MỤC LỤC

Phần I . Mỏ BAU.................................................................. 1

Phân II.TổNG QUAN TAI

l iệ u

........................................................ 4

I . GA v à quá t r ì n h th ủ y phân b ộ t s ố n g ........................................................ 4
1 . 1 . Dại cuơng

quá t r ì n h t h ủ y phân t i n h b ộ t

v à GA.......................4

1 . 2 . Mối l i ê n quan g iũ a khả nảng bám và thủy phân b ộ t sống
cùa GA.............................................................................................................. 9

1 .3 .Phàn úng thuần nghich và chất úc chế GA thủy phân
b ộ t s ố n g ...........................................................................................................11
1 . 3 . 1 . GA x ú c t ắ c
1 . 3 . 2 . Chất ú c c h ế

ch o phản úng n g ư ộ c .......................................................11
GA t h ù y phân

b ộ t s ố n g ................................... 11

I I . s à n x u ấ t GA t ù v i s in h v ậ t ....................................................................... 14

v ậ t ............................................................................................. 27

I I .H ó a c h ấ t v à t h i ế t b i ................................................................................... 27
2 . 1 . Hóa c h ấ t .................................................................................................................... 27

2 . 2 . T h iế t b ị .......................................................................................................... 28
III.

Cấc phUòng pháp phân t í c h .................................................................. 28

3 . 1 . Đ i n g l ư ợ n g đư òn g khủ t h e o phương ph áp m i c r o - B e r t r a n d . 28
3 . 2 . Xác đ i n h hàm l ư ợ n g t i n h b ộ t t r o n g mẫu.......................................... 29

3 .3 .Xác định hiệu suất lên men e ta n o l..........................................29
3 . 4 . Xác đ i n h p r o t e i n t h e o phương pháp L o w ry ..................................... 29

IV .C á c môi tr u ồ n g dùng t r o n g n g h iê n c ú u ...............................................30

4 .1 . Môỉ trưòng Hansen.............................................................................30
4 . 2 . Môi trư ò n g M a r t i n . . . . .........................................................: .................30

4 . 3 . Môi tru ò n g C zapek......................................................................................31
4 . 4 . Môi t r ư ò n g cám t r ấ u s ả n x u ấ t e n z i m ................................................. 31
4 . 5 . Môi t r ư ò n g l ê n men e t a n o l ......................................................................... 31

V .C á c phưdng pháp x á c đ in h h o ạ t độ e n z im .............................................3 1

5 . 1 . Xác đ ịn h

h o ạ t
6 . 2 . Bảo quản c h e phẩm GA ................................................................................... 38
6

. 3 . Phương ph áp n g h i ê n cứu GA.........................................................................38

6 . 3 . 1 . T i n h s ạ c h GA..................................................................................................... 38
6

. 3 . 2 . N g h i ê n c ú u mọt s ố ctặc t í n h c ủ a GA...............................................40

6.4.PhucJng pháp n g h iên cúu c h ấ t úc chế GA thủy phân
b ộ t s ố n g .............................................................................................................. 42
6 . 4 . 1 . Xác đ ị n h h o ạ t độ kìm hãm c ủ a c h ấ t ú c c h ế .............................42

6 . 4 . 2 . Tinh sa ch tù n g phân c h ấ t úc c h ế ................................................42
6 . 4 . 3 . Một

số đặc t ín h cùa c h ấ t úc chế l i ê n quan (Jen

phàn úng thủy phân b ộ t sống của GA................................. .. . 43
6 . 5 . Tuyển chon cá c chừng nấm men lê n men e t a n o l ỏ
n h i ệ t ctộ c a o ...........................................................................................................45

6.5.1.
6

Sổ tu y ể n cấ c chủng nấm men lê n men ỏ 42 c ..................4 5

. 5 . 2 . So s á n h kh ả n ă n g l ê n men c ủ a c á c c h ù n g
t r o n g b ì n h S m i t h ...........................................................................................46

l ê n men ả q u i mô t h ử n g h i ệ m .............. 48

V I I - T ín h k ế t q u à ........................................................................................................ 49


