Thực hành nuôi cấy mô thực vật - Pdf 10

THỰC HÀNH NUÔI CẤY MÔ THỰC VẬT Trang 1
MỤC LỤC

Bài 1. Phương pháp pha chế mơi trường ni cấy mơ thực vật 2
Bài 2. Phương pháp khử trùng mơ thực vật 7
Bài 3. Khử trùng ni cấy chồi ngủ cúc và hạt cam 11
Bài 4. Vi nhân giống dứa bằng ni cấy chồi ngủ 16
Bài 5. Phương pháp ni cấy tạo mơ sẹo ở thực vật 19
Bài 6. Kỹ thuật tạo áo bao hạt giống nhân tạo 24
Bài 7. Phương pháp tách và ni cấy đỉnh sinh trưởng 28
Bài 8. Phương pháp vi ghép ở thực vật 33
Bài 9. Phương pháp thuần hố cây ra vườn ươm 37
Bài 10. Kỹ thuật thủy canh cây trồng 40
TÀI LIỆU THAM KHẢO 43
THỰC HÀNH NUÔI CẤY MÔ THỰC VẬT Trang 2
BÀI I

PHƢƠNG PHÁP PHA CHẾ MƠI TRƢỜNG
NI CẤY MƠ THỰC VẬT
1 - NGUN TẮC
1.1 - Ngun tắc pha chế mơi trƣờng
Mơi trường ni cấy mơ thực vật khác với các loại mơi trường ni cấy vi sinh là
có thành phần rất phức tạp, sự hiện diện của rất nhiều loại hố chất với hàm lượng rất
nhỏ. Do vậy, để thuận tiện cho việc pha các mơi trường ni cấy (mơi trường làm việc),
người ta khơng cân hố chất mỗi lần pha mơi trường mà chuẩn bị trước dưới dạng nhiều
loại dung dịch với độ đậm đặc từ X10 – X100, chỉ cần pha với nước cất hai lần hay nước
vơ khống khi sử dụng. Các dung dịch này gọi là dung dịch mẹ (stock). Dung dịch mẹ
được bảo quản dài ngày trong tủ lạnh thường hoặc tủ lạnh sâu. Thơng thường pha các
dung dịch mẹ: stock đa lượng, stock vi lượng, Fe – EDTA, stock vitamin, stock chất sinh
trưởng, và các stock cần thiết khác.
1.2 - Phân loại mơi trƣờng ni cấy mơ thực vật

O
- KH
2
PO
4

- CaCl
2
.5H
2
O
THệẽC HAỉNH NUOI CAY MO THệẽC VAT Trang 3
- KI
- Na
2
MoO
4
.2H
2
O
- CoCl
2
.6H
2
O
- H
3
PO
3


3
2.2 - Dng c Thit b cn cho 1 nhúm (30 sinh viờn) thc hnh
STT
Tờn dng c, thit b
n v
tớnh
S
lng
Ghi chỳ
1
- Bỡnh nh mc: 100 ml
cỏi
10

2
- Bỡnh nh mc: 500 ml
cỏi
3

3
- ng ong: 100 ml
cỏi
12

4
- ng ong 500 ml
cỏi
3

5

- Pipett: 1 ml
cỏi
15

12
- Pipett: 5 ml
cỏi
15

13
- Pipett: 10 ml
cỏi
15

14
- Bỡnh nh mc 250 ml
cỏi
15

15
- ng nghim ị 25
ng
100

16
- Bụng m
g
200

17

- KH
2
PO
4

170
3.400
- KNO
3

1.900
38.000
- NH
4
NO
3

1.650
33.000
- CaCl
2
.2H
2
O
440
8.800
Mỗi lần cho một loại khống vào phải khuấy tan hồn tồn và bổ sung thêm
100 ml nước cất hai lần trước khi bổ sung các khống khác vào (phương pháp pha thể
tích tăng dần). Do CaCl
2

nồng độ đậm đặc hơn 100 lần so với dung dịch mẹ và gọi là dung dịch “bà ngoại”.
Sau khi pha song các dung dịch “bà ngoại”, tiến hành pha 100 ml stock
khống vi lượng X1000 tương tự như ở phần trên. Thành phần các khống như sau:

