đầu thu
được một số kết quả
- Tạo được nguồn mẫu sạch ban đầu bằng nuôi cấy Meristem trên môi
trường MS-62 cải tiến có bổ sung auxin, cytokinin với tỷ lệ là 1:2 và kích
thước Meristem từ 1-2 mm cho khả năng tạo callus và cụm chồi tốt nhất
- Môi trường tốt nhất để tạo chồi là MS + 15% nước dừa +(810mg)/lBA + 0,5mg/lIAA cho hệ số nhân đạt từ 6,3 -7cây/tháng.
- Môi trường ra rễ tạo cây hoàn chỉnh hiệu quả cao nhất là MS+(810mg)/lI AA + 3%Sacaroza
- Tiêu chuẩn cây con khi đưa ra đất cần đạt từ 4 – 5 lá, có từ 4-5 rễ, cao
4-5cm, giá thể thích hợp nhất đất và phân chuồng hoai mục với tỷ lệ 1:2
Viện Sinh học nông nghiệp - Trường Đại học nông nghiệp I Hà Nội đã
nghiên cứu thành công và đưa vào sản xuất các giống cúc, đồng tiền nuôi
cấy mô tế bào nhằm đáp ứng phần nào cây giống có chất lượng cao cho
sản xuất.
Qua nghiên cứu quy trình nhân nhanh giống hoa đồng tiền bằng kỹ
thuật invitro Đỗ Năng Vịnh và cộng sự đã rút ra một số kết luận sau
- Sử dụng HgCl2 nồng độ 0,1 phần trăm với thời gian khử trùng 10
phút là thích hợp cho hoa đồng tiền, tỷ lệ mẫu sống đạt 82%.
- Môi trường tạo callus và tái sinh chồi: MS + TDZ (0,2mg/l) + NAA
(0,1mg/l) + đường (50g/l) + thạch (6g/l) là tốt nhất để tạo mẫu chồi
invitro.
Báo cáo tốt nghiệp
13
Phan Thị Thảo - 8K
Nguyễn Thu Hà, Lê Thị ánh Hồng, Trần Duy Quý. Áp dụng và nghiên
Báo cáo tốt nghiệp
14
Phan Thị Thảo - 8K
Trường Cao đẳng Nông Lâm Khoa Công nghệ sinh học
cứu cải tiến độ nhạy của kỹ thuật elisa nhằm chuẩn đoán nhanh nhạy,
đặc hiệu bệnh hại trên cây con sau nuôi cấy mô trong vườn ươm do virut
gây ra trên cây hoa đồng tiền và salem - 2006.)
Đặng Văn Đông và cộng sự đã nghiên cứu một số biện pháp kỹ
thuật thâm canh tiên tiến sản xuất hoa đồng tiền tại miền Bắc Việt Nam
cho biết
- Thời vụ trồng hoa đồng tiền thích hợp nhất là tháng 3 và tháng 9;
- Khoảng cách trồng thích hợp nhất là cây cách cây 30cm, hàng
cách hàng 35cm. Tương đương với mật độ là 5 – 6 vạn cây/ha;
- Tưới nước bằng hệ thống nhỏ giọt, chế độ tưới 2 ngày/1lần, mỗi
lần 60 phút là thích hợp nhất cho hoa đồng tiền sinh trưởng, phát triển
đồng thời cho năng suất, chất lượng hoa cao nhất.
- Với công thức bón 100kg đạm + 120kg lân + 100kg kali/ha/lần là
phù hợp nhất với cây hoa đồng tiền: thân lá phát triển vừa phải, tỷ lệ
nhiễm bệnh thấp nhất, rễ phát triển tốt, hoa cứng, cành mập và thẳng.
- Phun phân bón lá Atonik hoặc phân đầu trâu 902 cho hoa đồng
tiền 10 ngày/1 lần, có tác dụng làm tăng năng suất, chất lượng hoa và hiệu
quả kinh tế tăng 2,5 lần.
- Biện pháp kỹ thuật tỉa bỏ 30% lá (sau trồng 6 tháng, mỗi tháng tỉa
1 lần) làm giảm mật độ nhện, giảm tỷ lệ bệnh, tăng hiệu quả phòng trừ
khả năng côngnghiệp hóa cao do nuôi cấy trong điều kiện ổn định về môi
trường dinhdưỡng, nhiệt độ, ánh sáng, do đó có thể công nghiệp hóa hoàn
toàn từ khâu nhân cây giống với số lượng lớn đến khi ươm trồng trong
nhà lưới.
