TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG
MẠCH TRẦN PHƯƠNG THẢO
TUYỂN CHỌN CHỦNG VI KHUẨN BACILLUS SPP. SINH ENZYME
CELLULASE, PHYTASE ĐỂ Ủ BÃ SẮN DÙNG TRONG CHĂN NUÔI
LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT
!"#$%&'%(%'
Hướng dẫn khoa học:
TS. Nguyễn Minh Trí
Khánh Hòa - Năm 2014
3
LỜI CÁM ƠN
)*) +,) ) /012)34.)5 6378
9 :;078<=)5 73+0>)0?9 @2)-A
B)C1798>3579=4D 5 E:79 3FG0HI
)*),) ) /012)J6K!)3>7 L0MN65 O="
)P:=Q7=R@)742ST)3#H/3U5 E:@9 )-E@GI
#) O)0#V-AB)C12)!W7)=U@BBX=" O)
3FG0/HI
M5 @)
! 3JL41Y
4
LỜI CAM ĐOAN
)*) 0= / #-)@8CHY3-E@G-39 7-
0R:J3=Z)[6) \Y*] C:;0)5 ,S^@@)
+ )/3_,S^ `B"a[IM5 @)0)-0) \S42)9
42ST `)Cb6K!)3>I
M5 @)
! 3JL41Y
)M6R)uv('w=",S^ C:;0@))@ESR0))!)34.7)
!)34.6): ]:r:J >N0*8;7]00h7@)
8;@2)>:+)Y) h -h7)BR@:+)Y)::h8eu7
=e ` OB"ah:41:/:`8CD: eBp0 / -):^
43i0E73h78-)7:h3-+7@)BR=m-0\ G )P I
Z)z"a-0hN\ G)S)S4Q BAF@-Dc
)60[) \Bc)6K_q+<+07d_vtw=4D B#
3: >j5 @)jM6{6y# ) e,)0 /
8
H)3U*,-|B"aBx:41:/:-0h@))@E=m`-0\ G)
P @2)H)0Vc:A>)04 4/:S^39 CY*]
L9 :;0@=J4 0)Z3r} h@u="Y
*]:+Be@))k ]Y))BRaI="Y*]@2) ]
(s%]a41)~78a :^ =4D U3))K0SH/3U CB)C
0-)I
/ 85 :A))\S^))5 )=2)=",Y
*] )S )3) Bx / )0R# `]00# e-D)3B"8)0UI• )S
)3) =4D @42 )Y)8/@9 :;0 CB)C7))/ 4
m 3@2) / Y:;0k3y# I<=e7 / 8€4=") \,
S^B"a-0\ G @E)8)`@2) C:;0L3B)<@)•I)•-
C:;0SBR87=4D ] `]00# •I6)h3-B"8)0U@2)i-
s0# ~8B"IjCHY,)03hU‚/SO C:;037
hG351(7‚(7'8@2)hBU4.I
jCk@)C:^ e:8CHY@ / ) \3700# `=Z
)-=43Y:;0 e>\S^ =N.)e::J)Y0 ):>\
G G)7,S^NB"aƒ e C)K00)34.7P =;
G):/3)mI
2)=_4237=Z)o) \m-9 ` ) ::`
:+ 1 ]-B"a3Y:;0`:+ e>S)S4Q@)P:@E
)]:^#10R / I
1.1.1.1 Phân loại thực vật và nguồn gốc
85 !)h -h3„
)C• @7!) 37!)7!I
5)8/ j)0U
f)41 E <a-/W:!))-Br33Iu!‡ I•3I
L+-)85
)2)r3h0u:-h
Rr3Su13)r!-:))-hu
M5rˆ0)-)u=)8> r•:3B) hhu
L+5rBˆ0)-)uB=Er3)Shhu