Tên hố chất
Nồng độ mơi
trƣờng ni cấy
(mg/lít)
Nồng độ dung dịch
stock (x1000)
(mg/lít)
Nồng độ dung dịch
“bà ngoại “(x100)
(mg/lít)
H
3
PO
3

6,2
6200

MnSO
4
.4H
2
O
22,3
22300


2500
CoCl
2
.6H
2
O
0,025
25
2500
4.3. Pha dung dịch mẹ Fe-EDTA nồng độ đậm đặc 200 lần (x200)
Sắt là yếu tố rất cần thiết cho thực vật. Tuy nhiên, nhu cầu của thực vật đối
với sắt rất nhỏ và lượng liên tục. Vì vậy, để cung cấp đủ lượng sắt cho thực vật ta thường
dùng sắt dưới dạng hợp chất Fe-DETA. Hợp chất Fe-EDTA được hình thành do sự ngậm
Fe của EDTA dưới tác dụng của nhiệt độ. Ở dưới dạng hợp chất này, sắt sẽ được phóng
thích ra mơi trường tuỳ theo nhu cầu của thực vật. Phương pháp pha như sau:

Tên hố chất
Nồng độ mơi trƣờng
ni cấy (mg/lít)
Nồng độ dung dịch stock
(x200) (mg/lít)
FeSO
4
.7H
2
O
27,8
5560
Na
2

BA pha trong NaOH 1N (thêm 2-3 ml NaOH 1N và lắc cho đến khi tan hết, sau đó thêm
nước đến thể tích cần). GA
3
,

2,4-D pha trong cồn 50
o
cho đủ thể tích.
Để pha các chất sinh trưởng, có hai cách khác nhau:
+ Cách 1: pha theo hệ mol
Ví dụ: Pha 100 ml dung dịch stock IAA (M=176,19) có nồng độ 1 mmol
(milimol) từ IAA tinh khiết.
176,19 g IAA pha trong 1000 ml nước 1000 ml dung dịch có nồng độ 1
mol/lít. Để pha dung dịch có nồng độ 1 mmol/lít cần 0,17619 g IAA. Như vậy, muốn có
100 ml dung dịch IAA nồng độ 1 mmol/lít cần 0,017619 g IAA. (MNAA: 186,2; M
2,4-D
:
221,04; MBA: 225,2)
+ Cách 2: pha theo hệ mg/lít: làm tương tự như cách pha khống.
Các dung dịch stock hormon sau khi pha song được bảo quản trong các
chai màu ở nhiệt độ lạnh 4-10
oC
.
4.5. Pha stock vitamin mơi trƣờng MS nồng độ đậm đặc 500 lần (x500)
Dùng ống đong, đong 50 ml nước cất hai lần vào một becher 100 ml. Bổ
sung các vitamin vào theo trình tự sau:

Tên hố chất
Nồng độ mơi trƣờng
ni cấy (mg/lít)

- Bổ sung 2 ml dung dịch stock vitamin x500.
- Bổ sung stock hormon với lượng tùy mục đích ni cấy.
- Chuyển tất cả dung dịch vào bình định mức, dùng nước cất chuẩn lại cho đủ
1000 ml
- Chỉnh pH của dung dịch bằng NaOH 1N hay HCl 1N về pH=5,8.
- Bổ sung 6-8 g agar.
- Đun sơi cho tan agar, quấy đều. Chia hỗn hợp mơi trường vào các bình ni
cấy, cần chia xong trước khi dung dịch mơi trường MS nguội xuống 50
oC
. Hấp khử trùng
(đối với các thành phần bị biến tính ở nhiệt độ cao sẽ được lọc vơ trùng và bổ sung vào
mơi trường sau khi hấp). Mơi trường sau khi hấp được bảo quản ở 25
oC
.
5 - BÁO CÁO THỰC HÀNH
1. Trình bày cách pha Skoog I, Skoog II và Skoog III.
2. Quan sát hiện tượng phản ứng khi pha stock Fe-EDTA. Giải thích.
3. Từ BA tinh khiết, trình bày cách pha 100 ml stock BA có nồng độ 100 mol/lít.
Biết MBA =225,2.
4. Cần bao nhiêu ml dung dịch stock IAA có nồng độ 150 mol/lít để pha mơi
trường làm việc có nồng độ IAA là 0,1 mol/lít.
THỰC HÀNH NUÔI CẤY MÔ THỰC VẬT Trang 7
BÀI 2