_

Phần IV :KET QũẢ

I.Ph ần lậ p v à tuyển

v à thao

chpn cá c

4

-

LUẠN.................................................50

chủng nấm

S0 Ỉ sỉn h

trư ổ n g t r ê n m ô i trư ồ n g ch ú a b ộ t s ố n g .................................................50
1 . 1 . Phần l ậ p ..................................................................................................................50

1 . 2 . Tuyển ch ọ n .......................................................................................................50
II.


hóa thự c nghiệm th e o 2

nhân t ố . . . . ................68

2.2.4.BưỐc leo đốc t ố i điểm t ố i ÜU theo Box-Wilson.................. 70
I I I . L ụ a chọn ctỉểu k iậ n bâo quản ch ế phẩm G A .............................. 72
IV .N g h iê n cúu t i n h s ạ c h v à đ ặ c t í n h c ủ a GA....................................... 74
4 . 1 . T á ch t ù n g ph ần p h ầ n GA.................................................................................74

4 . 1 . 1 . Lựa chọn dung d ịc h c h i ế t r ú t ......................................................... 74
4 . 1 . 2 . Thấm dò đ iể u k iệ n k ế t tủ a e n z im ..................................................75


-

5

-

4 .1.3 .s ấ c

ký qua c ô t lo c g e l Sep h ad ex G -2 0 0 ................................. 76

4 .1 .4 .sẳ c

ký qua c ộ t CM S e p h a d e x C - 5 0 ................................................... 77

4 . 2 . N g h i ế n c ú u một s ố đ ặ c t í n h c ủ a GA-I v à G A - I I ........................ 81


sánh h iê u s u ấ t lê n men củ a cá c chùng ố 42

c ............ 10 0

V I I .L ê n men e t a n o l t r ự c t i ế p t ù b ộ t sắ n Bống.................................10 5
7 . 1 . Anh hưởng củ a lượng enzim ctến h iệ u s u ấ t lê n men............. 10 5
7 . 2 . Anh hường củ a lượng nấm men đến h iệ u s u ấ t lê n m e n . . . 10 8
7 . 3 . Ánh hứỏng cù a số lư ộng b ộ t s ẩ n sốn g cỉến

h iệ u s u ấ t lê n men.....................................................................................109
7 .4 .

N ghiến cửu ctọng học quá t r ì n h

k Ể t luận

lê n men e t a n o l ............. 1 1 3

Phần

V :

........................................................................... 1 1 7

Phần

VI: TAI LlỆU tham khao ............................................120


- 6 -


6 . T rung tâm n g h iê n cúu

v i s in h v ậ t

= GIA
hoc úng dụng

= TTNCVSVt

7 .T e tr a m e th y le th y le n e d ia m in e

= TEMED

8 .E t h y le n d in itr o tr ia c e tic a c id e

= EDTA


Phân I .
T ro n g số c á c sàn
chiếm v a i t r ò

M Ở

Đ A U

phẩm lê n

quan t r o n g đ ác

có t r i ể n vọn g cho tương l a i . C h ỉ

v â t liê u

nâng lilộ n g

r i ê n g tr o n g công

n g h iệ p thực

phẩm ,nhu cầu e t a n o l t r ê n th ế g i ó i ctã đ ạ t 9 t ỳ l í t [ 1 3 9 ] .
Thực t ế n ày đã th ú c cfẩy c á c nhà n g h iên cúu tìm kiếm nguồn
cơ c h ấ t mói cho

sả n

xuất

e ta n o l.

x e n lu lo z a đã cíạt cíuộc những

V iệ c

sà n

x u ấ t e t a n o l tù

k ể t quả n h ấ t cỉịnh


v à có g i á t r ị như

các

a x it

m e t io n in ) , v ỉ t a m i n ( B i 2 ,
p e n n ỉx ilin b a x y t r a x ln ) ,
cơ( a x e t ồ n , b u t a n o l) .T r ù

