1
NguyӉn Đҳc Trung và cӝng sӵ
Bӝ môn Vi sinh
Trưӡng Đҥi hӑc Y Dưӧc Thái Nguyên
HIӊU QUҦ CӪA KӺ THUҰT PCR TRONG
CHҬN ĐOÁN LAO PHӘI
TRƯӠNG ĐҤI HӐC Y DƯӦC THÁI NGUYÊN
HӜI NGHӎ KHOA KHOA HӐC & CÔNG NGHӊ Y DƯӦC MIӄN NÚI PHÍA BҲC-01/2012
2
Phҫn I. ĐҺT VҨN Đӄ
 Ӣ ViӋt Nam, bӋnh lao là mӝt bӋnh truyӅn nhiӉm nһng
nӅ.
 ViӋt Nam: 12/22 quӕc gia có sӕ bӋnh nhân lao cao
nhҩt thӃ giӟi.
 Hàng năm có 18.000 BN lao (6.000 BN lao đa kháng
thuӕc và 7.400 BN lao/HIV), khoҧng 60% BN ưӟc tính là
đưӧc phát hiӋn.
 Tăng cưӡng phát hiӋn các trưӡng hӧp mҳc lao và các
thӇ bӋnh lao là ưu tiên hàng đҫu trong công tác chӕng
lao.
3
 Tҥi ViӋt Nam, chҭn đoán lao phәi chӫ yӃu dӵa vào
nhuӝm soi đӡm tìm AFB.
 Lao phәi AFB (-) cҫn sӵ hӛ trӧ cӫa nuôi cҩy/phim
Xquang phәi chuҭn.
 Nuôi cҩy có đӝ đһc hiӋu cao nhưng thӡi gian cho kӃt
quҧ lâu (6-8 tuҫn).
 PCR là mӝt công cө có giá trӏ trong chҭn đoán.
 Kӻ thuұt PCR vӟi thưӡng quy riêng đã đưӧc sӱ dөng
đӇ chҭn đoán và phát hiӋn sӟm nhӳng trưӡng hӧp mҳc
lao.

Kӻ thuұt PCR phát hiӋn vi khuҭn lao
Mүu đӡm
Xӱ lý
Tách chiӃt & tinh sҥch
DNA
PCR đơn mӗi
ĐiӋn di & kiӇm tra sҧn phҭm
trên gel agarose 1%
(gen IS6110)
Trình tӵ gen IS6110
ThiӃt kӃ primer
INS1 ± INS2
8
So sánh và xác đӏnh hiӋu quҧ phát hiӋn vi khuҭn lao:
- Phương pháp nuôi cҩy đưӧc sӱ dөng như là chuҭn
vàng khi xác đӏnh hiӋu quҧ phát hiӋn vi khuҭn lao cӫa
phương pháp nhuӝm soi và PCR.
- HiӋu quҧ chҭn đoán cӫa mӛi phương pháp đưӧc xác
đӏnh dӵa trên đӝ nhҥy, đӝ đһc hiӋu, giá trӏ dӵ báo dương
tính và giá trӏ dӵ báo âm tính.
9
Phҫn III. KӂT QUҦ VÀ THҦO LUҰN
Bҧng 3.1. KӃt quҧ phát hiӋn vi khuҭn lao trong đӡm
KӃt quҧ
Nhuӝm soi
n (%)
Nuôi cҩy
n (%)
PCR
n (%)

(+)
83 0 83
(-)
4 30 34
Tәng sӕ
87 30 117
- Đӝ nhҥy: 95,4% - GTDBDT: 100%
- Đӝ đһc hiӋu: 100% - GTDBAT: 88,24%
 4 trưӡng hӧp nuôi cҩy (+) nhưng PCR (-)
p khuyӃt gen IS6110
Sӱ dөng Multiplex PCR
12
Hình 3.1. ĐiӋn di đӗ gen IS6110 trên gel agarose 1%
IS6110 (249bp)
1 2 3 4 5 6 7
13
Hình 3.2. Vi khuҭn AFB trên tiêu bҧn nhuӝm Ziehl-Neelsen
14
Hình 3.3. Vi khuҭn lao mӑc trên môi trưӡng Ogawa
15
KӂT LUҰN
HiӋu quҧ cӫa phương pháp nhuӝm soi và PCR đơn mӗi
trong phát hiӋn vi khuҭn lao M. tuberculosis:
 Phương pháp nhuӝm soi:
Đӝ nhҥy: 56,32%
Đӝ đһc hiӋu: 73,33%
GTDBDT: 85,96%
GTDBAT: 36,67%
 Phương pháp PCR:
Đӝ nhҥy: 95,4%