Câu 7: phương pháp bảo quản và sử dụng vacxin.
A, phương pháp bảo quản.
Vacxin đc sx từ vk giứ ở 2-5
o
c
Vd: vacxin tụ dầu bảo quản 5-15
o
c /9 tháng
Vacxin phó thương hàn lợn 2-10oc/ 18 tháng
Vacxin đc sx từ virus:
Vd: vacxin ở dạng nước trứng giứ ở âm đến -86oc
Vacxin ở dạng đông khô:2-10oc
(phương pháp đông khô : làm lạnh huyền dịch vsv nhanh đến -70oc. Nâng nhiệt
độ trong điều kiện chân ko làm các tinh thể băng thăng hoa tế bào tách khỏi
nước mà ko tiếp xúc với không khí sẽ tồn tại mà ko bị chết.
b. sự dụng vacxin:
+. Nguyên lý sd vacxin: khi đưa vacxin vào cơ thể động vật , kN có trong vacxin
kích thích hệ thống MD của cơ thể hoạt động đến một đáp ứng MD tế bào sản
sinh KT dịch thể đặc hiệu hoặc kT tế bào.
Khi mầm bệnh từ ngoài sâm nhập sẽ bị các KT đặc hiệu tiêu diệt .
Thực tết cho thấy dùng vacxin phòng bệnh cho người , đv là biện pháp cơ bản ,
chủ động nhất để khống chế tiến tới thanh toán bệnh truyền nhiễm.
+. Quy luật hình thành kháng thể dịch thể đặc hiệu.
Khi kN xâm nhập vào cơ thể , KT chưa sinh ra ngay lập tức mà phải sau một thời
gian tiềm tàng . thời gian này dài hay ngắn phụ thuộc nhiều vào KN vào lần
KNxâm nhập vòa cơ thể lần đầu tiên hay lần 2,3… sau đó KT mới đc sinh ra
lượng KT tăng dần đạt mức cao nhất sau 2 -3 tuần sau đó gảm dần và biết mất
sau vài tháng ,vài năm.
+. Nguyên tắc sd vacxin:
-, tiêm phòng vacxin trên phạm vi hợp lý , đạt tỉ lệ cao, tỷ lệ tiêm phòng càng cao
càng tốt , nói trung phải đạt 80% vùng uy hiếp phải đạt 90-95%

Nặng hơn đại tiện tiết ko kiểm soát , sùi bọt mép , niêm mạc tím tái
Can thiệp: đưa vào nơi yên tĩnh thỉnh thoảng xoa bóp vùng ngực , dung
thuốc kháng histamine ,truyền dịch.
+ sd vacxin ở một số trường hợp đăc biệt :
• Vacxin với trẻ đẻ non:
Viện hàn lâm y khoa Mỹ khuyến cáo có thể dung vacxin khi trẻ 2 tháng
tuổi
Có nước quy định dung vacxin khi trẻ đạt trọng lượng từ 3kg trở lên
+ vacxin với bệnh rối loạn thần kinh :ko dung vacxin với trường hộp rối loạn thần
kinh trẻ nhỏ có tiền sử co giật cẩn trọng khi dùng vaxin đặc biệt vối vacxin ho gà
Mande khuyên nên bất đầu dung ¼ liều và dùng them thuốc chống co gật nếu
dung nạp tốt tăng dần liều và tiêm đủ liều ở liều thứ 3
+ vacxin với bệnh AID: ko dung vacxin BCG, vacxin nhược độc . trẻ có huyết
thanh dương tính với HIV ko dung vacxin BCG chỉ dung vacxin vô hoạt.
Cau8: kháng thể lòng đỏ :
• Kháng thể lòng đỏ là trong long đỏ trứng gia cầm co KT dịch thể đặc hiệu
(IgG)
• Kháng thể tạo ra = phương pháp này MD cao cho đv
• Động vật hay sd để chế Kt lòng đỏ là gà
• Vd:KT lòng đỏ kháng virus gumbono
KT …………………… viêm gan vịt
KT ……………….mycoplasmagalisiptium
Quý trình sản xuất KT lòng đỏ
Gây MD cao cho gà đẻ thu trứng mổ trứng thu lòng đỏ
pha loãng lòng đỏ với dung môi kiểm tra vô trùng , kiêm tra hiệu lực
kiểm tra an toàn đóng chai bảo quản ở -20
o C

Câu 9: quy trình cơ bản sx vacxin trên môi trường tb sơ phôi gà :
A, tách tb fibroblast phôi gà = tripsin háo :

