Tuyển tập Báo cáo “Hội nghị Sinh viên Nghiên cứu Khoa học” lần thứ 6 Đại học Đà Nẵng - 2008 300
PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN MỘT SỐ CHỦNG VI
KHUẨN AZOTOBACTER CÓ HOẠT TÍNH
NITROGENAZA VÀ SINH TỔNG HỢP IAA (INDOL
AXETIC AXIT) TỪ ĐẤT THÔN BÌNH KỲ- HÒA QUÝ- NGŨ
HÀNH SƠN- TP. ĐÀ NẴNG
TO ISOLATE AND TO SELECT NITROGENASES ACTIVE BACTERIAL
GENERA AZOTOBACTER AND SYNTHESIZE AIA FROM HAMLET BINH KY-
HOA QUY- NGU HANH SON LAND

SVTH: NGUYỄN KIM ANH, lớp 04SM
PHẠM THỊ NGỌC ANH, lớp 05CSM1
LÊ THỊ THÚY HOA lớp 05CSM1
NGUYỄN THỊ QUỲNH NHƯ, lớp 05CSM1
ĐẬU THỊ TỈNH, lớp 04SM
GVHD:TS. ĐỖ THU HÀ
Khoa: Sinh- Môi trường, Trường Đại học Sư phạm Đà Nẵng.

TÓM TẮT
Từ 30 mẫu đất trồng lúa, trồng rau và đất bỏ hoang… tại thôn Bình Kỳ- Hòa Quý- Ngũ Hành
Sơn- TP.Đà Nẵng, đã phân lập và tuyển chọn được 08 chủng vi khuẩn Azotobacter có khả
năng cố định đạm, trong đó có 02 chủng có khả năng sinh tổng hợp IAA. Tuyển chọn được 2
chủng có hoạt tính mạnh nhất: Chủng BK- 6 cố định đạm mạnh nhất, chủng BK- 5 sinh tổng
hợp IAA mạnh nhất. Có thể ứng dụng 2 chủng này làm phân bón vi sinh để kích thích sự sinh
trưởng của thực vật hoặc bổ sung vào các vùng đất bạc màu, nghèo dinh dưỡng để nâng cao
nguồn đạm trong đất, cải thiện sinh thái đất
SUMMARY
Laterfrom 30 soil sample is different: abandonned land rice cultivar, vegetable-raising,.at Binh

tổng hợp IAA từ đất thôn Bình Kỳ- Hòa Quý- Ngũ Hành Sơn- TP. Đà Nẵng.
1.3. Nội dung của đề tài
- Phân lập, tuyển chọn các chủng vi khuẩn Azotobacter có hoạt tính nitrogenaza và sinh
tổng hợp IAA (Indol Axetic Axit) từ đất thôn Bình Kỳ- Hoà Quý- Ngũ Hành Sơn- TP Đà
Nẵng.
- Nghiên cứu đặc điểm nuôi cấy và hình thái của các chủng vi khuẩn tuyển chọn.
- Nghiên cứu ảnh hưởng của thời gian và nhiệt độ nuôi cấy đến sự sinh trưởng, khả năng
cố định nitơ và sinh tổng hợp IAA của các chủng vi khuẩn tuyển chọn.
- Thăm dò ảnh hưởng của dịch nuôi cấy các chủng VK tuyển chọn đến sự nảy mầm của
hạt đậu đen.
1.4 Những đóng góp mới của đề tài
Đề tài đã đi sâu vào nghiên cứu các chủng VK Azotobacter có khả năng cố định đạm và
sinh tổng hợp IAA, có thể ứng dụng trong nông nghiệp làm phân bón vi sinh kích thích sinh
trưởng của thực vật hoặc bổ sung vào các vùng đất bạc màu để nâng cao nguồn đạm trong đất,
cải thiện hệ sinh thái đất.
2. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu
2.1. Đối tượng
- Các chủng VK Azotobacter được phân lâp từ một số mẫu đất thôn Bình Kỳ- Hòa Quý-
Ngũ Hành Sơn- TP. Đà Nẵng.
2.2. Phương pháp nghiên cứu
- Phương pháp thu mẫu, theo Erogov (1983).
- Phương pháp phân lập và tuyển chọn các chủng VK Azotobacter , Erogov,(1983).
- Phương pháp đếm số lượng tế bào CFU/ml, theo Nguyễn Lân Dũng (1982).
- Phương pháp xác định khả năng cố định đạm của VK Azotobacter:
- Phương pháp so màu với thuốc thử Nessler, theo Lê Văn Khoa (1996).
- Phương pháp xác định hàm lượng IAA theo Miska và Skovski,1983.
- Phương pháp nghiên cứu đặc điểm nuôi cấy và hình thái của các chủng VK tuyển chọn,
theo Nguyễn Lân Dũng (1988).
- Phương pháp nghiên cứu thử nghiệm dịch nuôi cấy các chủng VK tuyển chọn, Mai Thị
Hằng, (2000).