r3)Buar!)hhu
)rhuar!)u
f)r:h )hu!)h -h
+a e85 -!)• -h3„0R#5)8/
4 @70) 7:) 70)@ @III‰)60 +a=4D 5)- +
8)0U7 + `0U7aJg
1.1.1.2 Đặc điểm thực vật học[8]
`afp \ S93FS)S4Q > ` +aIj)3NBx
U +a e(3K 5 :/3)m@ a0Š=\*#=]4 +s-/0J0@
/ 3K:^-P =J:/3)m7=e:/3)mh:41x=\
3K /)I#)@2)a3NBx0U i e3K:^05 3k@C a `0
@:/3)m41943K:^ `a3NBx7] Y / -)3K=Z
:/3)m `aI!R#3KoB_0V=)@ i e \ GP42 @
]S)S4Q7 A3K:/3)m `U \ G8=/8m
+af-) ++…7U3^7 e )=#@ e-e7)34c
-+G0 + k(&0I+@ )="e… e03aB 7*/07+
d 1)@I+=4D ]N0'-2:r3 O--2:-‹)*#:7CB3]
7)C:=C-J…700Z0 `@V@ #) O-JBJuI
f/af-)-/=105 *h8o7Š3+ +If/N0s:J
#@:)C-/If/ eO+7S +@_7O4. e ]#-Œk&•
S4D 7S7eSJ9 :;07 G)g)/3_ ` +a =4D +
.F\S^3R3") `eI3S4D 7)BRa=4D
SO-0/S4D 3Y*]# 7B)C>)BRa )ZY:;0
e)/3_4=4.- h7ˆ3 hg=m-0S_ 3Zd / :^) /
Y:;08/ I)BRa A=4D SO=m-0N@Y)7-0-419 79
12
:;0 4.)7=d B))BRa-:J8m)C3
):\ G G)I
1.1.1.3 Thành phần hóa học của củ sắn [4]
:J `a `CS=R38Y8/3ROR @
-))#7=)Z8):/3)m ` +@.)) I:J3
BUr•u ` `4
Bảng 1.1: Thành phần hóa học của củ sắn
M0-4D)BR `a:^R @=R7) `aI#)@2)
)#a0RG0U@^ CB)C emBa=Jk/t@8CP @/'
G074=@/(s@/((U0-4D)BR ]I
/t/(% `>)BR0-4D42 7-4D ]A)Z74
@EC CB)Ca8FŽ-:J)BR]:0 A8e
BYHYI</s@‚-4D)BR3 `-))Y0@U0R:J:+`
=4.=m)0J038) + 4 e8YGHD:I
4.3a `C-- „@0R-4D0„7 3„I<a
)U0-4D=4. )Y0I3 CB)C7=4.A3
42 Y)3h42 S_ I
L3h) `a2) 4=4D ) \8€7)@U0-4D
]: l>Y4c2)H3U I
6)F ]S)S4Q3a A e=R #7)7a #@
h„0:\ :I6F ]+8e8G CB)C@CH3U8
> D:U ]-4DY:;08n0I
R #3a-M6I648) 4=ecS- „)5)-
:„h-)7S42)/ S^ `h„00)34.*)U:+`
L„h-) `CE:3c@V O)SK)Y0B28),S^
aBx / Be @V@+0@42 I
•„03a2) 4=4D ) \8€I64.) 3x3
# / h„0U:-:h-*Sh eY4c)Z2) ]-4Da3
BYHY@ CB)CIj) 4=7=R ` / h„03aC@p
=_748)=U05)h„0=Z=R0IL-:h-*Sh*P
/ H/3U*e:-:h- H)=e3OD:@2) /
]8 eBY ]:h-4*)0)=mU / Y:;0 e0I
3e0:-:h-*Sh eFh„0*e0:h-0=)mU
-)3„)„*P / 9*e*)0))3„)38)8)41\I<
0R- me / 8))3a #0*/0=h5)-0h-)I+
