ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN

Giang Huy Diệm

NGHIÊN CỨU TẠO HỆ ĐỆM GIÚP TĂNG CƯỜNG
ĐỘ BỀN CỦA ALLICIN TỪ TỎI VÀ BƯỚC ĐẦU
ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG TRÊN MÔ HÌNH CHUỘT
BỊ MÁU NHIỄM MỠ

LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC

Hà Nội – 2015


ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN

Giang Huy Diệm

NGHIÊN CỨU TẠO HỆ ĐỆM GIÚP TĂNG CƯỜNG
ĐỘ BỀN CỦA ALLICIN TỪ TỎI VÀ BƯỚC ĐẦU
ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG TRÊN MÔ HÌNH CHUỘT
BỊ MÁU NHIỄM MỠ

Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm
Mã vol: 60 42 01 14

LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC

Người hướng dẫn khoa học: TS. Trịnh Tất Cường

MỞ ĐẦU ....................................................................................................................1
CHƯƠNG 1- TỔNG QUAN.....................................................................................3
1.1. Máu nhiễm mỡ................................................................................................3
1.1.1. Khái niệm..................................................................................................3
1.1.2. Các chỉ số cơ bản để đánh giá bệnh máu nhiễm mỡ ..............................3
1.1.2.1. Cholesterol và triglyceride ................................................................3
1.1.3. Nguyên nhân ............................................................................................5
1.1.3.1. Yếu tố di truyền .................................................................................5
1.1.3.2. Nguyên nhân thứ phát ......................................................................6
1.1.4. Điều trị bệnh máu nhiễm mỡ...................................................................7
1.1.4.1. Thuốc hạ lipid máu ...........................................................................8
1.1.4.2. Thực vật trong điều trị máu nhiễm mỡ ..........................................11
1.2. Cây tỏi ...........................................................................................................11
1.2.1. Cây tỏi .....................................................................................................11
1.2.1.1. Phân loại thực vật, đặc điểm sinh thái. ..........................................12
1.2.2. Thành phần trong tỏi .............................................................................14
1.3. Allicin ............................................................................................................14
1.3.1. Quá trình sinh tổng hợp của allicin tự nhiên .......................................16
1.3.2. Tổng hợp allicin theo phương pháp hóa học........................................17
1.3.3. Hoạt tính của Allicin ..............................................................................17
1.3.3.1. Hoạt tính kháng khuẩn của allicin ................................................18
1.3.3.2. Hiệu quả trong điều trị máu nhiễm mỡ của allicin .......................19
1.3.4. Độ bền của allicin ..................................................................................19
1.3.4.1. Allicin bị phân hủy bởi nhiệt độ cao ..............................................19
1.3.4.2. Allicin bị phân hủy bởi pH .............................................................20
1.3.4.3. Khả năng hấp thụ của allicin vào máu ..........................................20
Chương 2 - ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊNCỨU .......................22
2.1. Đối tượng nghiên cứu...................................................................................22
2.1.1. Động vật thí nghiệm ...............................................................................22
2.1.2. Hóa chất..................................................................................................22

