B GIÁO DO
I HC NÔNG NGHIP HÀ NI NGUYN TÙNG
VIRUS CÚM A/H5N1 CLADE 7
: 62.64.01.04 TÓM TT LUN ÁN TIN S
HÀ N 2013 c hoàn thành ti:
mm thiu nhng thit h nh
bnh tái phát vn luôn tn ti.
c lc cao không nhng nguy him cho gia cm mà còn rt
nguy hii vi. T n nay, th gin Virus
cúm gia ci c, vi 602 ca b
cht. (WHO,2012). c tính bin i r
có nhic phát hin và phân lp nhic khác nhau t
châu Á sang châu Âu.
n và phân lp
c mt chng virus A/H5N1 mi thuc clade 7 t gà nhp lu biên gi
/H5N1 mi ch c phát hin gà Trung quc và tc
phát hin xut vacxin (Re-4) t chng virus
A/H5N1 thu dng phòng bnh mt s
[42]. Vi thc t có rt nhiu gà nhp lu vào Vit nam qua biên gii cho thy nguy
xâm nhp và nhim ca Vit Nam và có
i vi c i.
Vì vy cn phi tin hành nghiên cu v c tính sinh hc c
i vng gia cm khác nhau, kh o h ca vacxin
hii v
.
c thc t trên chúng tôi ti tài: c tính
sinh hc c /H5N1 clade 7 phân lp Vi nhm góp phn
cung cp t cho vic xây dng bin pháp phòng chng bnh cúm gia
cm.
Mc tiêu c tài
-
-
c c tài
cm, do nhóm virus cúm type A, thuc h
rc phân chia thành nhiu subtype khác nhau da trên
hai kháng nguyên b mt capsid ca ht virus là HA và NA. Nhóm virus cúm A có 16
subtype HA (t n H16) và 9 subtype NA (t n N9). S t hp
(reassortment) gia các subtype HA và NA, v mt lý thuyt, s to ra nhiu subtype
khác nhau. Mt khác, c tính quan trng là d t bin trong
gen/h c bit gen NA và HA), hoi các gen kháng nguyên vi nhau,
trong quá trình xâm nhim và tn ti lây truyn gia các loài vt ch
.
H c phát hin bao g
virus cúm A (Influenza A); nhóm virus cúm B (Influenza B); nhóm virus cúm C
(Influenza C); và nhóm Thogotovirus. Các nhóm virus khác nhau bi các kháng
nguyên b mt capsid, virus cúm A và B là Hemagglutinin (HA), virus cúm C là
Hemagglutinin Esterase Fusion (HEF), và Thogotovirus là Glycoprotein.
1.2. Kháng nguyên ca virus cúm gia cm
nh subtype d s kháng nguyên (protein)
b mt là HA (Hemagglutinin-vit tt là H) và NA(Neuraminidase-vit tt là N) có vai
3
trò quan trng trong min dch bo hc coi là yu t va quyt
nh tính kháng nguyên, va quyc lc ca virus cúm A.
1.2.1. Protein HA (Hemagglutinin)
Protein hemagglutinin là mt glycoprotein thuc protein màng type I (lectin), có
kh t hng cu gà trong ng nghim (in vitro), kháng th c hiu
vi HA có th phong ta s c gi là kháng th t
hng cu (HI- c phát
hin (H1 - H16), ba subtype (H1, H2 và H3) thích ng lây nhim gây bnh i
i dch cúm trong lch s. Có khong 400 phân t HA trên b mt
capsid ca mt virus, có vai trò quan trng trong quá trình nhn din virus và khi
ng quá trình xâm nhim ca virus vào t bào ch.
4
NI DUNG - NGUYÊN LIU - U
2.1. Ni dung
2.1.1. Phân lnh virus cúm gia c
- -PCR
(RRT-PCR)
- Phân lp virus trên phôi trng gà 9-10 ngày tu
/H5N1.