chọn các chủng có khả năng cố định nitơ mạnh dựa vào phản ứng màu với thuốc thử Nessler.
Kết quả có 3 chủng mạnh, 2 chủng trung bình và 3 chủng yếu. Trong đó chủng BK- 6 có khả
năng cố định đạm mạnh nhất (3,28mg/ml), chúng tôi chọn chủng này làm đối tượng cho các
nghiên cứu sau.

Hình 3.2: Hình ảnh ống giống và phản ứng màu của chủng BK- 6 với thuốc thử Nessler

3.1.3. Tuyển chọn các chủng VK Azotobacter sinh tổng hợp IAA
Từ 8 chủng VK phân lập được, chúng tôi tiếp tục tuyển chọn các chủng có khả năng sinh
tổng hợp IAA, dựa vào phản ứng màu với thuốc thử Salkowski. Kết quả, xác định được 2
chủng có khả năng sinh tổng hợp IAA. Trong đó chủng BK- 5 có khả năng sinh tổng hợp IAA
mạnh (4,313 μg/ml). Chúng tôi chọn chủng này làm đối tượng cho các nghiên cứu tiếp theo.

STT Chủng VK Hàm lượng NH
4
+
(mg/ml) Mức độ cố đinh nitơ
1 BK-1 3,10 Mạnh
2
BK-2 2,76 Trung bình
3

Gram
Hình
dạng tế
bào.
BK- 5
2
- Non: Trắng trong
- Già: Trắng đục
- Bề mặt nhẵn nhầy
nhớt, khi già thì
nhăn nheo, tròn
đều.
- Gram
âm
- Hình cầu
BK- 6
5
- Non màu trắng
đục, khi già chuyển
màu vàng.
- KL lồi, bề mặt
nhẵn, nhầy nhớt
- Gram
âm
- Hình que
ngắn


. Sau 72h, tỷ lệ nảy mầm ở nồng độ pha loãng 10
-2
vượt 23% so với đối
chứng. Như vậy dịch nuôi cấy của chủng BK- 5 đã kích thích và rút ngắn thời gian nảy mầm
của hạt giống. Vì vậy, có thể ứng dụng chủng này để xử lý hạt giống trước khi gieo.
Tuyển tập Báo cáo “Hội nghị Sinh viên Nghiên cứu Khoa học” lần thứ 6 Đại học Đà Nẵng - 2008 304
Hình 3.5: Hình ảnh hạt đậu đen nảy mầm trong đĩa petri sau 72h

3. Kết luận:
+ Từ 30 mẫu đất tại thôn Bình Kỳ- Hòa Quý- Ngũ Hành Sơn- TP Đà Nẵng, chúng tôi
phân lập và tuyển chọn được 08 chủng VK thuộc chi Azotobacter có khả năng cố định đạm,
trong đó chủng BK- 6 có khả năng cố định đạm mạnh nhất (4,52mg NH
4
+
). Chủng BK- 5 và