Đề tài Sinh học phân tử
Đề tài Sinh học phân tử

Nguyễn Thị Xuân Thảo

Nguyễn Thị Thúy Hằng

Nguyễn Thị Mỹ Thuận

Lê Thị Diệu Anh

Phan Hoàng Yến

Mai Văn Điểu

Trần Văn Thảo

Võ Hiệp
ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƯỢNG
ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƯỢNG
DNA
DNA

Định lượng của các axit nucleic là
thường được thực hiện để xác định nồng
độ trung bình của DNA hoặc RNA có
mặt trong hỗn hợp.

Ứng dụng của phương pháp
định tính, định lượng DNA được
dùng nhiều nhất trong lĩnh vực y

260nm
–
Optical Density
260nm
).
Một đơn vị OD ở bước sóng 260nm ký
hiệu là OD
260nm
.
OD
260nm
= 50µg/ml cho một dung dịch
DNA mạch kép
OD
260nm
= 40µg/ml cho một dung dịch
DNA mạch đơn hoặc RNA
Đ h p th ánh sáng c a các baseộ ấ ụ ủ
Công thức xác định hàm
Công thức xác định hàm
lượng DNA trong dung dịch
lượng DNA trong dung dịch

DNA mạch đôi
Hàm lượng ADN (µg/ml)= 50 x OD
260nm
x n
Trong đó :
OD
260nm :

cực đại của protein, nhưng các
protein cũng hấp thụ ánh sáng ở bước
sóng 260nm như các nucleic acid do
đó làm sai lệch giá trị thật của nồng
độ acid nucleic.
- Nếu tỉ lệ OD
260nm
/OD
280nm
= 1,8 – 2 thì có
thể xem dịch chiết DNA là tinh sạch.
-
Nếu tỉ lệ OD
260nm
/OD
280nm
> 2 thì dung
dịch chiết RNA là tinh sạch, dung
dịch DNA bị biến tính hoặc phân
hủy.
-
Nếu tỉ lệ OD
260nm
/OD
280nm
< 1,8 thì dung
dịch DNA,ARN có lẫn tạp chất.

Ưu điểm: Cho kết quả nhanh, độ
chính xác tương đối cao