- ng phn ng HA, HI và RRT-PCR.
c tính di truyn hc c/H5N1 clade 7
Mi quan h v di truyn ca virus A/H5N1 clade 7 vi các virus A/H5N1
khác thông qua phân tích h ph c.
nh mt s c tính sinh hc ca virus A/H5N1 clade 7
- Tính thích ng trên phôi gà, trên t
- c lc ca vir /H5N1 clade 7 trên mt s
(gà, vt và ngan).
- Mt s m b.
ng kháng nguyên)
- Mi quan h v kháng nguyên hc ca virus A/H5N1 clade 7 vi các virus
A/H5N1 khác thông qua HI chéo vi mt st s
clade khác.
nh hiu lc ca vacxin H5N1 Re-1
- Hiu qu ca vacxin cúm gia cm Re-1 Vii vi virus cúm gia cm
A.
2.2.
-
50
ca virus.
50
Virusm lên t
phôi gà. Quan sát CPE nh svirus A/H5N1 và TCID
50
ca virus.
2.3.2.5ng vt thí nghim (gà, vt và ngan):
Gây nhim bng cách nhpha loãng 1/10
10
-6
TCID50.
a OIE).
2.3.2.6
/H5N1 clade 7
Chúng tôi s d, HI c nh virus phân lc.
2.3.2.7ng realtime RT-PCR (RRT-PCR)
- Chit tách RNA c/H5N1bng kít Qiagen Rneasy minikit.
- Chy phn ng RRT-PCR phát hin virus cúm
2.3.2.8. n xét nghim bnh tích vi th
Các mu ph tng c x t lát bng microtome và nhum HE
quan sát các bii bnh lý bng kính hin vi.
2.3.2.9i trình t gen:
Sn phm c gii trình t bng máy sequence t ng ABI 3730; S
dng phn m thc hin vic so sánh chui trình t (Alignment);
Lp h ph gen HA, NA và M d-joining (NJ) vi phn
mm MEGA so sánh v/H5N1thuc các clade (nhánh) khác nhau
vi gc là virus clade 0 (A/goose/Guangdong/1/1996).
(RRT-PCR)
5N1
(RRT-PCR)
%
%
%
275
10
3,64
8
2,91
5
1,82
220
7
3,18
7
3,18
0
0,00
m
phát hin
Phân loai
clade/nhóm
Subtype
1
A/Chicken/Vietnam/NCVD-016/2008
Cao Lc
7
H5N1
2
A/chicken/Vietnam/NCVD-03/2008
Cao Lc
7/Nhóm B
H5N1
3
A/chicken/Vietnam/NCVD-04/2008
Cao Lc
7/Nhóm B
H5N1
4
A/chicken/Vietnam/NCVD-05/2008
Cao Lc
7/Nhóm B
H5N1
5
A/chicken/Vietnam/NCVD-093/2008
Cao Lc
7/Nhóm A
H5N1
H5N1
11
A/chicken/Vietnam/NCVD-swab19/2008
Cao Lc
7
H5N1
12
A/chicken/Vietnam/NCVD-swab20/2008
Cao Lc
7/Nhóm B
H5N1
13
A/chicken/Vietnam/NCVD-swab24/2008
Lc Bình
7/Nhóm B
H5N1
14
A/chicken/Vietnam/NCVD-swab25/2008
Lc Bình
7/Nhóm B
H5N1
15
A/chicken/Vietnam/NCVD-swab26/2008
Lc Bình
7/Nhóm B
H5N1
13 trong s 15 m
nh rõ r(xem hình 3.2.), tc g
.