DANH MỤC HÌNH
Hình 1: Những triệu trứng lâm sàng của bệnh máu nhiễm mỡ ...................................5
Hình 2: Cây tỏi ..........................................................................................................14
Hình 3: Cấu trúc allicin .............................................................................................15
Hình 4: Hoạt tính của allicin chống trên chủng vi khuẩn Staphylococcus [21]........19
Hình 5: Hoạt lực của allicin giảm ở 70 và 80 độ C [46] ...........................................20
Hình 6: Sắc kí đồ allicin chuẩn ................................................................................28
Hình 7: Bước sóng hấp thụ cực đại của allicin .........................................................29
Hình 8: Đường chuẩn allicin .....................................................................................29
Hình 9: bước sóng hấp thụ của các mẫu Allicin chuẩn với các thể tích khác nhau .........30
Hình 10: Lượng allicin tạo thành với đệm có pH = 3 ...............................................31
Hình 11: Lượng allicin tạo thành với đệm có pH = 4 ...............................................31
Hình 12: Lượng allicin tạo thành với đệm có pH = 5 ...............................................32
Hình 13: Lượng allicin tạo thành với đệm có pH = 6 ...............................................32
Hình 14: Lượng allicin tạo thành trong H2O có pH = 7............................................33
Hình 15: Lượng allicin tạo thành với đệm có pH = 7,2 ............................................33
Hình 16: Lượng allicin tạo thành với đệm có pH = 8 ...............................................34
Hình 17: Hàm lượng allicin ở các đệm có pH khác nhau .........................................35
Hình 18: Lượng allicin tạo thành với đệm có pH = 4 sau 30 phút ...........................36
Hình 19: Lượng allicin tạo thành với đệm có pH = 5 sau 30 phút ...........................37
Hình 20: Lượng allicin tạo thành với đệm có pH = 6 sau 30 phút ...........................37
Hình 21: Lượng allicin tạo thành H2O sau 30 phút ..................................................38
Hình 22: Lượng allicin tạo thành với đệm có pH = 7,2 sau 30 phút ........................38
Hình 23: Sự thay đổi hàm lượng allicin theo thời gian .............................................40
Hình 24: Lượng s-allycysteine với đệm có pH = 4 ...................................................42
Hình 25: Lượng s-allycysteine với đệm có pH = 5 ...................................................42
Hình 26: Lượng s-allycysteine với đệm có pH = 6 ...................................................43
Hình 27: Lượng s-allycysteine với H2O....................................................................43
Hình 28: Lượng s-allycysteine với đệm có pH = 7,2 ................................................44


HPLC

Sắc kí lỏng hiệu năng cao

3

LDL

Lipoprotein mật độ thấp

4

VLDL

Lipoprotein mật độ rất thấp


MỞ ĐẦU
Tỏi (tên danh pháp: Allium sativum) là một loài thực vật thuộc họ Hành được
sử dụng phổ biến làm gia vị cũng như vị thuốc. Tỏi đã được chứng minh có tác
dụng rất tốt đối với sức khỏe con người. Trong thành phần của tỏi chứa rất nhiều
hợp chất quý trong đó hợp chất có dược tính quan trọng nhất là allicin. Các nghiên
cứu gần đây đã công bố allicin trong tỏi có khả năng kháng khuẩn, chống viêm
mạnh, ngăn chặn sự hình thành cholesterol có hại cho cơ thể, làm giảm các chỉ vol
mỡ máu, tăng cường hoạt tính của các tế bào trong quá trình thực bào, tăng cường
hoạt tính của các tế bào giết tự nhiên, ức chế sự phát triển của vi sinh vật gây bệnh,
ức chế sự phát triển của những tế bào ung thư... Rất nhiều công bố và các công ty
trên thế giới đã sản xuất allicin bằng việc tạo quá trình xúc tác giữa alliin với enzym
allinase có sẵn trong tỏi. Bằng việc sử dụng allicin chiết xuất từ alliin có sẵn trong
tỏi, các công ty trên thế giới đã sản xuất được rất nhiều loại thực phẩm chức năng

804-808.

Tiếng Anh
5. Abramovitz Dana, Sagui Gavri, Dror Harats, Hanna Levkovitz, David
Mirelman, Talia Miron, Sigal Eilat-Adar, Aharon Rabinkov, Meir Wilchek, and
Michael Eldar (1999), "Allicin-induced decrease in formation of fatty streaks
(atherosclerosis) in mice fed a cholesterol-rich diet", Coronary artery disease,
vol 10(7), pp. 515-520.
6. Aimei Zhou (1998), Study on the stability of allicin, SCIENCE AND
TECHNOLOGY OF FOOD INDUSTRY, pp. 06.
7. Allan G Michael and Bruce Arroll (2014), "Prevention and treatment of the
common cold: making sense of the evidence", CMAJ: Canadian Medical
Association Journal, vol 186(3), pp. 190.
8. Anderson James W, Lisa D Allgood, Ann Lawrence, Linda A Altringer, George
R Jerdack, David A Hengehold, and Jorge G Morel (2000), "Cholesterollowering effects of psyllium intake adjunctive to diet therapy in men and women