-0R3F+-0 _a e0=h04.5)-a
Y9IUh„0h `CE:330`c@V O) / @C=h l
*])3_ `Ba=Jk-2:)@)I
j)a Y9U8) CB)C4-R 7]:oB_4D@8)0)*/
8e:/@QCB=m)Y):e)BRS=e)]-])BR]:@)
BR83aI
6))3„)h7 / h„0*e8,8/ l=R0-0
p] ]8 ` `I
14
)3a>4Y:;0*e)- ]’-Bˆh e0
T0=h8e;I
j) CB)C7) A/ S^@2)aa l e0
T0=hIY) ]=ZY4c2)0a )BRC48) CB)C
8/ S_ B@3)=mI
<a #3a2) l 4=4D ) \=J=`7)3
BYHY@ CB)C=Z*Y3H/3UU `a #02)S/ S^
`:-:h-*S„*e:-:h- / H)@=e
’-Bˆh e0=hI
l)#8)+3BYHY41)a4.)K0B#)8
(%•%7
‘
((‚s7
‚
(‚%tt
(ss%7
(
(s$%7(
a 3R@
Y)0)Z
3
$'&7t
(‘&&7
t
s($•7
$
s‚&t7
t
s•‚$7
‚
s&$(7
%
s$%•7$
+6 ‚&(7&
(''$7
$
s%&‘7
‘
s%t%7
'
5
8521,6
h<rs%((u
Trên thế giới:
<Y-4DaC)2)G0s%(s42 >=s&s7(s&3)] `41)
@2)s%((-s'&7•(3)]@(t$(-•(7s$3)]I642 eY-4Da
)Z]C)2)-6)h3)r&'3)]u78C=C-/)frs$7$3)]u@
Sh)rs‚7t3)]uI)60=\\/03C)2)@ZY-4Da
rt7•&3)]uIr}•s%(‚uI
!\ ) ^ a BU H+ C )2) G0 s%(s 8Y (‘7(
8~4.)~G0I<Y-4Da `C)2)=4D )SO342 8Yt‚•
r,S^-0-419 7\ G)P 7 CB)C ):gu7 A-)••r(•7&
3)]u=4D *]8;S42)Sa-/87a@)r$%•u@)BRr'%•u
r}•7s%(‚uI
1.1.2Bã sắn[6]
"a=4D Y)33H/3UY*])BR@E:3)Z)N
6)7)f)7+6)@UL42 Ih42 >70R0/ CB)C e ]
‚%”(%%]~UoY*]=4D •7&”s&])BR78X0h=e-(s”'‘]B"I
\:CY)4.=4D :1)8k-#3a*/3=N3R@
SO=mBp h -h )P 7) J0I)7S8e)@80O)
16
B"a8]:ST=#)@2)@E)I6C3.)04@)UB"a#)3F7B#
0O))#)IC8)3.)a-U]00# =R ):/3)m@h)e:+/
8a:1)7Y4c2)0)34.@\ 8Œ 4.)I
Hình 1.1: Hình ảnh bã sắn khô
Bảng 1.3: Thành phần hóa học của bã sắn
< # M0-4D7•
( :M $7&
s M0;0 •%•&
‚
- Làm phân bón6))BR@ h -h7B"a A e0R>)17
::78-)@ / ]8/8/ -0:+Be3]#I64S ):>
@E m @) SOB"a-0:+Be i)2)c8@9 J
0/ CB)CIM1F7-4D*)3B"aY4c=C ]-4D:+
Be7F ]SKB1)3B"aY4c*]=C0)34.)/)7
>=4D H+0I
- Sản xuất syrup glucose" e / ) \,S^8€E8CD:*)
?h„0@h„0?h„0c0\ =R:OD:=m m=4D t‘tt•)BR e
3B"a)3 \-4D- h r•%•-4D=4.8,uIG \@
42 > ):>UH3U388)C@U ):> =d Y:;0Ž:+
7:Y)SO)Z>=m8,078e8]3R8#)B"aS3
N)73Z)8)HYI