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
Axit amin (%)
1
A/goose/Guangdong/1/1996 (0)
3.9
3.8
4.3
4.3
4.5
3.6
6.5
8.4
9.1
9
8.8
9
2
A/goose/Guiyang/337/2006 (4)
4.4
5.4
3.7
3.6
3.2
4.5
7
8.4
9.5
8.8
8.6
9
5
A/bar-headed goose/Qinghai/1/2005 (2.2)
4.3
5.4
3.5
3.5
3.1
5
7.9
8.6
9.1
9.1
9
9.1
6
A/Anhui/1/2005 (2.3.4)
4.6
5.7
5.3
6
6.2
5.6
3.3
5.4
5.9
5.9
5.7
6.1
9
A/Chicken/Vietnam/NCVD-016/2008 (7, Vietnam)
6.2
6.5
6.6
7.1
6.9
6.8
4.4
3.3
6.1
3.2
3.1
3.4
10
A/chicken/Vietnam/NCVD-093/2008 (7, Vietnam, nhóm A)
6.7
6.7
6.9
7.5
7.2
7
4.7
3.9
2.8
4.1
0.1
0.4
13
A/chicken/Vietnam/NCVD-03/2008 (7, Vietnam, nhóm B)
6.6
6.6
6.9
7.4
7.2
6.9
4.6
3.8
2.7
4
0.4
0.3
khi nhóm này và có m ng gn vi ch7 ca Trung
Quc phân lp t (A/Beijing/01/2003).
Hình 3.4. Cây phát sinh loài da trên chui nucleotide
virus A/H5N1 clade 7 (PNeighbor-joining s dng phn
mm MEGA 5, giá tr boostrap 1000)
Gia các chg có s tii vi
gen N1, c th là chng A/chicken/Vietnam/NCVD-093 khác bit vi nhóm còn li
A/CHICKEN/VIETNAM/NCVD-05/2008
A/CHICKEN/VIETNAM/NCVD-04/2008
A/CHICKEN/VIETNAM/NCVD-03/2008
A/chicken/Shanxi/10/2006
A/CHICKEN/VIETNAM/NCVD-016/2008
A/chicken/Hebei/706/2005
A/chicken/Liaoning/A-1/2007
A/mallard/Huadong/hn/2005
A/chicken/Shanxi/2/2006
A/chicken/Ningxia/24/2006
A/chicken/Hebei/126/2005
A/chicken/Hebei/102/2005
A/chicken/Hebei/326/2005
A/Beijing/01/2003 2003
A/CHICKEN/VIETNAM/NCVD-093/2008
A/Viet Nam/1194/2004
A/Viet Nam/1203/2004
A/chicken/Vietnam/8/2003
A/chicken/Viet Nam/AG-010/2004
A/Vietnam/CL20/2004
A/chicken/Viet Nam/DT-015/2004
A/chicken/Bac Lieu/07-10/2007
52
99
95
51
100
81
100
55
100
100
98
100
95
100
83
50
70
61
46
100
85
97
92
68
79
73
89
99
99
97
khác ca Vic clade 7 là A/chicken/Vietnam/NCVD-093/2008. S
A/chicken/Vietnam/NCVD-093/2008 l t là 4,7±0,2% (4,5-4,9%) và 5,6±0,3%
(5,3-6,0%).
Bng 3.6. M khác bit v di truyn trên gen N1 ca 5 ch
A/H5N1 clade 7 so sánh vi mt s chng tham chiu
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14 Axit amin (%)
1
A/Chicken/Vietnam/NCVD-016/2008
A/Chicken/Vietnam/NCVD-04/2008
2.0
0.5
0.4
6.0
2.3
3.0
4.1
6.0
5.8
6.7
10.2
10.4
5.8
4
A/Chicken/Vietnam/NCVD-05/2008
2.0
0.4
0.4
5.5
2.3
2.7
3.6
6.0
5.8
6.2
10.0
10.2
10.2
10.4
5.3
7
A/chicken/Shanxi/2/2006
2.7
2.5
2.7
2.7
4.1
2.4
2.0
4.6
4.1
4.8
8.5
8.5
3.9
8
A/Beijing/01/2003
2.4
2.7
3.0
2.8
2.3
2.3
2.3
3.6
2.3
1.0
4.6
8.2
8.2
3.4
11
A/goose/Viet_Nam/113/2001
6.6
6.7
6.8
6.4
5.7
6.5
6.0
4.5
5.6
4.9
7.9
7.7
2.8
12
A/Hong_Kong/156/97
14.2
14.8
15.1
14.7
13.8
5.5
4.3
5.3
5.0
3.0
3.6
3.3
3.2
11.1
9.8
Nucleotide (%)
Ch-n nht vi
ch2003 ca Trung
Quc. C th s sau khác ch là 2,3% m nucleotide và 2,5% m axit
amin. S sai khác ln nht có thy gi
t Nam so v/H5N1 có hit bi
19 axit amin (virus A/Hong_Kong/156/97 và virus A/goose/Vietnam/
-9,5 - 10,4%. m axit amin.