4. 3.2 Ứng dụng nuôi cấy mô trong nhân giống cây hoa
* Ứng dụng nuôi cấy mô tế bào với cây hoa trên thế giới
Các nước chiếm ưu thế trong thị trường hoa tươi của thế giới là những
nước có công nghệ sản xuất hoa tiên tiến và hiệu quả. Họ đã nghiên cứu
và ứng dụng thành công những kỹ thuật sinh học và nông nghiệp hiện đại
trong từng khâu sản xuất như: chọn, tạo giống mới, nhân giống, nuôi
trồng, bảoquản hoa,… Vậy, để có thể thương mại hoá ngành sản xuất hoa
phải chươngtrình hoá được quá trình sản xuất cấp bao nhiêu sản phẩm,
loại gì, vào thời gian nào, tiêu chuẩn như thế nào… điều này chỉ có thể
thực hiện được trên nền kỹ thuật cao và trước hết phải có công nghệ nhân
giống hiện đại. Đó chính là công nghệ nuôi cây mô tế bào thực vật. Chỉ
riêng Hà Lan hàng năm đã sản xuất 15 triệu cây hoa đồng tiền bằng
Báo cáo tốt nghiệp
16
Phan Thị Thảo - 8K
Trường Cao đẳng Nông Lâm Khoa Công nghệ sinh học
phương pháp nuôi cây mô để cung ứng cho sản xuất. Ở Thái Lan mỗi
năm xuất khẩu 13.000 tấn hoa Lan cắt cành, tương ứng với 350 - 400
triệu cành hoa cắt, loại hoa này đều sửdụng giống cây từ nguồn nuôi cấy
mô. Nuôi cấy mô được ứng dụng trên rất nhiều loài hoa có chất lượng:
Trên hoa loa kèn: ở Hà Lan nuôi cấy mô cung ứng được
Trường Cao đẳng Nông Lâm Khoa Công nghệ sinh học
tâm công nghệ sinh học của Việt Nam tiến hành nhân giống bằng phương
pháp nuôi cấy mô thành công trong những năm qua. Tuy nhiên giá thành
cây giống nuôi cấy mô còn khá cao.
Báo cáo tốt nghiệp
18
Phan Thị Thảo - 8K
Trường Cao đẳng Nông Lâm Khoa Công nghệ sinh học
Phần 3
Vật liệu, nội dung và phương pháp nghiên cứu
3.1.Vật liệu nghiên cứu
Vật liệu là các giống hoa đồng tiền đã được tuyển chọn và công
nhận giống. Được lưu giữ tại vườn ươm của bộ môn hoa cây cảnh- Viện
nghiên cứu rau quả.
Vật liệu sử dụng cho nuôi cấy invitro là chồi hoa đồng tiền
3.2.Nội dung nghiên cứu
* Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ Ba đến sinh trưởng và hệ số
nhân của cây hoa đồng tiền.
* Bố trí thí nghiệm
Các cụm chồi mới tái sinh hoặc đã qua nhiều lần cấy chuyển được tách
thành các cụm chồi nhỏ hơn, có 3 chồi/ 1 cụm.Các cụm chồi được cấy
trên các công thức môi trường như đã mô tả, được đặt trong điều kiện
chuẩn nuôi cây.
Số cụm chồi trong 1 bình là 5. Tổng số bình trong 1 công thức là 30, 3
*Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ Kinêtin đến sinh trưởng và hệ
số nhân của cây đồng tiền.
* Bố trí thí nghiệm
Các cụm chồi mới tái sinh hoặc đã qua nhiều lần cấy chuyển được tách
thành các cụm chồi nhỏ hơn, có 3 chồi/ 1 cụm.Các cụm chồi được cấy
trên các công thức môi trường như đã mô tả, được đặt trong điều kiện
chuẩn nuôi cây.
Số cụm chồi trong 1 bình là 5. Tổng số bình trong 1 công thức là 30, 3
lần nhắc lại. Rút ngẫu nhiên 50% số mẫu để theo dõi. Thời gian thí
nghiệm kết thúc sau 6 tuần kể từ ngày cấy (khi mẫu được cấy chuyển
sang môi trường mới.)