PHƢƠNG PHÁP KHỬ TRÙNG MƠ THỰC VẬT
1 - NGUN TẮC
Một thí nghiệm ni cấy mơ thực vật khác với một thí nghiệm ni cấy vi sinh
thường tiến hành trong một thời gian rất lâu dài. Với một thí nghiệm trường diễn như thế,
chỉ cần một tế bào vi khuẩn, một bào tử nấm mốc rơi vào mơi trường ni cấy, sau một
thời gian ngắn sẽ sinh sơi làm hỏng mơi trường, làm hỏng thí nghiệm và phải tiến hành

Tốt
Nước Brom
1 – 2
2 – 10
Rất tốt
HgCl
2

0,1 – 1
2 – 10
Trung bình
Chất kháng sinh
4 – 50
30 – 60
Khá tốt

Trong thời gian xử lý, mơ cấy phải ngập hồn tồn trong dung dịch diệt khuẩn. Đối
với các bộ phận có nhiều bụi cát, trước khi xử lý nên rửa kỹ bằng xà phòng bột và rửa
sạch lại bằng nước máy. Khi xử lý song, mơ cấy được rửa nhiều lần bằng nước cất vơ
trùng (tối thiểu là 3 lần). Những phần trên mơ cấy bị tác nhân vơ trùng làm cho trắng ra
cần phải cắt bỏ trứơc khi đặt mơ cấy lên mơ trường. Để tránh ảnh hưởng trực tiếp của các
tác nhân vơ trùng lên mơ cấy, nên chú ý để lại một lớp bọc ngồi khi ngâm mơ vào dung
dịch diệt khuẩn. Lớp cuối cùng này sẽ được cắt bỏ hoặc bóc đi trước khi đặt mơ cấy lên
mơi trường.
THỰC HÀNH NUÔI CẤY MÔ THỰC VẬT Trang 8
Như vậy, để có thể đạt được mục đích khử trùng (loại bỏ hết mầm vi sinh vật, mơ
thực vật có thể tăng trưởng, phát triển), thì việc khử trùng là phải tìm ra được ba yếu tố
liên quan chặt chẽ với nhau và liên quan tới mơ thực vật đem khử trùng đó là:
- Chất khử trùng
- Nồng độ chất khử trùng