B e,

a m in ía x it

B z),

g lu t a m íc , l ỉ z i n ,

kháng

a x í t hũu cơ( x ì t r ỉ c ) ,
một số

ló n như B r a z in v à M ê h ic o , nguyên

nưóc có

s in h íte tr a x y lin ,
dung môi hữu


d ịc h hóà

phẩm ,khà năng sả n x u ấ t ỏ clây

enzira cần

b ộ t . cùng v ó i

l ý sản x u ấ t v à
được mỏ

t i ê u th ụ

sàn

rộ n g nếu

như

t i ế p nhận c á c t i ế n bô

nhắm hạ
cúu

n h iê n l i ê u ,

c h ỉ có th ể

c á c nưóc n ày có cfủ khả năng



dụng cù a nó v à h iê u s u ẩ t lê n men e t a n o l

cù a c á c chủng v i s in h

v ậ t sừ dụng.CÓ những n g h iê n cúu áp dụng

kỹ th u ậ t d i tr u y ề n để

tạ o r a c ấ c chủng
enzim clưòng hóa

v i s in h
v ù a lê n

v â t nhân

tạ o vùa

có khả nãng s in h

men e t a n o lc 1 5 , 1 6 ] .

Đ iểu đó v ù a t i ế t

kiêm đtlộc nguồn enzim v ù a đơn g ià n hóa

quá t r ì n h sàn x u a t.T u y

v ậ y , khâu hổ hóa t in h b ộ t chiếm 40% c h i

cíen n ay t r ê n th ế g i ố ỉ .m ộ t số

sàn x u ấ t v à

nưốc đã áp dụng

sàn x u ấ t

tù t in h

t ù t ỉn h b ộ t . Ke tù

bò n ày t r o n g sàn x u ấ t lố n như Nhật B àn ,
số nưóc khác áan g th u đuộc k ế t

tr o n g

khâu hồ hóa t ỉn h b ô t

r a t r i ể n von g

tr a n h mối t r o n g lê n men e t a n o l

bộ

t in h b ọ t không

bột nói

dẫn ctến ha

cũ cần p h ả ỉ hổ hóa t in h
đưoc úng dụng t a i

cơ

sỏ

sàn

x u ấ t khẩu hàng trăm ngàn tấ n ngũ cố c

c á c cơ sỏ sá n x u ấ t

th àn h

bộ nào
sàn x u a t

dẫn ctến hàng nễưn p h ả i

không qua chế b iế n tr o n g

khoáng 30 t r i ệ u

kéo th e o

chi

quỉ tr ìn h



hành
cúu sả n

tìl bột Ban
e t a n o l tr ự c

80 v ó i l ý

củ a chúng t ô i

th u y ế t.
nhắm tù n g

hưống t ỉ ể t kiậm năng
dẫn đến hạ g i á th àn h
phvc

v à mỏ

rộ n g sàn


-

Phần I I :

I

T ố N G

4 -


c á c mạch

a m ilo z a v à a m ilo p e c t ỉn cấu

g l u c o z a .T rong

mạch

được gấn v ố i nhau bầng l i ê n k ế t

tr o n g mạch a m ilo p e c t in c á c phân
v ó i nhau ờ v i t r í

« (1-4 )

và

a m ilo z a c á c phần tủ

ÍX

( 1 - 4 ) g l u c o z ỉ t , còn

tủ g lu c o z a l a i chlOc


vòi

cù a
GA

Mucor
tU

A.

g ly c o p r o t e in chíia c á c th an h

phần hydratcác bon chủ yểu l à m an o za, glucoza, g a l a c t o z a [ 8 4 ,8 5 ,
8 8 ] . Các th àn h phẵn p r o t e in v à h y d ra tc a c b o n
liề n k ể t g lu c o z it
amin như t r ê o n in

g iữ a c á c

và s ê rin [8 5 ].

