ĐA
̣
I HO
̣
C QUÔ
́
C GIA HA
̀
NÔ
̣
I
TRƯƠ
̀
NG ĐA
̣
I HO
̣
C KHOA HO
̣
C TƯ
̣
NHIÊN
Lê Hồng Thu
̀
NÔ
̣
I
TRƯƠ
̀
NG ĐA
̣
I HO
̣
C KHOA HO
̣
C TƯ
̣
NHIÊN
Lê Hồng Thu
TÁCH DÒNG VÀ THIẾT KẾ VECTOR BIỂU HIỆN GEN MÃ CHO
THỤ THỂ NEUROKININ-1 Ở NGƯỜI VIỆT NAM
Chuyên nga
̀
nh: Sinh học thực nghiệm
M số: 604230
1.1 TH TH T VI G PROTEIN 11
1.1.1. G protein 11
1.1.2. Th th t vi G protein 11
1.2 H TACHYKININ NG V 14
1.3 TH TH H TH NEUROKININ-1 18
1.3.1. Gii thiu chung v th th h tachykinin 18
1.3.2. Th th neurokinin 1 20
1.4 NG DNG CA TH TH NEUROKININ-U TR
BNH 23
1.5 VECTOR BIU HI TH
NEUROKININ-1 26
U 28
U 28
2.1.1. Mu vt 28
p mi s dng 28
thng vector 29
2.1.4. Chng vi khun 29
t b 29
U 30
u 30
thu u 31
ng s 31
2.2.2.2. Phn c 32
2.2.2.3. Phn ng PCR (Polymerase Chain Reaction) 32
2.2.2.4. Tinh sch DNA b 33
2.2.2.5. N 33
2.2.2.6. K thut bin np 33
c khun lc 34
34
DAN
-
12.
neurokinin
: --
-
neurokinin-1 30.
-
neurokinin-1 30.
:
F3/NK1 R3 43.
18:
ctor pCDNA 3, pEGFP-N1
Hind Bam
HI 44.
19:
3-
NK1 46.
20:
DNA Dedeoxyribonuleic acid
pb
kb kilobase = 1000 bp
dNTP deoxyribonucleoside triphosphate
E.col Escherichia coli
LB Lubertani Both
PCR Polymerase Chain Reception
RNA Ribonucleic acid
GPCR G protein coupled receptor
TACR Tachykinin Receptor
TM Transmembrane
IL
CIN V Chemotherapy induced nausea and vomiting
[4].
G p46
GTPases
), beta (G
). Hai
beta (G
);
) [29].
G protein
G
G protein
(350-500 acid amine) [45],
.
G protein ,
[52].
(hormone, photon,
. G
G
.
-G
enzyme cAMP
inositol triphosphate/diacetyl glycerol (IP
3
/DAG)
alpha trong G
[29,
38].
V, GPCR vai
,
ion,
[51, 60].
Theo
[3, 4].
1.2 H
NKA
His-Lys-Thr-Asp-Ser-
Phe- Val-Gly-Leu-Met-NH
2
1983
NKB
Asp-Met-His-Asp-Phe-
Phe-Val-Gly-Leu-Met-NH
2
1983
Neuropeptide-
Asp-Ala-Gly-His-Gly-Gln-Ile-Ser-
His-Lys-Arg-Lys-Asp-Ser-
Phe-Val-Gly-Leu-Met-NH
2
Neuropeptide K
Asp-Ala-Asp-Ser-Ser-Ile-Glu-
Lys-Gln-Val-Ala-Leu-Leu-Lys-
neuropeptide- [3, 7
mRNA TAC1
---
PPT) [34
-PPT-
-PPT--PPT-A mARN
, 37
Gen PPT-A
-Arg, Arg- -Lys
4, 47].
preprotachykinin
(NKA,
. n
amino 12]. TAC3 (PPT-B)
cho neurok trong [7].
Yu Zhang
[45].
tachykinin Tr
)
[3, 9, 10, 35].
NK1 [21].
2: 3]
Tachykinin
SP
NK1 > NK2 > NK3
NKA
NK2 > NK3 > NK1
NKB
NK3 >> NK2 > NK1
Neuropeptide-
NK2 > NK1 >> NK3
Neuropeptide K
NK2 > NK1 >> NK3
B3.
3: [3, 23, 28]
phosphoinositol
3
26, 42].
16, 18,
55].
.
46, 14].
1
-1
-
d
B [24].
G
protein
carboxyl
amino Tacid amine
Cys105-TM TM4; amino
carboxyl
22].
carboxyl
Disulfit
Disulfit 4:
NK1 [30].
carboxyl
407
311
2+
2+
.
Hai
adenylate cyclase [35].
t
13].
28].
, gen NK1
mRNA .
Q
[13
30, 22].
-
55].
1.4 NEUROKININ-
quan.
. N
41, 43
Mesolimbic
44SP
2+
6].
T Threonine (124)
A - Alanine
Y Tyrosine (214)
C - Cysteine
E - Glutamic acid (332)
G - Glycine
-1
cDNA -1
,
-1
Tách dòng và thiết kế vector biểu hiện gen mã hóa cho
thụ thể neurokinin – 1 ở người Việt Nam”.
1.5
NEUROKININ-1
carbonhydrate