2
- Lưỡi dao mổ
cái
15
Dùng lưỡi dao mổ nhọn
3
- Ống đong: 100 ml
cái
12

4
- Ống đong 500 ml
cái
3

5
- Đũa khuấy
cái
15

6
- Cốc 500 ml
cái
15

7
- Quả bóp cao su
cái
15


14
- Erlen 250ml
cái
60

15
- Kẹp dài 25 cm
Cái
15

16
- Bơng mỡ
g
200

17
- Ống nghiệm Þ25
cái
15

18
- Tủ cấy vơ trùng
cái
1
Tủ cấy có quạt thổi vơ
trùng

THỰC HÀNH NUÔI CẤY MÔ THỰC VẬT Trang 9
3 - NỘI DUNG THỰC HÀNH
Hình. Tủ cấy mơ thực vật
4.2 - Khử trùng hạt thuốc lá
- Thực hiện trong phòng thí nghiệm, rửa hạt thuốc lá dưới vòi nước máy.
- Lắc hạt với nước có pha một ít xà phòng.
- Rửa lại nhiều lần bằng nước máy cho sạch xà phòng
THỰC HÀNH NUÔI CẤY MÔ THỰC VẬT Trang 10
- Thực hiện trong tủ cấy, lắc hạt với cồn 70
o
trong 1 phút.
- Chiết bỏ cồn, ngâm hạt trong dung dịch Caxi hypoclorid 10% trong 5 phút.
- Rửa sạch dung dịch khử trùng bằng nước cất vơ trùng 5-6 lần.
- Gạn bỏ nước.
4.3 - Cách cấy mẫu
a. Mẫu cây Trầu bà
- Trong tủ cấy vơ trùng, những đốt cây Trầu bà đã khử trùng, được đặt trên giấy cấy
vơ trùng. Dùng dao mổ và kẹp tách các lá.
- Ở mỗi nách lá có mang một mầm ngủ. Dùng dao mổ cắt một đoạn mẫu có kích
thước khoảng 1x1 cm cấy vào mơi trường MS đã hấp khử trùng trong các ống nghiệm.
- Khi cấy mẫu cần chú ý cấy đúng chiều của thân. Các ống nghiệm được đặt trong
phòng lạnh nhiệt độ 25
oC
, cường độ ánh sáng 2500-3000 lux.
b. Mẫu hạt thuốc lá
- Hạt thuốc lá sau khi khử trùng, dùng kẹp đặt đều trên bề mặt mơi trường MS trong
các erlen. Khoảng cách giữa các hạt là 1cm.
- Các erlen được đặt ở nơi tối hồn tồn.
5 - BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH
1. Trình bày phương pháp khử trùng đốt thân Trầu bà, hạt thuốc lá.

trong ống nghiệm được tạo ra do việc ni cấy hạt giống.
Trong bài thực hành này, sẽ đề cập tới phương pháp nhân giống vơ tính thực vật qua
ni cấy chồi nách và tạo nguồn cây cho phương pháp ni cấy chồi nách từ hạt giống.
2- VẬT LIỆU –HỐ CHẤT – DỤNG CỤ
2.1 - Vật liệu
- Cây hoa cúc
- Hạt cam
2.2 - Hố chất
- Cồn 70
o
, 90
o
- Mơi trường MS bổ sung 2,4 – D
- Xà phòng bột
- Cồn 70
o
, 90
o
- Javel
THệẽC HAỉNH NUOI CAY MO THệẽC VAT Trang 12
- NAA
- BA
2.3 - Dng c Thit b cn cho 1 nhúm (30 sinh viờn) thc hnh
STT
Tờn dng c, thit b
n v
tớnh
S
lng
Ghi chỳ

7
- Qu búp cao su
cỏi
15

8
- Cc 1000 ml
cỏi
5

9
- Cc 100 ml
cỏi
30

10
- Cc 200 ml
cỏi
15

11
- Pipett: 1 ml
cỏi
5

12
- Pipett: 5 ml
cỏi
5


19
- ốn cn
cỏi
15

20
- T cy vụ trựng
cỏi
1
T cy cú qut thi khớ vụ
trựng

3 - NI DUNG THC HNH
- Sinh viờn tin hnh ct t thõn cỳc, thc hin xỏc nh cụng thc kh trựng. Nuụi
cy thõn cỳc trờn mụi trng MS b sung.
- Sinh viờn tin hnh kh trựng, tỏch v v nuụi cy ht cam trờn mụi trng MS.
4 - THC HNH
4.1 - Kh trựng v nuụi cy thõn cỳc ct t
a. Kh trựng
THệẽC HAỉNH NUOI CAY MO THệẽC VAT Trang 13
- La cõy cỳc cũn ti, non, lỏ ớt b dp. Dựng dao ct b hoa v gc. Ct ly mt
on cỏch gc 1015 cm.
- Ra sch on thõn cỳc di vũi nc mỏy.
- Ct thnh nhng on nh. Ct gia hai chi ng. Mi on cú mt chi ng.
- Lc cỏc on trong nc x phũng t 1015 phỳt.
- Ra sch x phũng di vũi nc mỏy.
- Lc vi cn 70
o
trong 1 phỳt.
- Lc vi dung dch javel/nc cỏc t l 1/9, 2/8, 3/7, 4/6, 1/1.