bên h o ạ t t í n h GA mà còn l i ê n
khấ rõ r ê t . K h i

phân từ

l o ạ i bò

h y d ra tc a c b o n v à c á c a x i t

ô x y h ó a [7 0 , 8 3 ] .T heo
enzim

có

it

H iro m i,

n h ấ t h a i nhóm

c a c b o x y l , t r o n g k h i đó v a i t r ò cửa c ấ c io n kim l o ạ i v à c á c nhổm


- 9 -

s u l f i h y d r y l l a i không quan t r o n g v ố i h o ạ t độ cù a GA. K hi xủ l ý
v ố ỉ C N -,F - ,
1- 2 - M ố ỉ

EDTA t h ì hoạ.t ctộ enzim không b i ú c c h ế [ 8 5 ,8 8 ,9 6 ] .

X iê n quan

g iữ a kh à

năng th u ỳ

năng bám



những n g h iê n c ử ư

mói c h ì

đây.N hũng th àn h

tr o n g n g h iê n cúu úng dụng khả năng này l à
tr o n g

củ a nó

tựu

môt t i ế n bô cíáng kế

am ilazatllb'i.

về

T rong v i ê c p h ấ t h iệ n

khả năng th u ỷ

GA p h ả ỉ kể đến đóng góp cù a Y am asaki

phần b ọ t sốn g

cù a



10

-

v ố ỉ GA II.D ổ n g t h ồ ỉ c á c t á c g i ả [ 4 4 ,

116 ,

12 1,

g iũ a khà nãng

củ a GA I v à khả nãng bám củ a nó v à o b ộ t
bám v à th u ỷ phân m©,nh mẽ b ô t

awamori cũng

sốn g cao hôn n h iê u 80

cho th ấ y GA I có khả năng th u ỷ phân b ộ t

th ấ y cố môt mốỉ tướng quan

A.

[ 4 5 ,4 6 ] t r ê n

1 2 4 ] cũng nhận


GA

B .s u b t i l i s 3018. TÌẨ th-Uc nghiệm ¿ t a c g i ả nhận
phân tủ enzim có
g iú p cho enzim
t r ì n h th u ỳ phân

RhizowvcoríGO'i
46]

hai v ỉ
bám v ào
như l à

t r í chúc
b ộ t sốn g

năng khác
còn v ị

tru n g tầm

Amylomycesí 10 9 ] ,

tù

vi

khuẩn



làm sá n g

n g h iê n

cứu

GA

tr o n g

môi

A.awamori v à nhận th a y ra n g : enzim t ỉn h

ba dang

GA I,G A

I ' và

GA I I v ố i t r ọ n g lưong

phân tủ tương úng l à 9 0 .0 0 0 ,8 3 .0 0 0 v à 5 7 .0 0 0 . GA I có khả nảng
bám v à th u ỳ phân b ộ t sốn g m©.nh mẽ t r o n g k h i đó GA I

l ộ i không

có c ả h a i khả năng n à y .T á c g i à đã t i ế n hành th u ỳ phân g i ó i hạn
GA I v ố i

"thuý phân

b ộ t sa u hồ

hoá.Céic t á c g i ả khấc cũng dta.t chlöc k ể t quả tương tiA k h i n g h iên
cứu GA t ù

A .niger

cũng chúng minh
tổ n g hop

K-2711 8 ] .