52


with hypercholesterolemia: meta-analysis of 8 controlled trials", The American
journal of clinical nutrition, vol 71(2), pp. 472-479.
9. Ankri Serge and David Mirelman (1999), "Antimicrobial properties of allicin
from garlic", Microbes and infection, vol 1(2), pp. 125-129.
10. Athyros Vassilios G, Olga I Giouleme, Nikolaos L Nikolaidis, Themistoklis V
Vasiliadis, Vassilios I Bouloukos, Athanasios G Kontopoulos, and Nikolaos P
Eugenidis

(2002),

"Long-term

allicin

on

weight

in

fructose-induced

hyperinsulinemic,

hyperlipidemic, hypertensive rats", American journal of hypertension, vol
16(12), pp. 1053-1056.
27. Ensminger Marion Eugene và Audrey H Ensminger (1993), Foods & Nutrition
Encyclopedia, Two Volume Set, CRC press.
28. Ewald Nils, Philip D Hardt, and Hans-Ulrich Kloer (2009), "Severe
hypertriglyceridemia and pancreatitis: presentation and management", Current
opinion in lipidology, vol 20(6), pp. 497-504.
29. Falkenberg Ricky L, Harold L Archibald, Danford Wilkinson, Lisa Trexler, and
Julie M Hayes (2011), Alkalizing compositions and methods for using the same,
Google Patents.
30. Fojo SS and HB Brewer (1992), "Hypertriglyceridaemia due to genetic defects
in lipoprotein lipase and apolipoprotein C‐II", Journal of internal medicine,
vol 231(6), pp. 669-677.
31. from Ferrara Aglio di Voghiera and Italy PDO Emilia-Romagna Species: A.
sativum.
32. Fung Michelle A and Jiri J Frohlich (2002), "Common problems in the
management of hypertriglyceridemia", Canadian Medical Association Journal,
vol 167(11), pp. 1261-1266.

41. Grundy Scott M, Gloria Lena Vega, Mark E McGovern, Brian R Tulloch, David
M Kendall, David Fitz-Patrick, Om P Ganda, Robert S Rosenson, John B Buse,
and David D Robertson (2002), "Efficacy, safety, and tolerability of once-daily
niacin for the treatment of dyslipidemia associated with type 2 diabetes: results
of the assessment of diabetes control and evaluation of the efficacy of niaspan
trial", Archives of Internal Medicine, vol 162(14), pp. 1568-1576.

56


42. Harris JC, S Cottrell, S Plummer, and David Lloyd (2001), "Antimicrobial
properties

of

Allium

sativum

(garlic)",

Applied

Microbiology

and

Biotechnology, vol 57(3), pp. 282-286.
43. He Ning, Qingbiao Li, Daohua Sun, and Xueping Ling (2008), "Isolation,
purification and characterization of superoxide dismutase from garlic",

England Journal of Medicine, vol 329(1), pp. 21-26.
50. Jialal Ishwarlal (1996), "A practical approach to the laboratory diagnosis of
dyslipidemia", American journal of clinical pathology, vol 106(1), pp. 128-138.
51. Katona Terrence and Bruce R Smoller (2010), "Dyslipidemia (Hyperlipidemia),
in Clinical and Pathological Aspects of Skin Diseases in Endocrine, Metabolic,
Nutritional and Deposition Disease" Springer. pp. 55-61.
52. Keulen Eric TP, Christine Voors-Pette, and Tjerk Wa De Bruin (2001),
"Familial

dyslipidemic

hypertension

syndrome:

familial

combined

hyperlipidemia, and the role of abdominal fat mass", American journal of
hypertension, vol 14(4), pp. 357-363.
53. Kourounakis PN and EA Rekka (1991), "Effect on active oxygen species of
alliin and Allium sativum (garlic) powder", Research communications in
chemical pathology and pharmacology, vol 74(2), pp. 249-252.
54. Kwiterovich Jr Peter O (2008), "Recognition and management of dyslipidemia
in children and adolescents", The Journal of Clinical Endocrinology &
Metabolism, vol 93(11), pp. 4200-4209.
55. Lawson Larry D and Christopher D Gardner (2005), "Composition, stability,
and bioavailability of garlic products used in a clinical trial", Journal of
agricultural and food chemistry, vol 53(16), pp. 6254-6261.

