SEMINAR
SҲC KÝ LӒNG HiӊU NĂNG
CAO(HPLC)
CÁC PP PHÂN TÍCH HÓA LÝ
TRƯӠNG ĐҤI HӐC BÁCH KHOA TP. HӖ CHÍ MINH
KHOA KӺ THUҰT HÓA HӐC
GIÁO VIÊN HƯӞNG DҮN:
TiӃn sĩ NguyӉn Thӏ Lan Phi
SINH VIÊN THӴC HIӊN:
1. Bùi Tài
2. Phan Kim Anh
3. Trҫn Thӏ Ngӑc
4. Phan Thӏ Thiên Trang
5. Đӛ Đһng Thuұn
6. HuǤnh Thӏ Mai Trang
7. Phҥm Thӏ Hoàng Oanh
I.Giӟi thiӋu kӻ thuұt sҳc ký lӓng
Chҩt hӳu cơ khó bay hơi??
Quá trình tách
y Quá trình tách dӵa vào
tính chҩt hóa hӑc, vұt
lý và hóa lý cӫa các
chҩt.
y Dӵa trên 2 quá trình:
+Hҩp phө
+Giҧi hҩp phө
Pha tĩnh
Pha đӝng
Phân lo̹i HPLC dΉa b̻n ch̽t tương tác:
 Sҳc ký phân bӕ (partition chromatography)
 Sҳc ký hҩp phө hoһc lӓng-rҳn (adsorption or liquid-

Degasse
Pump
Tiím
mүu
Column
Detector
II. HӋ thӕng H L
 Loҥi bӓ hoàn toàn khí hòa tan và
cһn trong dung môi ( tránh làm hӓng
cӝt sҳc ký hay nhiӉu đưӡng nӅn, tҥo
ra các Peak tҥp trong quá trình phân
tích và ҧnh hưӣng đӃn chҩt lưӧng
detector.
 Trang bӏ các loҥi valves tӹ lӋ
(proportionating valves) cho phép
đưa dung môi tӯ hai bình chӭa vӟi
các lưu lưӧng thay đәi liên tөc
1. Bình đ͹ng dung môi
2. Bӝ khӱ khí (Degasse)
-Mөc đích cӫa bӝ khӱ khí nhҵm loҥi trӯ các bӑt nhӓ
còn sót lҥi trong dung môi pha đӝng.
-NӃu trong quá trình phân tích mà dung môi pha đӝng
còn sót các bӑt khí thì mӝt sӕ hiӋn tưӧng:
-Tӹ lӋ pha đӝng cӫa các đưӡng dung môi lҩy không
đúng sӁ làm cho thӡi gian lưu cӫa P
ak thay đәi .
- Trong trưӡng hӧp bӑt quá nhiӅu bӝ khӱ khí không
thӇ loҥi trӯ hӃt đưӧc thì có thӇ pump sӁ không hút
đưӧc dung môi, khi đó áp suҩt không lên và máy sҳc
ký sӁ ngӯng hoҥt đӝng .

6. Detector( đҫu dò)
y ThiӃt bӏ phát hiӋn chҩt phân tích
(đӏnh tính và đӏnh lưӧng).
y Có nhiӅu loҥi detector khác nhau,
tùy mөc đích phân tích và tính chҩt
cӫa các chҩt cҫn phân tích mà ngưӡi
ta sӱ dөng loҥi detector phù hӧp.
7. Bͱ phͅn ghi tín hi͟u và in k͗t
qu̻
y ĐӇ ghi tín hiӋu phát hiӋn
do detector truyӅn sang.
y Trong các máy thӃ hӋ cũ
thì sӱ dөng máy ghi đơn
giҧn có thӇ vӁ sҳc ký đӗ,
thӡi gian lưu, diӋn tích cӫa
Peak ,chiӅu cao «
Degasse
u p
ií
ү
ol n
Dete to
Ngu ên lý hoҥt đӝng cӫ a HPL
III. CHӐN ĐIӄU KIӊN SҲC KÝ
y Muӕn có mӝt kӃt quҧ tách tӕt nhҩt ta phҧi tìm đưӧc các
điӅu kiӋn sҳc ký tӕt nhҩt cho mӝt hӛn hӧp mүu.
y Các điӅu kiӋn đó bao gӗm :
y Pha tĩnh : - Loҥi pha tĩnh
- Kích thưӟc cӝt
y Pha đӝng

Dùng đӇ tách các chҩt không phân cӵc, ít phân cӵc ,các chҩt
phân cӵc có thӇ tҥo cһp Ion .Trên bӅ mһt hoҥt đӝng các
nhóm OH đã bӏ Alkyl hóa. Vì thӃ nó ít phân cӵc hay phân
cӵc rҩt ít .
CHӐN ĐIӄU KIӊN SҲC KÝ
2. Lӵa chӑn pha đӝng
y Pha đӝng có thӇ làm thay đәi :
+ Đӝ chӑn lӑc E
+ Thӡi gian lưu
+ HiӋu năng tách cӫa cӝt
+ Đӝ phân giҧi
+ Tính đӕi xӭng cӫa Peak
CHӐN ĐIӄU KIӊN SҲC KÝ
Lӵa chӑn pha đӝng
+ Pha đӝng phҧi trơ vӟi pha tĩnh đã có. Không đưӧc làm cho
pha tĩnh bӏ biӃn đәi hóa hӑc . ( vd giá trӏ pH : 2.5< pH <8.5)
+Pha đӝng phҧi hòa tan đưӧc các chҩt phân tích thì mӟi rӱa
giҧi đưӧc chúng.
+ Pha đӝng phҧi bӅn vӳng theo thӡi gian.
+ Phҧi có đӝ tinh khiӃt cao.
+ Phҧi phù hӧp vӟi loҥi Detector :
Vd: UV - VIS thì dung môi không đưӧc hҩ p thө quang
Detector huünh quang thì dung môi không đưӧc phát
quang.
+ Phҧi kinh tӃ , không quá hiӃm và đҳt
vd: Thêm nưӟc vào dung môi hӳu cơ tҥo thành mӝt pha
đӝng phân cӵc hơn chҩt hӳu cơ nguyên mӝt mình nó .Vd
thêm nưӟc vào ACN hay MeOH SӁ tҥo đưӧc pha đӝng
phân cӵc hơn nó
CHӐN ĐIӄU KIӊN SҲC KÝ