đuoc ra n g

proteaza

về

mầt

d ỉ tr u y ề n học H a y a sh id a

A.fícum mất khả nầng

b iế n chủng

c h i tồ n t a ỉ một dạng


tạ o nên c á c l i ê n k ế t

« ( 1 - 6 ) g l u c o z i t g iữ a h a i phần từ g lu c o z a

không c h ỉ do v a i t r ò

củ a

dĩ

không chlộc

g lu co zíltra n a fera za ,b ò ỉ v ì k h ỉ th u ỳ phân vồ ỉ GA t in h k h iế t

sả n phẩm v ẫ n không

đạt tố i

cho phép nhân đ ỉn h rắ n g GA

múc độ th u ỳ
có th ể

đã

phân t r i ệ t

đ ể .D iề u đó

tham g i a v ào phàn úng


củ a

g iữ dung d ic h

sả n phẩm chúa
xuất

ta i

H an b arfo ed cũng không nhân

đưoc sà n phẩm

d ic h t ỉ n h b ô t( 30% -

v ố i chế phẩmG A [48].D o

40% )

cứu

Rhizopus endomyces ò

g lu c o z a 40% v ố i GA t in h sạ c h th u nhận t ù
55 C,pH 5 , 0 sa u 96 g i ò , t á c

tù các

2,2%


chế đặc

hiệu

trong trong moi hoeit đông sống
l&ỉ

trong v iệ c điều hoà cắc

chiếm

một

vi

tr i

th ì

quan trong kh

phàn úng enzim.Nhiêu hiên

tuơng bậnh

lý liê n quan đến chúc năng sinh học của một Bố enzim và khi đó
v iệ c sù dụng cấc chất úc

chế đặc hiệu


chỉ th\Ac sư thu

tù khi Umerawa tá ch duoc

ch ất úc chế pro teaza

(Trypsln)

khuẩn ClostrldiumC 119].

Nghiên cílu chất ùc

chế am:tlaza chịpc

b ấ t ctầu châm hơn k h i Murau
tù s .

hút ctưoc su chú ý kể

[ 7 5 ] t á c h đưoc

đ la s ta d ic v s 2476 v a U e d a [12 0 ] t á c h

tìl v i

c h ấ t úc chế

S P I-1



tù

dụng enzỉm

tiế p tù
bỉ úc chế

tượng n ày l ạ i không

tỉn h sạoh [1 2 6 ].Cho rấng
nào đó

có hoat tin h ÍẲC


-

13

-

t
c h ế , t ấ c g i ả đ ã t i ế n hành c ả c

bưốc t in h B&ch chế phẩm

t r a o đ ổ i lo n D EA E-Sephadex-A 25 r ổ i lọ c
ctưởc mồt c h ấ t có



phân b ộ t

cớ c h ấ t cũng làm giảm

khà năng

c h ế [ 9 1] .T iế p

n g h iê n cúu đến v i ệ c l\Aa chọn

ctó

các

tá c

g i ả ũfã hưống

c ấ c chủng có h o ạ t t in h úc chế v à

K19. Bang c á c bưbc tỉnhSẠ cỊi tưóng tự ,h ọ

glycoprotein

đã t á c h ctưoc một

quố t r ì n h th u ỷ

chế.Chất


l ạ i không g â y úc chế phán úng

th u ỳ phấn t ỉn h

hổ hoá v ố i G A [9 3 ].

Towmprayoon cho

rầ n g phần

t r ò quan t r ọ n g
tỉế n

chế n ày
hành

v à cơ chế
tạ i

Nhật


-

14

-

I I . SÀn xuất GA tà v i Binh vẬt.
Đăc điểm chung giũa lên men sàn xuất
lê n men v i s in h v â t khác

l à h iệ u s u ấ t

GA và các quá trìn h

c ủ a c ả quá

t r ì n h phv

thuôc vào ba yếu tố quan trọng : chùng giống v i sinh v â t,


năng s in h

trư ờ ng v à tổ n g hộp enzỉm c a o t r ê n môi trư ò n g đơn g ỉà n , r è t i ê n
có s ẵ n .T ổ n g hộp i t h a y không có g l u c o z i l t r a n s f e r a z a ,k h ô n g s in h
c á c (ẩôc t ố .N g o à i r a c á c c h ỉ t i ê u khác cũng cần đưộc đề cẬp đến