- Sản xuất rượu etylic:<8)Ž:+)BR e3B"ahH
3U*)?h„07 =d =m=-4D=4.(&•7-0h34DBx / ,
S^]00h< 30 h h3h@))h}(‘Iy/3UŽ:+)BRcB"
a i=8Y••=4.8,I6C0# eS_ =4.==C(&•7 em,
S^):41/d 00E0>@d =d Y:;0Ž:+I
)7 Y):41/=Z8n08Y)I0@=e-4D42 Y)3k
/ 0/o)Z1@-0:/) ):>*,-|42 Y) 1I
18
- Làm cơ chất cho quá trình lên men ở trạng thái rắn:" e0R#
3U) \,S^B"aC /0-P0U3H/3U-0h
<c3/)3aI
1.2 Tổng quan về Bacillus subtilis
1.2.1. Đặc điểm của Bacillus subtilis
) ::--)@)8;30S417UHh7)C8)@U
B,7=d =)m0U/) :n::+B)@2) / `8/ I ) e
P41=NUS@2)-3)S)0::)3k-3)S)0- `@)
8;8–8>BaBR 38) ) U)C8>d )C8>8BaBR I
> ])C8> `-) ) )P:E-D)18)) \3:A
=m ]:S)S4Q4::3h-:38> > )P: +3N:/
3)mI)8; l=4D SO3 ):=mY*]h„0hH0
-2I6e e8YGY*]—0-h7˜- h7 ))h7˜- )Sh7
h -h7:hvs(wI
) B)-)SKS=4D :+-E:k0)34.*HIk=]7@)
8;=4D -3Z2)9 @E7=R@E79 :;070)34.42 I
1.2.2 Các nghiên cứu sinh tổng hợp cellulasetừ Bacillus spp
6) \ `•)v‚%wz3 h3)„)ˆh30B-h h -h
:3S hSB ) ShB ) 3)[=R-9 5 `:Y\=‚7((
(7%‘0~0-@ e8YG _=4D )=R•%
3(I
f!•Br(t‘'uv‚(w=") \ / ` ) @ e)Z>
] 41 =N @2) ) B)-) H B)z3 h3)„) ˆ h --)
20
)@)ˆ ) )-h[Ij))34c3)Z-)=4.7S_ p)
=4D e > h --) 8) 8)m0 \ Bx / :+ )Y) @2)
3))3:h-% 3B*0h- h -h7 A)34c3 h B)h@- h
U8YG)=R3]#I•„0h i)pD:c: +Bx@
##)4c:M™'7‘)&‘
I
6) \zL3)’) )S 3 h3)„)ˆ h -h:3S hSBš
) 3)[ `!šS„7M)j-•7›@•vs‘w=":+-E:=4D s
` ) M'‚@M•$‘k#)42 e `›)0BšhI/ h„0h e
=R#)48):M&$7&7)=R$&•%
7BZc)=R&%
3(I
3D) v((wI
6)Z) \="0Y ]3P h -hN0)Z=1@_ h B)h7-
s)m=1@_- ha@2)Bc) J#)˜(7'- )S) ce (‘%
I)Z
S) `/˜- O@N# `e7@>S^(%%%%=1@_0…)/
=#)@2)…@(&%%%=1@_3 v((wI
/ / h -hx0@2) / @)D)Ih -h
8/ \@8342 . / J#)S3hB3)F /
:+,@-)8C8–42 )F / /@2)I)D)=4D ]k /
@O)m=_U*h)F0R#>@O@=_U>3E9I<#-4D)
m)F@O=_U@@=_U:^R @N# )5 `
h -hI)D) emBn1‚%03CB9 @E@3R8Y
s%03Y-)! 3:hv('wI
Hình 1.3: A Cấu trúc cơ bản của cellulose B Mặt cắt của nhánh cellulose
