Bài giảng công nghệ protein – enzyme chương 2 - Pdf 14

1
1
C
C
á
á
c phương ph
c phương ph
á
á
p thu nh
p thu nh


n protein
n protein
C
C
á
á
c phương ph
c phương ph
á
á
p chi
p chi
ế
ế
t r
t r
ú


t h
t h
ó
ó
a lý c
a lý c


a protein như đ
a protein như đ


t
t
í
í
ch
ch
đi
đi


n, k
n, k
í
í
ch thư
ch thư


t. Nhi


u protein còn liên k
u protein còn liên k
ế
ế
t v
t v


i c
i c
á
á
c phân t
c phân t


sinh
sinh
h
h


c kh
c kh
á
á
c nên vi

à
o b
o b


n ch
n ch


t c
t c


a c
a c
á
á
c liên k
c liên k
ế
ế
t.
t.
Mu
Mu


n thu nh
n thu nh


t c


t
t
í
í
nh ch
nh ch


t t
t t


nhiên đ
nhiên đ


c trưng c
c trưng c


a n
a n
ó
ó
,
,
c

2
Nhi
Nhi


t đ
t đ


Đ
Đ


t
t
á
á
ch c
ch c
á
á
c protein kh
c protein kh
á
á
c nhau d
c nhau d


a trên k


s
s


d
d


ng phương ph
ng phương ph
á
á
p bi
p bi
ế
ế
n t
n t
í
í
nh
nh
ch
ch


n l
n l



u c
u c


n lưu ý l
n lưu ý l
à
à
ch
ch


nên d
nên d
ù
ù
ng đ
ng đ


i v
i v


i trư
i trư


ng h


c gi
c gi




50
50
-
-
70
70
0
0
C
C
trong th
trong th


i gian x
i gian x
á
á
c đ
c đ


nh, s


i b
i b


b
b


ng c
ng c
á
á
ch l
ch l


c ho
c ho


c ly tâm.
c ly tâm.
Như v
Như v


y,
y,
d


c thu
c thu
nh
nh


n b
n b


ng c
ng c
á
á
ch cho k
ch cho k
ế
ế
t t
t t


a không thu
a không thu


n ngh
n ngh



Đ
Đ


thu nh
thu nh


n ch
n ch
ế
ế
ph
ph


m protein theo phương
m protein theo phương
ph
ph
á
á
p k
p k
ế
ế
t t
t t



n ti
n ti
ế
ế
n h
n h
à
à
nh
nh


nhi
nhi


t đ
t đ


th
th


p,
p,
đ
đ



t đ
t đ






i 0
i 0
0
0
C
C
tr
tr
á
á
nh bi
nh bi
ế
ế
n t
n t
í
í
nh đ
nh đ


á
c ch
c ch


t lư
t lư


ng t
ng t
í
í
nh, v
nh, v
ì
ì
v
v


y, trong c
y, trong c
á
á
c
c
dung d
dung d


m
Protein
Protein
-
-
COOH
COOH
Protein
Protein
-
-
COO
COO
-
-
+ H
+ H
+
+
acid
acid
acid
acid
Protein
Protein
-
-
NH2
NH2
Protein

