TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG
KHOA: NUÔI TRỒNG THỦY SẢN
NGÀNH: BỆNH HỌC THUỶ SẢN
ĐỀ CƯƠNG THỰC TẬP TỐT NGHIỆP
Tên Đề tài:
Nghiên cứu tác nhân gây bệnh vi khuẩn trên cá Hồi vân
(Oncorhynchus mykiss) ở giai đoạn cá giống nuôi tại Thác
Bạc-Lào Cai

Người thực hiện : Trần Thị Ngân
Lớp : 47BH-ĐHNT
Người hướng dẫn: ThS. Trương Thị Mỹ Hạnh


kỹ thuật cần quản lý tốt môi trường và phòng ngừa dịch bệnh.
Trong công nghệ sản xuất giống cá hồi vân, giai đoạn ưong cá
bột,cá hương,và cá giống là rất quan trọng quyết định tới năng
suất và sản lượng giống. Có rất nhiều yếu tố ảnh hưởng tới
giai đoạn ương nuôi trong đó dịch bệnh là một yếu tố rất quan
trọng. Những nghiên cứu sâu hơn về bệnh (ký sinh trùng, nấm,
vi khuẩn…) trên cá hồi vân tại Việt Nam là rất cần thiết.Vì
vậy cần thiết phải tiến hành đề tài :
“Nghiên cứu tác nhân gây bệnh vi khuẩn trên cá Hồi vân
(Oncorhynchus mykiss) ở giai đoạn cá giống nuôi tại Thác
Bạc-Lào Cai ”.

Mục tiêu nghiên cứu:
- Xác định tác nhân gây bệnh do vi khuẩn gây ra trên cá Hồi
vân ở giai đoạn cá giống nuôi tại Thác Bạc - Lào Cai
Nội dung nghiên cứu:
- Thu mẫu, nuôi cấy, phân lập vi khuẩn trên cá Hồi vân giống
- Gây nhiễm nhân tạo các loài vi khuẩn đã phân lập được lên
cá khỏe.
-Thử kháng sinh đồ, xác định tính diệt khuẩn của thuốc với vi
khuẩn thu được trên cá giống Hồi vân.
II. Phương pháp nghiên cứu:
II.1. Địa điểm và thời gian nghiên cứu
Địa điểm:
- Trung tâm Nghiên cứu Quan trắc cảnh báo môi trường và
phòng ngừa dịch bệnh thuỷ sản khu vực miền Bắc (CEDMA) -
Viện Nghiên cứu Nuôi trồng thuỷ sản 1 - Đình Bảng- Từ Sơn-
Bắc Ninh.
- Trung tâm nghiên cứu cá nước lạnh tại Thác Bạc - Lào Cai
Thời gian:
Kết luận tác nhân gây bệnh
Thu mẫu cá
-Dự kiến số mẫu : 45 (mẫu được thu trong 3 đợt )
-Mẫu thu là những cá thể có dấu hiệu bị bệnh. Mẫu được thu
tại hiện trường.
Thu mẫu bệnh phẩm:
- Quan sát dấu hiệu bên ngoài và ghi chép các hiện tượng bất
bình thường trên mẫu cá thu.
- Tất cả các thao tác trong quá trình làm đều được vô trùng.
- Giải phẫu mẫu bằng các dụng cụ vô trùng để lộ các nội quan
.Quan sát, ghi chép các biến đổi khác thường của các cơ quan
như gan, thận, lách
- Dùng bông cồn sát trùng tại diểm cần thu mẫu như gan, thận.
Dùng que cấy lấy mẫu bệnh phẩm, vạch lên môi trường nuôi
cấy (TSA, RS) một số đường ziczac đựơc vùng 1.Hơ nóng que
cấy để nguội, từ đường số 1 vạch một số đường liên tiếp được
vùng 2.Tiếp tục như vậy được vùng 3.
- Nuôi cấy mẫu vi khuẩn thu được trong nhiệt độ 15-20
0
C
trong 24h.
Chọn khuẩn lạc
- Sau 24 giờ kiểm tra hình thái khuẩn lạc, bề mặt, rìa , màu
sắc khuẩn lạc
- Chọn khuẩn lạc, nuôi cấy tăng sinh trên môi trường TSA ở
nhiệt độ 15-20
0
C trong 24 giờ


GLU

MAN

INO

SOR

RHA

SAC

MEL

AMY

ARAQui trình th
ử kít API 20E

1

2

3

4



48h.
 Đọc kết quả
- Đọc kết quả theo bảng đọc và dùng các thuốc thử hiển thị
kết quả:
+ Thử TDA: cho 1 giọt thuốc thử TDA chuyển màu nâu đỏ là
dương tính.
+ Thử IND: cho 1 giọt thuốc thử JAMES phát triển màu hồng
trong ống thử là dương tính.
+ Thử VP: cho 1 giọt thuốc thử VP 1 và 1 giọt thuốc thử VP 2,
đợi ít nhất 10 phút chuyển màu hồng hoặc đỏ là dương tính.
Nếu chuyển màu hồng nhẹ sau 10 phút là âm tính.
+ Thử NO
2
: cho 1 giọt NIT 1 và 1 giọt NIT 2 vào ống GLU.
Đợi sau 2 - 5 phút chuyển màu đỏ là dương tính.
+ Đối với môi trường OF: Dùng que cấy đã được hơ nóng và
để nguội, lấy vi khuẩn và chọc thẳng vào ống nghiệm chứa
môi trường OF, nuôi trong tủ ấm 24 giờ và đọc kết quả.
 Phân loại
Dựa vào cẩm nang phân loại vi khuẩn của Buller (2005) và
Frerichs (1984)
Cảm nhiễm vi khuẩn lên cá khỏe
- Cá được kiểm tra vi khuẩn, nấm, ký sinh trùng có kết quả
âm tính trước khi tiến hành thí nghiệm
- Mỗi bể thí nghiệm là 10 con, cá khoẻ mạnh, kích cỡ đồng
đều, cá được nuôi thuần trước khi làm thí nghiệm 1 tuần.
- Mỗi loài vi khuẩn được tiến hành tiêm lặp lại 3 bể.
- Tiêm trực tiếp vào xoang bụng cá, với lượng 0,1ml hỗn
dịch vi khuẩn/cá thể cá, mật độ vi khuẩn 10
6

Thu mẫu, xử lý mẫu
Phân loại, định danh vi
khuẩn

Cảm nhiễm vào cá
khoẻ

Thu số liệu, xử lý số
liệu

Viết báo cáo
Bảo vệ báo cáo