12
i trình t gen M và lp cây phát sinh loài da trên chui
nucleotide gen M
Da trên si gen M c
p cây phát sinh loài (phylogenetic tree theo dõi s tin hóa ca các chng
virus này (Hình 3.5).
Hình 3.5. Cây phát sinh loài d/H5N1 clade 7
A/duck/Vietnam/286/2005
A/Muscovy duck/Ca Mau/07-04/2007
A/chicken/Lang Son/200/2005 2005
A/duck/Guiyang/3834/2005 2005
A/Anhui/T2/2006 2006
A/Anhui/2/2005 2005
A/Shanghai/1/2006 2006
A/crested myna/Hong Kong/540/2006
A/Hong Kong/6841/2010
A/mallard/Korea/1195/2010
A/Hunan/1/2006
A/duck/Guangxi/150/2006
A/duck/Laos/P0117/2007
A/duck/Zhejiang/52/2000
A/goose/Fujian/bb/2003
A/goose/Vietnam/3/05 2005
A/Duck/Hong Kong/y283/1997
A/Hong Kong/156/1997
A/duck/Shantou/195/2001
A/Chicken/Hong Kong/SF219/2001
A/Goose/Guangdong/1/96
99
100
99
99
99
94
93
96
67
34
53
51
0.002
Clade 7
Clade 7
13
Vit Nam và Trung Quc có cùng ngun g th khác bit di truyn
m nucleotide và axit amin, chúng tôi so sánh gen M c
A/H5N1clade 7 ca Vit Nam vi mt s/H5N1ca Trung Quc. Kt qu
c biu th bng 3.8.
M sai khác v di truyn gen M gi/H5N1clade 7
ca Vi, s sai khác t m nucleotide là 1%
và m axit amin là 0,6%. M sai khác gi m
A/H5N1thuc clade 7 ca Vi
rt thp. S sai khác t di truyn m nucleotide và axit amin gia các
virus ca 2 nhóm này l t là 3,0±0.1% và 3,3±0.2% (virus
A/chicken/Shanxi/2/2006).
S
gen M
-it amin. Hai
/goose/Vietnam/3/05 và ch
7%.M c clade 0 là chng
c coi là thy t cc
l sai khác v di truyn vt Nam
m nucleotide là 5,3±0.2% (5,2-5,6%) và m axit amin là 4,2±0.2 % (4,1-
0.3
1.6
1.3
3.5
1.9
7.4
1.9
2.1
3.8
4.4
7.4
2
A/chicken/Vietnam/NCVD-093/2008
1.0
0.3
0.3
0.3
1.6
1.3
3.5
1.9
7.4
1.9
1.8
3.8
4.4
7.4
3
A/chicken/Vietnam/NCVD-03/2008
4.1
7.1
5
A/chicken/Vietnam/NCVD-05/2008
0.9
0.3
0.2
0.0
1.3
0.9
3.2
1.6
7.1
1.6
1.8
3.5
4.1
7.1
6
A/chicken/Shandong/A-10/2006
1.3
1.3
1.2
1.2
1.2
0.9
3.8
1.6
2.8
3.0
3.2
7.4
3.2
3.5
5.1
5.8
7.4
9
A/Beijing/01/2003_2003
2.4
2.4
2.3
2.3
2.3
1.7
2.1
3.5
5.8
0.0
0.7
1.9
2.8
5.8
10
A/goose/Vietnam/3/05
10.0
5.8
12
A/blackheadedgoose/Qinghai/1/2005
3.2
3.2
3.2
3.2
3.2
2.6
2.7
4.0
1.4
9.3
1.3
2.1
3.2
5.7
13
A/goose/Fujian/bb/2003
4.0
4.1
3.8
3.8
3.8
3.4
3.7
4.4
2.1
8.1
11.1
9.3
9.4
1.3
8.8
9.8
8.8
7.5
Nucleotide (%)
Tóm li, kt qu phân tích phát sinh loài, kt qu phân tích s sai khác di truyn
da trên gen H5, N1 và M c/H5N1Clade 7 ca Vit Nam
14
cho thade 7 ca Vi ng cao v
n g
.