Roberts, and Diane B Stoy (1997), "Psyllium-enriched cereals lower blood total
cholesterol

and

LDL

cholesterol,

but

not

HDL

cholesterol,

in

hypercholesterolemic adults: results of a meta-analysis", The Journal of
nutrition, vol 127(10), pp. 1973-1980.
65. Onyeagba RA, OC Ugbogu, CU Okeke, and O Iroakasi (2005), "Studies on the
antimicrobial effects of garlic (Allium sativum Linn), ginger (Zingiber officinale
Roscoe) and lime (Citrus aurantifolia Linn)", African Journal of Biotechnology,
vol 3(10), pp. 552-554.
66. Pejic Rade N và Daniel T Lee (2006), "Hypertriglyceridemia", The Journal of
the American Board of Family Medicine, vol 19(3), pp. 310-316.

59


76. Simopoulos Artemis P (1991), "Omega-3 fatty axits in health and disease and in
growth and development", The American journal of clinical nutrition, vol 54(3),
pp. 438-463.
77. Stabler Sarah N, Aaron M Tejani, Fong Huynh, and Claire Fowkes (2012),
"Garlic for the prevention of cardiovascular morbidity and mortality in
hypertensive patients", Cochrane Database Syst Rev, vol 8.
78. Staels Bart, Jean Dallongeville, Johan Auwerx, Kristina Schoonjans, Eran
Leitersdorf, and Jean-Charles Fruchart (1998), "Mechanism of action of fibrates
on lipid and lipoprotein metabolism", Circulation, vol 98(19), pp. 2088-2093.
79. Stone Neil J (1994), "Secondary causes of hyperlipidemia", The medical clinics
of North America, vol 78(1), pp. 117-141.
80. Suvarna Yashasvi và Rathai Rajagopalan (2015), "GARLIC: NATURE’S
PANACEA", Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, vol 8(3).
81. H Takagi (1990), "Garlic Allium sativum L, Onions and Allied Crops",
Biochemistry, Food Science, and Minor Crops, vol 3, pp. 109-146.
82. Varady Krista A and Peter JH Jones (2005), "Combination diet and exercise
interventions for the treatment of dyslipidemia: an effective preliminary strategy
to lower cholesterol levels?", The Journal of nutrition, vol 135(8), pp. 18291835.
83. Williams RR1, SC Hunt, PN Hopkins, LL Wu, SJ Hasstedt, TD Berry, GK
Barlow, BM Stults, MC Schumacher, and EH Ludwig (1993), "Genetic basis of
familial dyslipidemia and hypertension: 15-year results from Utah", American
journal of hypertension, vol 6(11 Pt 2), pp. 319S-327S.
84. Woo Hae Dong, Sohee Park, Kyungwon Oh, Hyun Ja Kim, Hae Rim Shin,
Hyun Kyung Moon, and Jeongseon Kim (2013), "Diet and Cancer Risk in the
Korean Population: A Meta-analysis", Asian Pacific journal of cancer
prevention: APJCP, vol 15(19), pp. 8509-8519.

61



Conlon, Mark J Graham, Rosanne M Crooke, Li-Shin Huang, and Henry N
Ginsberg (2006), "Aberrant hepatic expression of PPARγ2 stimulates hepatic
lipogenesis in a mouse model of obesity, insulin resistance, dyslipidemia, and
hepatic steatosis", Journal of Biological Chemistry, vol 281(49), pp. 3760337615.
89. Zhou Xiao-Feng, Zhen-Shan Ding, and Nai-Bo Liu (2013), "Allium vegetables
and risk of prostate cancer: evidence from 132,192 subjects", Asian Pacific
Journal of Cancer Prevention, vol 14(7), pp. 4131-4134.

62