- Đặt ngang hạt cam trên mơi trường MS.
- Dùng kẹp đè nhẹ hạt lên bề mặt mơi trường sao cho ½ hạt nhập vào mơi trường
- Đặt bình ni cấy trong điều kiện ánh sáng 2000 lux, nhiệt độ 25
oC
.
5 - BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH
1. Phương pháp lựa chọn cơng thức khử trùng.
2. Tại sao phải tách vỏ ngồi (vỏ trấu), vỏ lụa hạt cam trước khi ni cấy?
THệẽC HAỉNH NUOI CAY MO THệẽC VAT Trang 15
3. Nu bỡnh nuụi cy ht cam trong iu kin khụng cú ỏnh sỏng, phụi cú ny
mm phỏt trin c khụng? Gii thớch?
THỰC HÀNH NUÔI CẤY MÔ THỰC VẬT Trang 16
BÀI 4

VI NHÂN GIỐNG DỨA BẰNG NI CẤY CHỒI NGỦ
1 - NGUN TẮC
Đối với một số cây như tre, mía, dứa, phương pháp nhân giống vẫn thường được sử
dụng hiện nay trong nơng nghiệp là nhân giống truyền thống bằng chồi nách, chồi ngầm,
thân ngầm, giâm hom… Tuy nhiên đặc điểm chung của các phương pháp này là hệ số
nhân giống thấp, khơng đáp ứng được nhu cầu về cây giống để mở rộng sản xuất.
Trước nhu cầu của việc mở rộng sản xuất, trong một số năm gần nay để nhân giống
dứa thường tiến hành bằng ni cấy chồi ngủ (phương pháp nhân cụm chồi). Ưu điểm
của phương pháp này là tốc độ nhân giống cao, hệ số nhân giống lớn.
Đặc điểm của phương pháp này là chồi ngủ được tách từ cụm chồi ngủ ở ngọn dứa,
sau đó được ni cấy tạo cụm chồi trên mơi trường in vitro. Các chồi có hình dạng giống
như vảy cá hoặc hạt gạo nằm ép sát vào thân (lõi), có màu trắng. Mỗi chồi được tách
riêng để ni cấy để tạo thành cụm chồi.
2 - VẬT LIỆU – HỐ CHẤT – DỤNG CỤ
2.1 - Vật liệu
Chồi ngủ được tách từ ngọn dứa dùng làm vật liệu ni cấy.