c acid amin trong chu


i polypeptide còn t
i polypeptide còn t


n t
n t


i
i
nhi
nhi


u nh
u nh
ó
ó
m ch
m ch


c t
c t


do dư

nh đa đi


n c
n c


a protein. Phân t
a protein. Phân t


protein r
protein r


t
t
d
d
à
à
i nên nh
i nên nh
ó
ó
m ion t
m ion t


do t

y
ế
ế
u c
u c
á
á
c nh
c nh
ó
ó
m ch
m ch


c t
c t


do kh
do kh
á
á
c c
c c


a
a
chu


a phân t
a phân t


protein (nh
protein (nh
ó
ó
m cacboxyl c
m cacboxyl c


a amino acid, OH c
a amino acid, OH c


a
a
Tyrosine,
Tyrosine,
-
-
NH2 c
NH2 c


a lysine, guamidin c
a lysine, guamidin c


c nh
ó
ó
m n
m n
à
à
y ph
y ph


thu
thu


c v
c v
à
à
o gi
o gi
á
á
tr
tr


pH. C
pH. C
á

ó
m ki
m ki


m t
m t


n t
n t


i
i


d
d


ng cation trong môi trư
ng cation trong môi trư


ng
ng
acid
acid
6

c đ


nh, m
nh, m


i phân t
i phân t


protein c
protein c
ó
ó
m
m


t
t
đi
đi


n t
n t
í
í
ch t


a n
a n
ó
ó
ph
ph


thu
thu


c
c
v
v
à
à
o s
o s






ng c
ng c
á

ế
t qu
t qu


l
l
à
à


gi
gi
á
á
tr
tr


n
n


ng đ
ng đ


ion hydro c
ion hydro c


ó
t
t


ng đi
ng đi


n t
n t
í
í
ch
ch
kh
kh
á
á
c nhau. Nhi
c nhau. Nhi


u phương ph
u phương ph
á
á
p d
p d
ù


a v
a v
à
à
o đ
o đ


c t
c t
í
í
nh n
nh n
à
à
y. C
y. C
á
á
c phân t
c phân t

ửprotein mang đi
protein mang đi


u đ


y nhau ra xa nên d
y nhau ra xa nên d


tan v
tan v
à
à
o dung d
o dung d


ch. M
ch. M


i m
i m


t
t
protein c
protein c
ó
ó
m

t


ng s
ng s


đi
đi


n
n
t
t
í
í
ch âm v
ch âm v
à
à
đi
đi


n t
n t
í
í
ch dương trong phân t

đi


m đ
m đ


ng đi
ng đi


n c
n c


a protein.
a protein.
7
7
N
N


ng đ
ng đ


proton (pH)
proton (pH)
Đi

á
tr
tr


pH t
pH t


5
5
,6
,6
-
-
7
7
,0;
,0;
đ
đ


i v
i v


i c
i c
á

đ


i v
i v


i c
i c
á
á
c acid amin c
c acid amin c
ó
ó
t
t
í
í
nh ki
nh ki


m (diamino) l
m (diamino) l
à
à
t
t


hòa tan c


a protein l
a protein l
à
à
th
th


p nh
p nh


t, protein d
t, protein d


b
b


k
k
ế
ế
t
t
t

i ta c
ó
ó
th
th


t
t
á
á
ch t
ch t


ng
ng
ph
ph


n c
n c
á
á
c protein enzyme trong h
c protein enzyme trong h


n h

n c


a c
a c
á
á
c acid amin trung t
c acid amin trung t
í
í
nh c
nh c
ó
ó
gi
gi
á
á
tr
tr


pH t
pH t


5
5
,6

(dicarboxylic) l
à
à
t
t


3
3
,0
,0
-
-
3
3
,2;
,2;
đ
đ


i v
i v


i c
i c
á
á
c acid amin c


m đ
m đ


ng đi
ng đi


n,
n,đ
đ


hòa tan c
hòa tan c


a protein l
a protein l
à
à
th
th


p nh

o t
í
í
nh ch
nh ch


t n
t n
à
à
y,
y,
ngư
ngư


i ta c
i ta c
ó
ó
th
th


t
t
á
á
ch t

ng đ


proton (pH)
proton (pH)
gi
gi


ng như trư
ng như trư


ng h
ng h


p t
p t
á
á
c d
c d


ng c
ng c


a nhi

d
ù
ù
ng phương ph
ng phương ph
á
á
p bi
p bi
ế
ế
n t
n t
í
í
nh
nh
ch
ch


n l
n l


c nh
c nh


t

c gi




pH 5 trong th
pH 5 trong th


i gian x
i gian x
á
á
c
c
đ
đ


nh. Protein t
nh. Protein t


p b
p b


bi
bi
ế

á
ch l
ch l


c ho
c ho


c ly tâm. V
c ly tâm. V
í
í
d
d


citochrom C c
citochrom C c
ũ
ũ
ng tan trong
ng tan trong
acid trichloracetic trong khi đ
acid trichloracetic trong khi đ
ó
ó
acid n
acid n
à