như chịu chlOc các tẩỉểu kiện bất l ộ i :n h iệt đô cao,

pH thấp,có

mật c á c chất chống n h i ễ m [ 2 1 ,9 4 ,9 6 ] .
Những n g h iê n cúu v ê

GA cho th ấ y

,h ầ u h ế t c á c

nhóm v i

s in h v ậ t ctều có khả năng tổ n g hộp GA như: v i khuẩn [ 2 3 , 5 0 , 5 9 ] ,
nấm m e n [ 1 1 5 , 1 1 7 , 1 2 5 3 ,

nấm mốc[ 4 6 , 6 4 , 1 2 1 , 1 2 2 ,

[ 4 0 ] , nấm b âc c a o [ 1 0 2 , 1 0 4 ] -Tuy n h iê n ,
th u ộ c c á c c h ỉ

A sp erg lllu s



sưu

tập

nhỉên hay


-

15

-

phân lâ p v à tu y ể n chon đưoc 5 chủng nấm s ô i
tù 76 chủng đang được bảo

cố h o ạ t độ GA cao

Cortlclum ro f e i l điiỢc

quàn.

co i là

chùng có h o ạ t độ GA cao v à khả năng th u ỳ phần b ộ t sống hôn hẳn
va

JRhizopus


A.sp

N-2 cò

tù b ô t

h o ạ t ctộ tương

cfilöng 1 1 4 đôn v ỉ/g a m k h ỉ lê n men xốp v à 14 đơn v ị / ml k h i lê n
men d ic h th ể .T u y n h iê n thực t ế sàn x u ấ t không th o à mãn v ố i c á c
chủng phân lậ p v à tu y ể n chọn

t ù tự n h iê n , v i ệ c nâng

s u ấ t v à c ả ỉ b iế n c á c ctăc t í n h sẵ n cố
nhò k ỹ t h u ậ t d i t r u y ề n l à b iệ n
thtfc t ế n ó ỉ t r ê n . K hi sủ

xạ

cũng th àn h

chọn được chùng đ ộ t b iế n

có

chủng l a i

dùng



5 lẫ n chủng g ố c .L i n [ 8 5 ]

chủng g ố c . K hi

củ a cố c chủng n g h iên cúu

pháp hữu h iê u ctáp úng

dung búc

K u nỉshim a [ 6 3 ] đ ã t ạ o được

cao h iê u

B a l l [8 8 ]
chùng gốc v ề

nhu cầu
ngoại

•,

độ cao gấp
đ ô t b iế n v ầ
lầ n so v ố i
đ ã ta o đưộc
h iệ u x u ấ t

triiớ n g .


l a i kém h ỉê u quả

hớn. Các phụ

phấm nông n g h iệp khấc nhu c á m ,trấ u cũng l à nguồn CÖ c h ấ t t h íc h

hop cho sàn xuất GA ỏ AspergilluslQñ] .
Hydratcacbon

không chỉ

cho s ỉn h trũ ỏ n g v à s in h enzim

mẽ trong những

áỉều kiên

h o ạ t độ GA tă n g k h i môi

hoà s in h tổ n g

Xiên kết a (1 -4 )g lu c o z it có vai

g â y cảm

cảm úng kích

cỏ c h ấ t cao phần tử



hộp GA.GA l à

cùa tế bầo,chx đưoc

ch ú a t ỉ n h b ộ t [ 7 1 ] . Nhìn chung c á c th àn h

đ i v à o t ế bào v à

cacbon và nãng lUOng

cù a chủng n g h ỉên cứu mà

c h ấ t càm úng t r o n g v ỉ ê c đ iề u

phẩm trao ctổi chất bậc hai

là nguồn

mạnh

có th ể

höp enzim t i ế p
đ ố i v ó ỉ tổ n g hộp

enzim ở B. lich en i forml s [ 20].
Các nguồn

n it ơ v à


T a n i l ạ i nhận th ấ y amon su n p h at làm tă n g h iệ u s u ấ t tố n g hộp GA
gấp ba lầ n so v ố l nguổn n it ơ

