Chương 2
Chương

2
Cấu trúc, chức năng và phương
pháp phân tích protein
DNA tron
g
tế bào chứa nhiều dạn
g
thôn
g
tin. Bao
g
ồm các
g gg g
trình tự nucleotide có tác dụng điều hòa, các tín hiệu bắt
đầu hoặc kết thúc sự dịch mã và thông tin cho tổng hợp
các l
ọ
ai RNA và
p
rotein
ọ p
Phần lớn thông tin lưu trữ trong gen dùng để tổng hợp
protein. DNA là phân tử tĩnh.
Gen mã hóa → cấu trúc protein → xác định hoạt tính sinh
học → sinh lý tế bào
ổ ế ế ổ ế
Thay đ
ổ

protein

là

polymer

của

các

aa dạng đồng phân L. Cấu trúc chung:
R
COO
-
NH
3
+
C
3
H
H
2020
Amino acidsAmino acids
20

20

Amino

acidsAmino

ion

lưỡng

cực

trong

dung

dịch

nước. Các chuổi phụ ảnh hưởng đến tính
chấtcủa các protein
chất

của

các

protein
2.1.2 Các chuỗi phụ tích điện
Tí h id ti l t i
Tí
n
h
ac
id
: a.aspar
ti

béo

không

phân

cực
Glycine, proline
Liili
L
euc
i
ne,
i
so
l
euc
i
ne
Methionine
215Chuỗiphụ thơm
2
.
1
.
5

Chuỗi

phụ

Hì
n
h

d
ạng:
hì
n
h
c
ầ
u
(
p
hầ
n
lớ
n c
á
c enzym
)
,
d
ạng sợ
i

(
prote
i
n c

Hli
H
N
α
H
e
li
x
C
H
N
C
O
C
N
C
H
+
-
O
H
O
H
H
N
C
C
O
C
N

N
C
O
C
O
C
O
Protein Secondary Structure:
β
Pl t d Sh t
β
Pl
ea
t
e
d

Sh
ee
t
O
H
O
H
O
H
O
H
N
H

H
O
H
O
H
O
H
O
N
H
C
C
O
N
H
C
C
O
N
H
C
C
O
N
H
C
C
O
N
C

2.2.6 Các nhóm ngoại (prosthetic
)
group
)
NAD
–
Nicotinamide adenine dinucleotide
NAD

Nicotinamide

adenine

dinucleotide
227Chứcnăng của protein
2
.
2
.
7

Chức

năng

của

protein
•
Xúc tác

2
.
8

Miền

motif

và

các

họ

protein
•
Miền (Domain):
Miền

(Domain):

CấutrúcsiêubậcIIMotif
Cấu

trúc

siêu

bậc


c/ Tính kỵ nước
d/ Ái lực
d/

Ái

lực
Kỹ thuật tái tổ hợp: làm cho tinh sạch dễ dàng hơn
Sắckýcột
Sắc

ký

cột
• Cation exchange
chromato
g
ra
p
h
y
:
gpy
• Protein carries
postive charge
(cation)
• Buffer pH must be
lower than protein
pI
• No sample volume

is

usually

long
• Sắc ký ái lực
(Affinity
chromatography)
• Separate proteins
by their binding
specificities
specificities
• No sample
volume limit
volume

limit
Quá trình tinh sạch enzyme
Quá

trình

tinh

sạch

enzyme
Điện di (electrophoresis)
(1) SDS
PAGE

ni
ts
will
be

subu ts be
separated
Anode
Nhuộm Coomassive blue
Các band
protein