39)7 / @)D) h -hH]@2)h0) h -h@-))
D: ] 8/ :\ : 5) - -) h -hI ] 3P 8C D: @2)
-) h -h)P: CB9 @EG\ G=m _=4D /:]
;0]@ / / =R 15 v('wI
22
Hình 1.4: Cấu trúc của lignocellulose
3 9 ) 1 ] -) h -h B :` B )
h -h~h0) h -h Y3c941/ @2)h„0hIf))-:J8/
:\ :3D: ]-) h -hI6)Z:41:/:)Z*,-|=4D )
\x0-)BV-))=mG941/ ` h -h@2)9/ S^ `
h„0hI6F / =4D ,S^4)Z73,@2)- -d S0)
F 1Ÿ*,-|@2)8)Z04S)0S3*)Sh@00)Ÿ*,-|@2) )S4 )S
h) @ )SS3 -3) Ÿd -*,-|1)42 D)-))B3I3
Y*])]4.,S^f)„0h=m-00Z0…SK*,-|h„0hI
39) e-)]03K3a e8YG/ -))-0 ]0@@)
@3 / -)=Er&7tst7(&•uvs%wI
Lh-0)Y08YG)e:3h)7)BR@-):)S@U:h
:\ -0:3h)8n0@8/-)=4D 9:+)Y):3h)I• )S:) em
Y4c=C)e)BRH941/ @2)h„0h0-hI‰:M
]:7 )S:) e=)> +00@U / e0::h:+-8
I42)=)Z8) )S:) eY4c*]=C8YGA:3h)
@U-)8C) ` / e0::h ` )S:) @ / # )S0)hB_)
er-)h7))S)h73))huI3:M )S7 )S:) ema d@2) /
:3h)9 @E7@U=)m0=Š=) `:3h)x03:M'7%&7%I‰:M$7%
‘7% )S:) @:3h)9 @E=Z e=)> +07:\ D: )S:) @
:3h)@T=4D UI) a8C-0)Y0)/3_S)S4Q:3h)
9 @Ev‚‚wI
:J\ G G) ` \)Z:h@0-4D
8)C=R@E8e]:^ / ]8/ I#)@2)P)-)U:J::3
=4D / h„0h3 1m)P:)eSKS4@2) / -) A-)
U3]8e8GIUCh„0h:h4.=4D Bp@3\ G
24
G)d / Y:;09 :;0 \)Z:hS 4.)@
@E)I
1.3.2.2 Cơ chế cắt phytate
•„0h:h ] @ e0::h=J) @ :+)Y)-) 8C
0::hh37)Y):e::3@ 1@0))-:h8)::hI
<=e7G0e0::h A-)=4D )C:^ / 38V):h.:h
d Fh„0h::h8=d )8/ @#)S)@2)#-4D
-23=4.)e `@E `I
Hình 1.5: Cơ chế cắt phytateCơ chế cắt phytate
1.4 Tình hình nghiên cứu ngoài nước
/ ) \@Z\S^B"a4.=4D )CcF42
=:/3)m@8n0:/3)mx0+ )/3_S)S4Q `N
-419 ) pI
`=4D SO-00T \IjCHY ]0-4D:3h)G‘7s•@2)
0T8`IM0-4D 3BS3h3@Va)Y0&(7(•8)`@2)S_ ="
-0h342 IM0-4D=4.="`:+ emES^=m3N]0d
N- hI6) \ lH/3x8 e9=p)@Z0
-4D*173@8/3@VaI
<3)3r(tttuvs$w@2)=Z)zL3 h)ˆ @šhˆ3)0:3@hS
B)0-)-)„)[rCB)C42 Y)*,-|ax0ES^G)
8#))5 u="ES^`B"a@2) …D:h„0h h -h@:h )h
x0N)-4D=4.=4D `:+=m Y)))8#)-0hI
6)Z=Z) `42 )E:3h*42*,-| 7 G)
)Y0)/8)C7)-) x0:/3)m0R):
BZ@FI