12

4
- Ống đong 500 ml
cái
3

5
- Đũa khuấy
cái
15

6
- Cốc 500 ml
cái
15

7
- Quả bóp cao su
cái
15

8
- Cốc 1000 ml
cái
5

9
- Cốc 100 ml
cái

14
- Erlen 250ml
cái
60

15
- Kẹp dài 25 cm
Cái
15

16
- Bơng mỡ
g
200

17
- Ống nghiệm Þ25
cái
15

18
- Giá ống nghiệm lỗ lớn
cái
15

19
- Đèn cồn
cái
15



THỰC HÀNH NUÔI CẤY MÔ THỰC VẬT Trang 18 Hình 1. Cắt các mặt có mang chồi ngủ từ cùi dứa
4.2 - Phƣơng pháp ni cấy
- Dùng dao mổ cắt những đường dọc, ngang tách rời từng chồi ngủ muốn lấy.
- Cắt vát 4 cạnh dưới của miếng mơ dứa có mang chồi ngủ tạo thành hình tháp.
- Cắm phần đầu hình tháp ngập vào mơi trường ni cấy.
- Đặt các bình ni cấy trong điều kiện ánh sáng 3000 lux, ở nhiệt độ 25
oC
.
4.3 - Phƣơng pháp tạo cụm chồi
Sau thời gian ni cấy từ 20-30 ngày các chồi được cấy chuyền sang mơi trường
ni cấy để tạo cụm chồi. Mơi trường ni cấy có nồng độ chất điều hồ sinh trưởng
NAA 1mg/lít, BA 0,1mg/lít. Sau 30-40 ngày, các chồi nhỏ xuất hiện ở phía gốc chồi. Số
lượng các chồi nhỏ tăng dần lên, sắp xếp chồng chất lên nhau thành một cụm chồi
(thường là sau 3-4 tháng ni cấy). Các chồi nhỏ được tách và chuyển sang mơi trường
tái sinh cây hồn chỉnh. Điều kiện ni cấy để tạo cụm chồi dứa: cường độ ánh sáng 4000
lux, thời gian chiếu sáng 10-14 giờ/ngày, nhiệt độ 25-27
0
C.
lá, trụ bì rễ, tử diệp… Cây tái sinh từ mơ sẹo có đặc tính giống như cây mẹ. Từ một cụm
tế bào mơ sẹo có thể tái sinh cho cùng một lúc cho nhiều chồi hơn là ni cấy đỉnh sinh
trưởng.

A B
Hình 3. Sự tái sinh chồi từ mơ sẹo. A: Mơ sẹo, B: Chồi tái sinh.
Mơ sẹo thường được tạo ra do những xáo trộn trong q trình tạo cơ quan, nhất là
trong sự tạo rễ. Do đó, cây non hay những mảnh thân non của cây trưởng thành dễ tạo mơ
sẹo. Ngược lại, những mảnh cơ quan trưởng thành khơng có khả năng tạo mơ sẹo. Sự tạo
mơ sẹo ở thực vật xảy ra khi mơi trường ni cấy được bổ sung một lượng auxin (2,4-D)
thích hợp.
Sự tạo mơ sẹo do tác dụng của auxin do 3 q trình:
- Sự phản phân hố của tế bào nhu mơ: xảy ra ở các tế bào nhu mơ mộc và libe, nhu
mơ vỏ hay lõi.
THỰC HÀNH NUÔI CẤY MÔ THỰC VẬT Trang 20
- Sự phân chia của các tế bào tượng tầng: các tế bào bào tượng tầng của phần lớn
cây hai lá mầm dễ dàng phân chia dưới tác động của auxin.
- Sự xáo trộn của các mơ phân sinh sơ khởi (chồi hay rễ).
2 - VẬT LIỆU – HỐ CHẤT – DỤNG CỤ
2.1 - Vật liệu
Hạt thuốc lá (Nicotiana tabacum) được gieo trên mơi trường MS. Sử dụng các cây

4
- Ống đong 500 ml
cái
3

5
- Đũa khuấy
cái
15

6
- Cốc 500 ml
cái
15

7
- Quả bóp cao su
cái
15

8
- Cốc 1000 ml
cái
5

9
- Cốc 100 ml
cái
30


16
- Bơng mỡ
g
200

17
- Ống nghiệm Þ25
cái
15

18
- Giá ống nghiệm lỗ lớn
cái
15

19
- Đèn cồn
cái
15

20
- Tủ cấy vơ trùng
cái
1
Tủ cấy có quạt thổi khí vơ
trùng

THỰC HÀNH NUÔI CẤY MÔ THỰC VẬT Trang 21
3 - NỘI DUNG THỰC HÀNH
- Học sinh tiến hành cắt đốt thân, mảnh lá, đoạn rễ cây thuốc lá để ni cấy tạo mơ

c. Cắt đoạn rễ
- Sau khi cắt các đoạn thân, lá, phần rễ còn lại được rửa sạch agar trong nước cất vơ
trùng.
- Dùng dao cắt rễ thành các đoạn nhỏ có kích thước 0,2 - 0,4 cm. Các đoạn này được
ni cấy tạo mơ sẹo.
THệẽC HAỉNH NUOI CAY MO THệẽC VAT Trang 22
Hỡnh 4. Phng phỏp ct mnh lỏ (A), t thõn (B), on r (C)
4.3 - Nuụi cy to mụ so
a. Nuụi cy thõn, lỏ
- Dựng kp gp cỏc on thõn mnh lỏ cy trờn mụi trng MS b sung 2,4-D.
- Khong cỏch gia cỏc on thõn, mnh lỏ l 1cm. Trỏnh cy quỏ dy.
- S dng mụi trng MS b sung 2,4-D cú nng l 1àmol/lớt mụi trng.
b. Nuụi cy on r
- Cỏc on r c nuụi cy trờn mụi trng MS b sung 2,4-D cú nng 0,1
àmol/lớt mụi trng.