nh mt s c tính sinh hc c
Nam (A/chicken/Vietnam/NCVD-016/2008)
3.3.1. Tính thích nh ch s EID
50
)
Virus bu git cht phôi trong vòng 2 ngày t sau khi gây nhim. u này
p vi các nghiên cc lng git
cht phôi trng trong vòng 48 gi sau khi gây nhim xoang niu mô.
Kt qu
50
1
10
-3
5
5
0
20
0
20
100
10
-4
5
5
0
15
0
15
100
10
-5
5
5
0
10
0
10
0
-)
3
0
3
EID
50
/0,1ml
10
7
-Muench)
2
10
-3
5
5
0
19
0
19
100
10
-4
5
1
4
1
5
6
16.7
10
-8
5
0
5
0
10
10
0
-)
3
0
3
EID
50
/0,1 ml
10
0
9
100
10
-6
5
3
2
4
1
5
80.0
10
-7
5
1
4
1
5
6
16.7
10
-8
5
0
5
0
10
- N 10
-6
:-
1-2 phôi vn còn sng (tùy theo ln thí nghim khác nhau).
- N pha loãng cao nht gây cht phôi trng là 10
-7
, tuy nhiên ch có 1/5
phôi cht thm 96h , và 4 phôi vn còn sng.
-.
10
7,9
EID
50
/ml.
3.3.2. Tính thích ng trên t nh ch s TCID
50
)
Kt qut TC
/Chicken/Vietnam/NCVD-c trình bày bng 3.12.
- T n 10
-2
n n 10
-5
toàn b các ging t u có CPE và thm
t virus phá hy trong vòng 24-72 gic bit n 10
-2
10
-3
thm
t bào b phá hy hoàn toàn sau 24 gi nhim.
10
-2
5
5
0
24
0
24
100
10
-3
5
5
0
19
0
19
100
10
-4
5
5
0
14
0
14
100
10
-8
5
0
5
0
11
11
0
-)
5
0
5
TCID50/0,1ml
10
6,2
2
10
-2
5
5
0
9
0
9
100
10
-6
5
4
1
4
1
5
80
10
-7
5
0
5
0
6
6
0
10
-8
5
0
5
-3
5
5
0
18
0
18
100
10
-4
5
5
0
13
0
13
100
10
-5
5
5
0
8
0
8
100
10
5
0
5
TCID50/0,1ml
10
6,2
- N 10
-7
ch có 2 ging nhim virus ln thí nghim th nht, ln th 2 và
3 không có ging nào nhim virus.
16
- Nng 10
-8
không có CPE, tc là không có hing nhim virus.
10
7,3
TCID50/ml.
3.3.3.Kt qu c lc c/H5N1clade 7
3.3.3.1. Thông s c lc dc tính phân t
c lc và m lây nhim ca virus cúm trên gia cm ph thung
ca enzyme protease ca vt ch n s phá v các liên kt hóa hc và tính th cm
ct t, và s phá v liên kt ca men protease ph thuc vào s ng các
axit an ta gen HA c
arginine (R) và lysine (K).