• kiểm tra các chai gây nhiễm virus soi trên kính hiển vi thấy tb huy hoại có
tròm bong khỏi thành chai
• thu vacxin
thời gian thu tùy loại virus
dung tay lắc mạnh chai tb bong hết khỏi thành chai
bảo quản trong nhiệt độ -20oc
kiểm tra các chỉ tiêu vacxin .
câu 10: quá trình sản xuất kháng huyết thanh dại:
KHT dại đc sx từ HT của ngựa đã đc gây MD – virus dại cố định ở dạng dung
dịch hoặc dạng đông khô.
Sản xuất kháng huyết thanh dại gồm những bước sau
Bước 1:gây MD cao cho ngựa :
• gây MD cơ sở dùng KN là virus dai vô hoạt
• gây MD cao dùng vacxin dại nhắc lại
bước 2: lấy máu để thu huyết tương :
• khi huyết thanh ngựa có nồng độ KT dại đạt 100UI/ml lấy máu cho chất
chống đông vào KS rồi loại bỏ hồng cầu thu huyết tương
bước 3: tiêu hóa huyết tương pha loãng huyết tương 2-3 lần để nhiệt độ 30oc
điều chỉnh PH them tripsin
bươc 4: quá trình tinh chế :
• làm biến tính bằng nhiệt để loại bỏ fibrin , albumin , mảnh Fc
• đun nóng 57-59
o
c them ammonium sulphats :15%[(NH
4
)
2
SO
4
] lọc loại bỏ

Nguyên lieu tương tự nhóm máu A nhỏ hơn 4ng/ml
Công hiệu lớn hơn 200ml/ml
Kết luận đạt
Câu 11:quy trình sản xuất vacxin bại liệt cổ:
Sản xuất trên môi trường lớp tb thận khỉ tiên phát , tb thận khỉ đc lấy = phương
pháp tripsin hóa.
Cụ thể:
• a, tách tb thận khỉ = phương phap truyền dịch
khỉ dùng cho sản xuất là giống Maccaca muldatta, trong lượng 2-3kg ,
tuổi 2-2,5
ko có virus ngoại lai SV40. SIV.STLV, ko có kháng thể polio cách ly
kiểm dịch 6 tuần
b, mổ lấy thận (vô trùng) gây mê sâu = ketamin liều 10-20ml/kg ,cắt
đọng mạch cổ , tắm = xà phòng và cloramin , lột da bụng , mổ bộc lộ
thận , bóc tách thận , đảm bảo ko gây tổn thương nhu mô thận
bảo quản thận trong bình có 100ml môi trường LHE hoặc hanks ủ ấm
37oc
c, tripsin hóa : đặt thận vào đĩa petri
• luồn kim vào đọng mạch thận , truyền dịch vến ,150ml
• 200ml vào với tốc độ 15-20ml/phut .đẩy máu động mạch trong nhu mô
• Truyền 150-200ml dung dịch tripsin cho tới khi thấy dịch chảy ra ngoài
nhơt , nhu mô thận xuất hiện vết nứt, cho thận vào bình chứa 80-100ml
LHE , lắc nhẹ đến khi môi trường hóa đục
• Hỗn dịch tb đc giữ lại trong bình 100-150ml huyết thanh bê và giữ trong
lạnh
• Tiếp tục tripsin hóa cho đến khi nhu mô thận tan hết
• Hỗn dịch tb đc cho them LHE vừa đủ 1000- 1500ml sao cho nông đọ
huyết thanh bê đạt 10% , bảo quản lạnh 4-8
o
c đến khi nuôi cấy

tăng C/D 50ml
Pha loãng với LH
3
E với khối lượng cần thiết .
• Rửa tb :
• Loại bỏ hết môi trường trong chai tb nuôi
• Cho vào mỗi chai 100ml hanks láng qua , lắc nhẹ hut hết dịch rửa hanks
• 25% số chai tế bào chọn ngẫu nhiên làm đối chứng
• Gây nhiễm : cho vào mỗi chia 3ml hỗn dịch giống virus = bơm kim tự động
láng đều hỗn dịch virus lên bề mặt tế bào .
• Hấp thụ virus : toàn bộ số chai tb gây nhiễm và chai đối chứng được để ở
33,5
o
c /1h
Cứ 15 phút láng nhẹ 1 lần hỗn dịch virus trên toàn bộ bề mặt chai tb .
• Bổ sung môi trường : cho vào mỗi chai 110-120ml LHE nuôi ở 33,3
o
c theo
dõi sự hủy họa tb . những chai đã thu hoạch trên 80% tbao bị hủy họa vào
mức CPE
3
+ đến 4+ .
• Thu hoạch vacxin :
Thu vacxin đúng quy định sẽ mang lại hiệu quả cao nhất trong sản
xuất .
• Kiểm tra tbao đối chứng : môi trường vàng cam , trong suốt tbao ko
bị thoái háo , bán đều khắp bề mặt trên.
• Kiểm tra các chai gây nhiễm virus : môi trường có màu vàng sẫm
trong suốt soi trên kính hiển vi thấy tbao hủy hoại ,có tròm bong
khỏi thành chai : 3+ : hầu hết tb thoái hóa . 4+: tbao bong hết