y c
á
á
c protein b
c protein b


n v
n v


i acid c
i acid c
ó
ó
th
th

ểđư
đư


c t
c t
á
á
ch chi


c
c
C
C
ó
ó
th
th


d
d
ù
ù
ng mu
ng mu


i trung t
i trung t
í
í
nh ho
nh ho


c c
c c
á

p n
à
à
y
y
đư
đư


c ti
c ti
ế
ế
n h
n h
à
à
nh d
nh d


a tr
a tr


n cơ s
n cơ s


:

á
c c
c c


a c
a c
á
á
c nh
c nh
ó
ó
m t
m t
í
í
ch đi
ch đi


n
n
trong phân t
trong phân t


protein v
protein v



i l
i l
à
à
s
s


hydrate h
hydrate h
ó
ó
a) s
a) s


b
b


gi
gi


m xu
m xu


ng khi


i trung t
i trung t
í
í
nh.
nh.
Dung môi h
Dung môi h


u cơ thư
u cơ thư


ng d
ng d
ù
ù
ng l
ng l
à
à
etanol, isopropanol,
etanol, isopropanol,
acetone ho
acetone ho


c h

c nhân h
ó
ó
a h
a h


c
c
Khi s
Khi s


d
d


ng c
ng c
á
á
c dung môi h
c dung môi h


u cơ
u cơ
, c
, c



p
p
(t
(t


5
5
0
0
C tr
C tr


xu
xu


ng). D
ng). D
ù
ù
ng dung môi h
ng dung môi h


u cơ
u cơ
c

0
C v
C v
à
à
c
c
ó
ó
th
th


đ
đ
ế
ế
n
n
-
-
20
20
0
0
C,
C,
như v
như v



nh c
nh c


a
a
protein enzyme.
protein enzyme.
Khi đã c
Khi đã c
ó
ó
k
k
ế
ế
t t
t t


a, ch
a, ch
ú
ú
ý l
ý l


y nhanh k

y ly tâm l


nh.
nh.
12
12
T
T
á
á
c nhân h
c nhân h
ó
ó
a h
a h


c
c
C
C
á
á
c mu
c mu


i trung t

4
, Na
, Na
2
2
SO
SO
4
4
,
,
MgSO
MgSO
4
4
Tuy
Tuy
nhiên
nhiên
, n
, n




i ta đã nh
i ta đã nh


n th

t nh


t v
t v
ì
ì
n
n
ó
ó
không l
không l
à
à
m h
m h


i m
i m
à
à
l
l
à
à
m
m



i protein enzyme. Lo
i protein enzyme. Lo


i
i
mu
mu


i n
i n
à
à
y l
y l


i r
i r


ti
ti


n v
n v
à

r


t l
t l


n (b
n (b


o hòan 767g/l
o hòan 767g/l


25
25
0
0
C)
C)
n
n


ng đ
ng đ


(NH


a protein
a protein
enzyme kh
enzyme kh
á
á
c nhau th
c nhau th
ì
ì
kh
kh
á
á
c nhau
c nhau
.
.
13
13
T
T
á
á
c nhân h
c nhân h
ó
ó
a h


c
c


2 d
2 d


ng: d
ng: d


ng b
ng b


t v
t v
à
à
d
d


ng
ng
dung d
dung d


m


t v
t v
à
à
o d
o d


ch chi
ch chi
ế
ế
t protein enzyme. C
t protein enzyme. C
á
á
ch cho c
ch cho c
ũ
ũ
ng
ng