CT
nồng độ
Kinetin(mg/l)
ĐC=CT1
CT2
CT3
CT4
0
0.5
1.0
1.5
Ghi chú
nguồn mẫu : chồi hoa đồng tiền
Môi trường :MS
20
Phan Thị Thảo - 8K
Trường Cao đẳng Nông Lâm Khoa Công nghệ sinh học
* Bố trí thí nghiệm. Môi trường thí nghiệm là MS có bổ xung chất
điều tiết sinh trưởng là αNAA, theo thiết kế của thí nghiệm.
Chồi hoa đồng tiền được sử dụng cho thí nghiệm là các chồi có từ 2 lá
trở lên, có chiều dài từ 2-3cm. Các chồi được tách riêng rẽ cấy vào môi
trường tạo rễ. 1 chồi cho 1 ống nghiệm, mỗi công thức có 30 mẫu thí
nghiệm, với 3 lần lặp lại. Kiểm tra mẫu sau 30 ngày nuôi. Thí nghiệm
được đặt trong môi trường nuôi cấy chuẩn.
Nồng độ
NAA(mg/l)
CT
Ghi chú
ĐC=CT1
0
CT2
0.5
CT3
0.7
CT4
1.0
* Các chỉ tiêu theo dõi
: tốt
+Tỷ lệ số cây ra rễ sau
15 ngày =
+Số rễ trung bình trên
cây =
Báo cáo tốt nghiệp
Số cây ra rễ
Tổng số cây thí nghiệm
x 100
Tổng số rễ thu được
Tổng số cây ra rễ
x 100
21
Phan Thị Thảo - 8K
Trường Cao đẳng Nông Lâm Khoa Công nghệ sinh học
+Tỉ lệ cây sống (%) =
Số cây sống
Tổng số cây trồng
chiều
sống(%) chồi(%) chồi(chồi/cây caoTB(cm
100
100
100
100
100
100
100
100
2.20
5.40
5.10
4.71
4.40
1.56
4.17
3.57
3.37
3.27
4.30
0.29
số
lá(số
lá/cây
4.76
4.71 chồi /cây (CT4) .Trong đó,ở nồng độ 0.5mg BA/l cho hệ số nhân
chồi cao nhất 5.40chồi/cây(CT2) .Khi nồng độ BA tăng dần thì số lá /
chồi cũng tăng lên.
Tuy nhiên,việc bổ sung BA vào môi trường nuôi cấy lại làm giảm
khả năng sinh trưởng của cây ,nồng độ BA càng cao thì chiều cao chồi lại
càng giảm :từ 4.17cm (CT1) xuống 3.57cm(CT2) ,và tiếp tục giảm ở các
công thức tiếp theo.Đồng thời hệ số nhân chồi cao thì số lá giảm ,từ 4.76
lá/cây (CT1) xuống còn 4.30 lá /cây (CT2) .
Ở tất cả các công thức có bổ sung BA thì mẫu cấy không hề có sự
tạo rễ ,điều này hoàn toàn đngs với bản chất của BA là một chất kích
thích sinh trưởng thuọc nhóm xytokinin nên đã kích thích khả năng đẻ
nhánh của cây mà không kích thích mẫu cấy tái sinh tạo rễ.
Ảnh hưởng của BA đên sinh trưởng và hệ số nhân
Kết luận :Khi bổ sung nồng độ BA ở nồng độ 0.5mg/l là cho kết
quả nhân chồi tốt nhất và đạt 5.40 chồi/cây.(sau3 tuần)
4.2 Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ Kinêtin đến sinh trưởng và hệ
số nhân của cây đồng tiền
Báo cáo tốt nghiệp
24
Phan Thị Thảo - 8K
Trường Cao đẳng Nông Lâm Khoa Công nghệ sinh học
Bảng 2 Ảnh hưởng của nồng độ Kinêtin đến sinh trưởng và hệ số
nhân của cây đồng tiền (sau3tuần)
ct
3.20
1.63
chiều
caoTB
4.20
4.10
4.03
3.63
2.90
0.22
số lá
lá/cây
4.73
5.70
5.60
4.80
2.40
0.23
tỷ lệ ra
rễ
73.33
80.00
93.33
0
Biểu đồ 2: Ảnh hưởng của nồng độ Kinêtin đến sinh trưởng và hệ số
nhân của cây đồng tiền (sau3tuần)