CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
Định nghĩa
Kỹ thuật sắc ký là kỹ thuật tách, phân
ly các cấu tử thành phần trong hỗn hợp
dựa trên sự khác nhau về đặc tính hoá
lý của chúng
CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
Nguyên lý
Hợp chất cần phân tích được cho tương tác với
hai pha khác biệt gọi là pha tĩnh và pha động.
Mẫu phân tích chứa 1 hay nhiều cấu tử, khi tiếp
xúc với pha tĩnh, mỗi cấu tử có ái lực đối với pha
tĩnh khác nhau, từ đó có phân bố khác nhau
giữa pha tĩnh và pha động và được pha động
tách ra khỏi pha tĩnh với tốc độ khác nhau. Quá
trình phân ly các cấu tử khỏi pha tĩnh bởi pha
động gọi là quá trình triển khai sắc ký
CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
Một số khái niệm cơ bản
Pha tĩnh và Pha động:Tất cả các hệ sắc ký đều
cấu tạo từ 2 pha: pha tĩnh và pha động.
+ Pha tĩnh: không di chuyển, có thể là chất rắn,
chất lỏng, hay 1 pha hỗn hợp rắn – lỏng
+ Pha động: Chuyển động, pha động thường
chảy trên pha tĩnh hoặc đi xuyên qua pha tĩnh,
có thể là chất lỏng hay chất khí
CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
Một số khái niệm cơ bản
Hệ số phân bố:
Hệ số phân bố của 1 chất A trong 1 hỗn hợp dung dịch
gồm 2 dung môi I và II, tại 1 nhiệt độ, là 1 hằng số,

chất lỏng (SK hấp phụ)
•
2. Sự phân bố cân bằng giữa pha tĩnh là chất lỏng hay bán lỏng với
pha động là chất lỏng (SK giấy)
•
3. Sự phân bố cân bằng giữa pha tĩnh là chất lỏng và pha động là
chất khí (SK khí)
•
4. Cân bằng trao đổi ion giữa pha tĩnh là nhựa trao đổi ion và pha
động là chất điện ly (SK trao đổi ion)
•
5. Cân bằng giữa pha lỏng ở bề mặt bên trong và bề mặt bên ngoài
của hạt gel xốp (SK hạt gel hay SK rây phân tử)
•
6. Liên kết cân bằng giữa 1 đại phân tử và 1 phân tử nhỏ do đặc
tính sinh học (SK ái lực)
CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
Phân loại các phương pháp sắc ký
•
Dựa vào bản chất hoá lý của quá trình:
+ sắc ký phân bố
+ sắc ký hấp phụ
. Dựa vào tính chất kỹ thuật:
+ sắc ký đơn giản
+ sắc ký cột
+ sắc ký khí
+ sắc ký lỏng cao áp
CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
Các phương pháp sắc ký đơn giản
•

Các phương pháp sắc ký đơn giản
Ứng dụng sắc ký bản mỏng:
•
Phân tích định tính
•
Phân tích định lượng
•
Tách cấu tử thành phần khỏi hỗn hợp
CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
•
Sắc ký giấy
CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
Sắc ký giấy
CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
Sắc ký cột
CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
Sắc ký cột
•
Sắc ký cột hấp phụ: pha tĩnh là 1 chất rắn hấp phụ, còn pha động là
1 dung dịch rửa giải
•
Sắc ký cột trao đổi ion: các cấu tử mẫu mang điện có khả năng
tương tác tĩnh điện 1 cách thuận nghịch với pha tĩnh là các hạt
nhựa mang điện trái dấu, còn pha động là các dung dịch điện ly
CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
Sắc ký cột
•
Sắc ký cột hấp phụ
CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
Sắc ký cột hấp phụ