nh
nh



a protein
a protein
enzyme. Khi cho mu
enzyme. Khi cho mu


i v
i v
à
à
o d
o d


ch chi
ch chi
ế
ế
t c
t c


n ph
n ph


i c
i c
ó


hòa tan c
hòa tan c


a mu
a mu


i. Khi d
i. Khi d
ù
ù
ng
ng
dung d
dung d


ch b
ch b


o hòa, trong nhi
o hòa, trong nhi


u s
u s
á

nh s






ng mu
ng mu


i
i
c
c


n thi
n thi
ế
ế
t đ
t đ


pha c
pha c
á
á
c dung d


nh
nh


t đ
t đ


nh.
nh.
14
14
T
T
á
á
c nhân h
c nhân h
ó
ó
a h
a h


c
c
N
N
ế


n mu
n mu


i (NH
i (NH
4
4
)
)
2
2
SO
SO
4
4
(c
(c
ó
ó
n
n


ng đ
ng đ


bão hòa kh

n h


n h
n h


p protein enzyme.
p protein enzyme.Tuy nhiên,
Tuy nhiên,
đ
đ


phân chia ho
phân chia ho
à
à
n to
n to
à
à
n nh
n nh


ng h

ế
t qu
t qu


t
t


t v
t v
ì
ì
đ
đ


hòa
hòa
tan c
tan c


a m
a m


t s
t s


t t


a t
a t


ng ph
ng ph


n n
n n
à
à
y c
y c
ũ
ũ
ng r
ng r


t c
t c
ó
ó
l
l


n đ


u c
u c


a vi
a vi


c t
c t
á
á
ch chi
ch chi
ế
ế
t v
t v
à
à
l
l
à
à
m s
m s



t
t
ế
ế
b
b
à
à
o
o
Protein enzyme c
Protein enzyme c
ó
ó
trong t
trong t


t c
t c


c
c
á
á
c cơ th
c cơ th


Sau khi đư


c t
c t


ng
ng
h
h


p n
p n
ó
ó
c
c
ó
ó
th
th


đư
đư


c ti

c d


ch cơ th
ch cơ th


, d
, d


ch môi trư
ch môi trư


ng (g
ng (g


i l
i l
à
à
protein enzyme ngo
protein enzyme ngo


i b
i b
à

o (
protein enzyme n
protein enzyme n


i b
i b
à
à
o
o
).
).
16
16
Ph
Ph
á
á
v
v


t
t
ế
ế
b
b
à


i
i


d
d


ng
ng
hòa tan trong t
hòa tan trong t
ế
ế
b
b
à
à
o ch
o ch


t v
t v
à
à
c
c
á


c bao b
c bao b


c b
c b


ng m
ng m


t l
t l


p m
p m
à
à
ng.L
ng.L


p m
p m
à
à
ng

y.
Ngư
Ngư


i ta
i ta
còn th
còn th


y nhi
y nhi


u protein enzyme liên k
u protein enzyme liên k
ế
ế
t r
t r


t ch
t ch


t
t
ch

á
c phân t
c phân t


protein enzyme không c
protein enzyme không c
ó
ó
kh
kh


năng đi qua m
năng đi qua m
à
à
ng
ng
c
c


a t
a t
ế
ế
b
b
à

b
à
à
o.
o.
Do đ
Do đ
ó
ó
đ
đ


c
c
ó
ó
th
th


chi
chi
ế
ế
t r
t r
ú
ú
t c


i ph
i ph
á
á
v
v


c
c


u tr
u tr
ú
ú
c c
c c


a
a
c
c
á
á
c t
c t
ế

à
o dung d
o dung d


ch.
ch.
17
17
Ph
Ph
á
á
v
v


t
t
ế
ế
b
b
à
à
o
o
Protein enzyme c
Protein enzyme c
ó


c v
c v


t v
t v
à
à
vi sinh v
vi sinh v


t.
t.
Sau khi đư
Sau khi đư


c t
c t


ng
ng
h
h


p n

à
o t
o t


n t
n t


i
i
trong c
trong c
á
á
c d
c d


ch cơ th
ch cơ th


, d
, d


ch môi trư
ch môi trư



l
l


i
i
bên trong t
bên trong t
ế
ế
b
b
à
à
o (
o (
protein enzyme n
protein enzyme n


