Kỹ thuật điện di ADN
DNA electrophoresis
Khái niệm
DNA electrophoresis là quá trình
phân tách một hỗn hợp các phân
tử DNA nhờ một chất nền cố
định (gel) trong một điện trường.

ADN tich điện âm
vì gốc phosphat
hình thành khung
đường-phosphate
của phân tử AND
tích điện âm.

Trong điện trường di
chuyển về cực dương
Điện di ADN
Điện di ADN

Bản gel hoạt động như
một giá thể để phân tách
các đoạn ADN.

ADN th­êng ®­îc ®iÖn di
trªn hai lo¹i gel: agarose vµ
acrylamid

Các lỗ được tạo ra trong
bản gel. Chúng được xem
như là các giêngs để chứa

chậm lại so với các
phân tử nhỏ khi AND
di chuyển trong bản
gel.
Điện di ADN

Quá trình phân
tách cứ tiếp tục
tạo ra sự phân
tách giữa các
đoạn AND càng rõ
hơn.
Điện di ADN

Thang phân tử chuẩn
thương được đienj di
cùng với AND.

Thang chuẩn thường
là hỗn hợp các đoạn
AND đã biết trước
kich thước.

Được dùng để ước
lượng kích thước của
các đoạn AND trong
mẫu nghiên cứu.
Fig 20-1: DNA separation by gel electrophoresis
http://a32.lehman.cuny.edu/molbio_course/agarose.htm
Một số bước chính trong kỹ thuật điện di

separate well on
this gel. This can
be corrected by
altering gel
density.


Kết quả điện di AND trên gel có nông đô
khác nhau
Faster migration
in a less concentrated gel
Tương quan giữa NĐ agarose và độ lớn của ADN
Stt % agarose KÝch th­íc m nh ADN (kb)ả
1.
 
0,3 5 - 60
2.
 
0,6 1 - 20
3.
 
0,7 0,8 - 10
4.
 
0,9 0,5 - 7
5.
 
1,2 0,4 - 6
6.