Hình. Các giai đoạn nhân giống cây từ tái sinh mơ sẹo. A.Cảm ứng tạo sẹo, B.Mơ
sẹo tăng sinh, C. Tái sinh chồi từ mơ sẹo, D. Cây hồn chỉnh tái sinh từ mơ sẹo

5. BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH
1. Khái niệm mơ sẹo? Ngun nhân của việc hình thành mơ sẹo ở thực vật?
2. Vai trò của auxin đối với việc hình thành mơ sẹo ở thực vật. Nồng độ thích hợp
nhất kích thích tạo mơ sẹo từ thân, lá, rễ cây thuốc lá.
3. Phương pháp cắt đốt thân, đoạn rễ, mảnh lá để tạo mơ sẹo ở cây thuốc lá. THỰC HÀNH NUÔI CẤY MÔ THỰC VẬT Trang 24
BÀI 6

KỸ THUẬT TẠO ÁO BAO HẠTGIỐNG NHÂN TẠO
1 - Ý NGHĨA
Ở một số loại thực vật như mía, khoai tây, khoai mìm dâu tây đều khơng có khả
năng nhân giống bằng hạt. Bên cạnh đó có nhiều loại thực vật tạo được hạt giống nhưng
hạt giống kém chất lượng hay hạt giống rất đắt. Để giải quyết tất cả các vấn đề trên, một


Hình 6 - Cấu tạo hạt nhân tạo
Hạt nhân tạo thườmg có vỏ làm bằng alginat Na và alginat Ca hay B-hydrogel.
Alginat Na là một chất cao phân tử được chiết suất từ rong biển (rong Mơ
Sargassum sp là một loại rong nâu). Trong rong Mơ alginat Na tồn tại dưới dạng alginit
khơng tan là hợp chất của các axid manuronic. Để chiết tách alginat , thường tiến hành
nấu rong với Na
2
CO
3
.
[(C
5
H
7
O
4
COO)
2
Ca]
n
+ nNa
2
CO

O
4
COO)
2
Ca]
n
+ 2nNaCl
Alginat Na Alginat Ca
Ở dạng này, alginat Ca kết tủa, trở thành dạng khơng tan, tạo thành màng khơng thấm
nước. Tồn bộ bề mặt của gịot hỗn hợp trên sẽ được bao bọc bằng một lớp áo alginat Ca
khơng thấm nước và tạo thành một hạt. Phần alginat Na bên trong vẫn ở trạng thái tan.
Vỏ hạt nhân tạo được tạo ra theo ngun tắc này.
Hạt nhân tạo có thể bảo quản, tồn trữ và trồng trọt bằng những kỹ thuật canh tác
truyền thống. Và đặc biệt là có thể chủ động trong sản xuất, trồng trọt, canh tác khơng
phụ thuộc vào các điều kiện thời tiết, mùa vụ.
Trong bài thực hành này, chúng ta sẽ tìm hiểu kỹ thuật tạo áo bao cho phơi vơ tính
để cấu thành một hạt giống nhân tạo hồn chỉnh.
2 - NGUN LIỆU - HỐ CHẤT – DỤNG CỤ
2.1 - Ngun liệu, hố chất
STT
Tên hố chất, phụ liệu
Đơn vị
tính
Số
lƣợng
Ghi chú
1
Alginat Na 4%
ml
100


Nhờ tải bản gốc

Tài liệu, ebook tham khảo khác

Music ♫

Copyright: Tài liệu đại học © DMCA.com Protection Status