i b
i b
à
à
o
o
).
).
18

à
o c
o c
ó
ó
th
th


t
t


n t
n t


i
i


d
d


ng
ng
hòa tan trong t
hòa tan trong t
ế

ế
b
b
à
à
o. T
o. T
ế
ế
b
b
à
à
o đư
o đư


c bao b
c bao b


c b
c b


ng m
ng m


t l

n đôi khi r


t b
t b


n v
n v
à
à
d
d
à
à
y.
y.
Ngư
Ngư


i ta
i ta
còn th
còn th


y nhi
y nhi


à
o quan c
o quan c


a t
a t
ế
ế
b
b
à
à
o. C
o. C
á
á
c phân t
c phân t


protein enzyme không c
protein enzyme không c
ó
ó
kh
kh


năng đi qua m

a c
á
á
c b
c b
à
à
o quan c
o quan c


a t
a t
ế
ế
b
b
à
à
o.
o.
Do đ
Do đ
ó
ó
đ
đ


c

o,




c đ
c đ


u tiên l
u tiên l
à
à
ph
ph


i ph
i ph
á
á
v
v


c
c


u tr

a protein enzyme v
à
à
chuy
chuy


n
n
ch
ch
ú
ú
ng v
ng v
à
à
o dung d
o dung d


ch.
ch.
19
19
Ph
Ph
á
á
v

c
ó
ó
hi
hi


u qu
u qu


,
,


mô th
mô th


c v
c v


t,
t,
trư
trư


c khi nghi

v
à
à
o ngăn đ
o ngăn đ
á
á
ho
ho


c cho trương nư
c cho trương nư


c.
c.
(v
(v
í
í
d
d


như đ
như đ


i v

ng v


t như gan ho
t như gan ho


c th
c th


n, khi
n, khi
chi
chi
ế
ế
t protein enzyme ngư
t protein enzyme ngư


i ta c
i ta c


n c
n c


t b

à
o
o
Mu
Mu


n t
n t
á
á
ch đư
ch đư


c c
c c
á
á
c protein trong c
c protein trong c
á
á
c c
c c


u t
u t


ng c
á
á
c y
c y
ế
ế
u t
u t


v
v


t lý
t lý
v
v
à
à
h
h
ó
ó
a h
a h


c kh

ch


t t
t t


y (detergent). C
y (detergent). C
á
á
c h
c h
ó
ó
a
a
ch
ch


t t
t t


t cho vi
t cho vi


c ph

v
ì
ì
trong c
trong c
á
á
c cơ quan n
c cơ quan n
à
à
y thư
y thư


ng ch
ng ch


a m
a m


.
.
21
21
Chi
Chi
ế

á
c t
c t
ế
ế
b
b
à
à
o
o
ti
ti
ế
ế
n h
n h
à
à
nh chi
nh chi
ế
ế
t xu
t xu


t c
t c
á

d


ch mu
ch mu


i trung t
i trung t
í
í
nh ho
nh ho


c b
c b


ng nư
ng nư


c đ
c đ


i
i
v

b
à
à
o đ
o đ


i v
i v


i c
i c
á
á
c protein enzyme
c protein enzyme
ngo
ngo


i b
i b
à
à
o: vi
o: vi


c ch

o t
í
í
nh
nh
ch
ch


t c
t c


a protein enzyme c
a protein enzyme c


n nghiên c
n nghiên c


u.
u.
22
22
T
T
á
á
ch enzyme

nhi


u
u
trong cơ th
trong cơ th


s
s


ng. Vi
ng. Vi


c đi
c đi


u ch
u ch
ế
ế
ch
ch
ú
ú
ng b

ng l


n l
n l
à
à
vi
vi


c l
c l
à
à
m
m
r
r


t kh
t kh
ó
ó
khăn v
khăn v
à
à
đ

đi


u không tư
u không tư


ng, n
ng, n
ên ngư
ên ngư


i ta thư
i ta thư


ng thu
ng thu
nh
nh


n ch
n ch
ú
ú
ng t
ng t


t c


c
