Sơ lược về lịch sử
•
Áp dụng trên hoa lan – 1 năm/1 lần.
•
Nhân qua protocorms, 1,000,000/năm.
Chồi phát sinh
từ protocorm
Tái sinh thành cây
hoàn chỉnh
Các phương pháp nhân giống vô
tính in vitro
•
Chồi nách
•
Tạo chồi bất định
•
Tạo phôi soma
Nuôi cấy chồi nách
Ngọn
Chồi nách trên
trục của lá
Thân Lá
Lựa chọn mẫu nuôi cấy
Các đặc tính mong
muốn:
•
Dễ tiệt trùng
•
Non
•
Phản ứng tốt với môi

Vitamins
•
Nước
•
Hormon sinh trưởng TV - auxin, cytokinin, GA
•
Các chất tạo gel
•
Các thành phần không xác định
Đường
•
Khi nuôi cấy mô thường quang hợp không
đủ cung cấp đủ đường ⇒ thêm saccaroza
2-3% w/v.
•
Glucoza hay hỗn hợp glucoza và fructoza.
•
Khi nuôi cấy công nghiệp, các nguồn
carbon khác (rỉ đường, dịch thủy phân tinh
bột) có thể sử dụng.
Nuôi cấy tự dưỡng
•
Sinh trưởng không có nguồn carbon ⇒ cần
kích thích quang hợp
•
Cường độ ánh sáng lớn (90-150µMole/m
2
/s)
điều kiện tự nhiên (30-50).
•

glycine, Thiamine, pyridoxine).
•
Inositol thường sử dụng với nồng độ lớn gấp hàng
trăm lần (100mg/l)