PQGERRRKKR*GLF
A/chicken/Primorje/1/2008
2.3.2
Nga
PQRERRRKR*GLF
A/duck/Vietnam/568/2005
2.3.2
am
PQRERRRKR*GLF
A/Anhui/1/2005
2.3.4
PLRERRRKR*GLF
A/duck/Vietnam/37/2007
2.3.4
PLRERRRKR*GLF
A/chicken/Yunnan/493/2005
2.4
PQRERRRKR*GLF
A/crow/Osaka/102/2004
2.5
PQRE-RRKKR*GLF
A/Pheasant/Hong_Kong/FY155/01
3
Hong Kong
PQRERRRKKR*GLF
A/goose/Guiyang/337/2006
Chng A/Chicken/Vietnam/NCVD-016/2008 có motif cha nhiu axit
b, cho th
c li vi gia cm.
17
c lng vt thí nghim
c lc ca virus này chúng tôi ch s dng mt chng virus là
A/Chicken/Vietnam/NCVD-016/2008 vì qua phân tích phát sinh loài (phylogeny)
gi
/H5N1clade 7 .
Mng vt thí nghic vi liu 10
6
ng nh . Kt qu tng
hp theo dõi thí nghi c lc ca virus A/Chicken/Vietnam/NCVD-
c trình bày trong bng 3.14.
Bng 3.14: Kt qu c lc c/H5N1
Clade 7 trên gia cm
ng vt
thí
nghim
S
ng
(con)
Cht
(con)
T
100
1.7
6,2
Vt
10
0
0
0
0
Ngan
10
0
0
0
0
V A/Chicken/Vietnam/NCVD-016/2008) gây cht 100% s gà thí
nghim. Theo tiêu chí v c lc ca virus cúm gia cm ca T chc Thú y th gii-
OIE, c lng tiêu chí phân loi
ca OIE và kt qu ng vi các ch th c lc m phân t ca vùng
Thi gian gây chng vt thí nghim trung bình - MDT (Mean death time) c
i v
2.
C. Tt c s vu còn
sng sau khi kt thúc thí nghi toàn b s vu khe
mng và không th hin bt k triu chng l nào trong sut 2
tun theo dõi.
Quan sát gà cht có hing phù nh
khám các bng gut huy
không lông xut huyu, não sung huyt, phi viêm,
B
A/chicken/Vietnam/NCVD-016/2008
Gà
Ngan
Stt
Ct
vòng)
)
Ct
Ct
1
25.3
++
Âm tính
-
27.8
++
2
21.7
+++
32.6
+
7
22.5
+++
Âm tính
-
Neg
8
19.9
++++
Âm tính
-
36.1
+
9
20.6
+++
Âm tính
-
31.7
+
10
25.2
++
Âm tính
-
31.3
+
ng lây nhim cao vi bi ng hô hp, còn có kh ng gây tn
c ng vt cm nhim gi là kh
nhi tng. Chíc tính này là s phân bit v kh c
lc cc lc lc thp.
ng virus trong ph tng bng phn ng Realtime RT-PCR
tng c
A/Chicken/Vietnam/NCVD-016/2008, chúng tôi thu thp mu ph t
) và xét nghim bRT-c hiu cho
gen H5/HA ca virus cúm A/H5N1.
20
RRT-
-
.
-3.17.
-
/H5N1 clade 7 (NCVD).
Gan
Ct
Log
10
19.4
5.7
18.1
6.2
19.7
5.7
22.5
4.8
24.6
4.2
2
14.5
7.2
21.4
5.1
22.7
4.7
20.2
5.5
22.6
4.8
27.9
3.2
32.4
1.8
3
15.2
7.0
17.7
6.3
1.8
0.6
3.6
1.1
1.9
0.6
2.8
0.9
4.1
1.2
nh
Kt qu3.11. 3.11. Biu din m nhim virus ca các loi ph tng
qua xét nghim RRT-PCR(chuyi sang log
10
)
nh tích vi th gây ra b/H5N1Clade 7
ph t
a bnh tích vi th hin rõ là hich rt
nng tt c i tng vi dch phù bao quanh thành mch; t bào ni mc
b hot t, bong tróc; các t i thc bào bao quanh thành mch.
u này gii thích lý do tt c t
u b xut huy . P
.