c
á
á
c cơ quan
c cơ quan
, mô c
, mô c


a đ
a đ


ng
ng
v
v


t th
t th


c v
c v


á
p
p


ng yêu c
ng yêu c


u v
u v


m
m


t
t
kinh t
kinh t
ế
ế
ch
ch


c
c
ó


t lư
t lư


ng l
ng l


n enzyme
n enzyme
c
c
ũ
ũ
ng như cho
ng như cho
ph
ph
é
é
p thu đư
p thu đư


c enzyme v
c enzyme v


i hi

23
T
T
á
á
ch enzyme
ch enzyme
Vi
Vi


c phân b
c phân b


c
c


a enzyme trong t
a enzyme trong t
ế
ế
b
b
à
à
o c
o c
ũ

ũ
ng c
ng c
ó
ó
th
th


c
c
ó
ó
nhi
nhi


u enzyme n
u enzyme n
à
à
y song không c
y song không c
ó
ó
enzyme
enzyme
kh
kh
á

ng ph
á
á
t tri
t tri


n c
n c


a sinh v
a sinh v


t v
t v
à
à
t
t
ù
ù
y
y
theo lo
theo lo
à
à
i nên ch

p cho vi


c chi
c chi
ế
ế
t r
t r
ú
ú
t v
t v
à
à
tinh ch
tinh ch
ế
ế
enzyme. C
enzyme. C
ó
ó
ba ngu
ba ngu


n nguyên li
n nguyên li


t, mô v
à
à
cơ quan
cơ quan
th
th


c v
c v


t, t
t, t
ế
ế
b
b
à
à
o vi sinh v
o vi sinh v


t
t
.
.
24


n g
n g


c đ
c đ


ng
ng
v
v


t th
t th
ì
ì
tuy
tuy
ế
ế
n tu
n tu


, m
, m
à


t thu
t thu


n l
n l


i. D
i. D


ch tu
ch tu


t
t


ng c
ng c
ó
ó
ch
ch


a amylase, lipase, protease, ribonuclease v

d
à
à
y bê ngh
y bê ngh
é
é
ngư
ngư


i ta c
i ta c
ó
ó
th
th


thu nh
thu nh


n ch
n ch
ế
ế
ph
ph


i ta c
ũ
ũ
ng s
ng s


n xu
n xu


t pepsin t
t pepsin t


d
d


d
d
à
à
y đ
y đ


ng v
ng v


à
không th
không th


y phân
y phân
sâu s
sâu s


c casein. Renin l
c casein. Renin l
à
à
ch
ch
ế
ế
ph
ph


m enzyme c
m enzyme c
ó
ó
gi
gi
á

c v


t:
t:
thông thư
thông thư


ng enzyme hay c
ng enzyme hay c
ó
ó
m
m


t
t


c
c
á
á
c
c
cơ quan d
cơ quan d


à
u ch
u ch


t g
t g
ì
ì
th
th
ì
ì
nhi
nhi


u enzyme chuy
u enzyme chuy


n h
n h
ó
ó
a ch
a ch


t

nhi


u lipase, trong
u lipase, trong
h
h


t đ
t đ


u tương c
u tương c
ó
ó
nhi
nhi


u enzyme urease.
u enzyme urease.
Th
Th
ó
ó
c n
c n



i c
i c
ó
ó
nhi
nhi


u
u
-
-
amylase
amylase
. N
. N




i ta đã thu đư
i ta đã thu đư


c
c
m
m


c v


t b
t b


c cao.
c cao.
Papain thu
Papain thu
đư
đư


c t
c t


m
m


u nh
u nh


a đu đ
a đu đ


á
, thân, qu
, thân, qu


) cây d
) cây d


a,
a,
còn fixin
còn fixin
đư
đư


c t
c t
á
á
ch t
ch t


d
d


ch


Nhờ tải bản gốc

Tài liệu, ebook tham khảo khác

Music ♫

Copyright: Tài liệu đại học © DMCA.com Protection Status