hữu cơ l à p e p to n [10 6 3 . V iệ c sủ

dung p h ố i hộp t h íc h hộp t ỳ l ệ amon su n p h at v à n i t r a t n a t r ỉ cho


w HC- "
17

k e t qua t o t hon

k h ỉ dùng

r iê n g r ẽ

tù n g l o ạ i

muối tr o n g sản

t xuât GA tù Aspergi 1Just 11 ] . Sunphat amon còn ảnh
trin h t i ế t enzim từ tế
th ấ y k h ỉ sả n x u ấ t

bào vào môi

ampdaza t il


Phốtpho chiếm v ị

t r í quan tr ọ n g

tr o n g c á c quá

tr ìn h

t r a o đ ố i c h ấ t c ù a t ế bào cũng như tổ n g

hộp enzim -Yamada nhận

th ấ y liiộ n g phốtpho

tù 0,05% đến 0 ,1% l à

th ich hộp cho quá
thành phân môi

tro n g

môi

trìn h

truòng

sinh
chủ



dạng iz o z im kh ác n hau . W atanabe

hộp

A. fo e lid e s ,pH t ố i t h ĩc h

đến h iệ u s u ấ t tổ n g hộp GA mà còn ảnh hưỏng

tù 2 0 đến 2 , 5 t h ì

duy t r ì t h ic h

ưu cho sụ

không thưòng xu yên đổng n h ất v ố i pH t h íc h
đ ố i v ố i một chủ n g. Chẳng han v ố i chùng

, các thông số môi

cho sản x u ấ t

không c h ỉ ảnh

hưỏng

đến t ỳ l ệ g iữ a c á c

nhận th ấ y ,k h ỉ pH


pháp lê n men xốp

d ịc h th ê .T u ỳ th u ộ c v ào chủng v ỉ s in h v ậ t
cơ c h â t v à đ iề u
hộp

k iệ n th\Ac

và sản xuất

t ế mà

GA nối

v à lê n men

dùng tr o n g sản x u ấ t ,

chọn mợt

phương pháp t h íc h

.

2.3.1.Phiiông pháp lên men xốp(solỉđ State fermentation).
Phương pháp lê n men xốp ctưộc Takam ine dtể x u ấ t ,mỏ

công nghiệp sân xuất

enzim


để dùng

cđ chất cao hdn 30

sàn x u ấ t enzim tù c á c
h&n

c á c phụ phẩm nông

n g h iệ p như c á m ,t r ấ u . Tuy n h iê n phuơng pháp này cũng bộc lộ một
Bố nhưoc điểm như tốn công và diện t i c h nhà xưỏng,d! nhiễm các
v i s in h v ậ t l a tr o n g sàn x u ấ t
th ô n g số môi trư ò n g

t ố i ư u,khó

đột

lố n v ố i cáo chủng

, khó ctỉều k h iể n v à duy
khăn k h ỉ

t r ì các

t r i ể n k h a i sàn x u ấ t

b iế n hay c á c chủng l a i mẫn cảm v ố i những



b ị lê n men

năm 1 8 9 1 [9 7 ]

.


-

Phướng pháp này có ưu th ê
cần ỉ t d iê n t í c h

19

-

hơn phương pháp lê n men

v à không

g ỉa n cho

t h i é t b i th u ầ n l ộ i cho đ iê u c h in h c á c
ưu tr o n g sà n x u ấ t ,

các

sàn x u ấ t


tù đưòng mói

g i ả i phóng

th àn h e t a n o l được th tlc h iậ n nhồ c á c v i s in h v ậ t chủ yếu như nấm
men

s

c e r e v is ia e ,v i

khuẩn

Zymomonass h ay

Công nghệ lê n men tù t in h b ộ t

đưoc t i ế n hành th e o

pháp chù y ếu l à Amylo v à M ycom alt.
3 . 1 . Phướng phấp A m ylo.

nám s o i

Rhizopus.
h a i phương