Não
3.13
.
3.3.6. nh c tính kháng nguyên
Kt qu phn ng HI chéo gia virus và kháng huyt thanh ca các clade virus
A/H5N1 khác nhau cho thy có mt s ng cao gia các virus và kháng huyt
ng chng (hiu giá HI n ng chéo hoc phn ng
chéo có hiu giá rt thp gi các clade khác nhau (Bng 3.19).
Kháng huyc ch t ba chng virus khác nhau
thuc nhóm B, và mt chng thuc dc hin phn ng HI
chéo v /H5N1ca các clade khác. Trong khi kháng huyt
thanh kháng virus A/Chicken/Vietnam/NCVD-016/2008 không có phn ng vi các
virus clade 1 hoc clade 2.3.4, thì có phn ng chéo vi ma nhóm B
m hn chn ng chéo v
A. Hi ng kháng huyt thanh kháng virus cúm A/Chicken/Vietnam/NCVD-
016/2008 có phn ng chéo rt hn ch (hiu giá HI thp) hoc không có phn ng
chéo v/H5N1khác thuc clade 7 cho thy s ng v
mt kháng nguyên gi/H5N1trong cùng clade 7 là rt thp.
22
Bng 3.19. Kt qu c tính kháng nguyên c/H5N1
clade 7 phân lc bng phn ng HI
Clade
160
<10
<10
<10
A/Anhui/1/05
2.3.4
20
<10
1280
160
20
<10
<10
A/chicken/Vietnam/NCVD-035/2008
2.3.4
<10
<10
80
320
<10
<10
<10
A/Chicken/Vietnam/NCVD-016/2008
7
<10
<10
<10
10
640
<10
<10
<10
160
40
10
<10
<10
A/duck/Vietnam/NCVD-160/2008
2.3.4
<10
<10
160
80
10
10
<10
A/chicken/Vietnam/NCVD-185/2008
2.3.4
<10
<10
320
80
10
10
<10
A/duck/Vietnam/NCVD-186/2008
2.3.4
<10
<10
320
<10
3.3.7. o h ca vacxin Re-i v
.
Gà c tiêm phòng vacxin vacxin H5N1 Re-1 lúc 14 ngày tui và công
c lúc 4 tun sau khi tiêm vacxin. S ng gà tiêm phòng vacxin là 10 con và
s i chng không tiêm vacxin c, toàn b s gà
(c lô tiêm vacxin i chc ly máu và kim tra kháng th.
Cc tin hành ti khu chuc an toàn sinh hc
ca Trung tâm Chc vi liu
10
6
TCID50ng nh m trong vòng 10 ngày, ghi li
m lâm sàng hàng ngày và tính t l sng cht nh bo h. Kt
qu chi tit theo dõi thí nghi u lc vacxin i vi virus
A/Chicken/Vietnam/NCVD-c trình bày bng 3.20.
S c tiêm vacxin H5N1 Re-1 sng sót 100% c,
i cht trong vòng t ngày th n ngày th by
c. Kt qu này cho thy vacxin H5N1 Re-o h cho gà
chng l7.
-
10 sau khi công
va
23
virus va
.
Bng 3.20. Kt qu theo dõi thí nghi
0
0
0
0
0
VX 2
8
9
0
0
0
0
0
0
0
0
VX 3
7
10
0
0
1
1
1
0
0
0
VX 4
8
10
VX 7
8
10
0
0
0
0
0
0
0
0
VX 8
7
10
0
0
0
0
0
0
0
0
VX 9
8
9
0
0
0
0
0
0
0
2
2
3
-
0
0
1
2
3
-
0
0
2
3