BÁO CÁO THỰC HÀNH MÔN CÔNG NGHỆ PROTEIN - ENZYME potx - Pdf 11


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280
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7
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0,056
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0,020
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41
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12
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42
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29
0,338


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(A)
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32
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0,112
18
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33
0,195
4
0,106
19
0,116
34

0,163
10
0,066
25
0,101
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0,208
11
0,002
26
0,096
41
0,099
12
0,005
27
0,088
42
0,133
13
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28
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280
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10
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11
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540
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540
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540
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14
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16
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


 





  

 


            

1. Dung dch thuc th Bradford 5X:
 Ethanol tuyi
(99,99%). B sung 100 ml axit phosphoric (H
3

2
O
ng chun:
Chun b mng nghim s ng Lng nghit theo bng sau:

ng nghim

1
2
3
4
5
6
 i
chng)
BSA t ch chu
100
100
100
100
100

0,125
0

Để tăng độ chính xác của đường chuẩn, tương ứng với mỗi nồng độ chuẩn BSA
nên lặp lại 3 lần (sử dụng 3 lần nhắc lại hoặc 3 ống nghiệm cho 1 lần).
Sau khi trng nghi trong ti  nhi 
kho hp th   ng
chun bng Excel s dng kt qu 
OD, trng protein. Tuy

t
ng eppendorf
1
2
3
4
5
6
H
2

420
450
460
950
*
**
N BSA g
60
50

dung dch BSA chun, lch protein cho ng nghim.
B sung 5 ml thuc th c ti
 th chu  OD.
 


c) Cách tính hàm lượng:
i chi c vng chun s
c n ng ca mu cng
 
5. D th ng chun:

OD
595
0.125
0.006
0.25
0.017
0.5
0.081
0.8
0.129
1
0.188
1.25
0.256



IV  Nh

MT1X
MC7



134383
134809
139489


281
1510
173


1,694
1,514
1,676

T bng tng ky:
- N c  t ln.
- N 
 n.


- m.
- Phn ng ca mi loi protein trong m

- SDS-PAGE (sodium     

-
--

-

-

-

--PA


21
-






-PAGE

III:

lang.
.
1. 
- 1,5 M Tris HCl pH 8,8

0,25 M, pH 6,8
SDS
0,6 g
1,2 g
6 %
Glycerol
4 ml
8 ml
40 %
Bromopjenol Blue 1%
0,4 ml
0,8 ml
0,04 %
H
2
O
8 ml
16 ml 22

 20
0
C.

4. 
- 10X SDS Laemmli Running Buffer (0,25 M Tris, 1.92 M Glycine, 1 %
SDS, pH 8,3).



8. 
- 10% SDS 10 g SDS/ 100 ml H
2

- 10% APS 10 g APS / 100 ml H
2

0
 IV :
- 
- 
-  23
1. 


V
Acrylamide (12 %)
H
2
O
(ml)
2,19
1,5 M Tris HCl pH 8,8

0,68
10 % APS
(l)
16
TEMED
(l)
8

ml
4,024 ml

 di protein:
- .
- 


- 

- .
- .

VI :
- Sau khi  
- .
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