Hedyotis biflora Thực nghiệm4. TRÍCH LY, CÔ LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT HỮU CƠ
4.1. Hóa chất
¾ Dung môi dùng trong sắc ký cột và sắc ký điều chế, sắc ký lớp mỏng gồm: eter
dầu hỏa (60
o
C - 90
o
C); benzen; cloroform; acetat etyl; aceton; metanol và etanol
đều là hóa chất Trung Quốc và được làm khan bằng Na
2
SO
4
nếu sử dụng lại.
¾ Thuốc thử: để hiện hình các vết hữu cơ bằng sắc ký lớp mỏng, phun xịt bằng
dung dịch acid sulfuric 50%, soi đèn UV hoặc dùng hơi iod.
¾ Silica gel 60G F
254
loại dùng cho sắc ký lớp mỏng, Merck.
4.2. Thiết bị
¾ Các thiết bị dùng để ly trích (lọ thủy tinh, becher).
¾ Máy cô quay chân không Buchi –111 kèm bếp cách thủy Buchi 461 Water Bath.
¾ Cột sắc ký: cột khô, cột cổ điển.
¾ Sắc ký lớp mỏng 25DC – Alufolien 20 x 20 cm Kieselgel F
254
Merck.
¾ Thiết bị đo nhiệt độ nóng chảy khối Maquenne.
¾ Các thiết bị ghi phổ:

trong bình thủy tinh có nắp đậy trong vòng
24 giờ. Sau đó lọc phần dịch trích, cô quay và thu hồi dung môi. Tiếp tục thực hiện
nhiều lần, thu được cao etanol (112,0 g).
Dùng phương pháp trích pha rắn silica gel đối với cao etanol, giải ly lần lượt
bằng các đơn dung môi từ không phân cực đến phân cực: eter dầu hỏa (60-90
0
C),
benzen, cloroform, acetat etyl và metanol. Dung dịch thu được từ cột đem cô quay,
thu hồi dung môi ở áp suất kém thu được các cao: cao eter dầu hỏa, cao benzen, cao
cloroform, cao acetat etyl, cao metanol.
4.4. Cô lập các hợp chất
Tiến hành sắc ký cột (nhanh cột khô, cổ điển) các loại cao trên, sau đó sắc ký
cột và sắc ký điều chế nhiều lần trên những phân đoạn được chọn để cô lập các hợp
chất. Toàn bộ quá trình trên được theo dõi bằng sắc ký lớp mỏng với thuốc thử hiện
hình là dung dịch acid sulfuric 50%, soi đèn UV hoặc hơi iod.
Trần Văn Thắng Trang
68