Phân lập và biểu hiện gen mã hóa protein vỏ p10 của virus gây bệnh lúa lùn sọc đen ở việt nam - Pdf 28


M U 1
CHNG 1- TNG QUAN 3
1.1. GII THIU CHUNG V VIRUS H 3
1.2. BDV 5
1.2.1. B 5
ng Nam 11
N GEN P10   15
N SRBSDV 17
1. NG DNG THC TIN 18
1.5.1. Gii thiu chung v   18
1.5.2. Mt s ng dng ch  21
CHNG 2- VT LI 24
2.1. VT LIT 24
2.1.1. Vt lim 24
t 24
2.1.3. Thit b 25
2.2. PHU 25
c hiu bng k thut PCR 25
n gel agarose 26
i DNA bng enzyme DNA ligase 26
2.2.4. Bin np vi khun E. coli 27
t DNA plasmid t t n 27
2.2.6. Tinh sch DNA t gel agarose 28
2.n phm PCR 29
2.2.8. Phn ng ct DNA bng enzyme ct gii hn 29
2.2.9. Gi n DNA 30
a SDS 31
y E. coli n b dch chit t  32
2.2.12. Tinh s hp qua ct Ni
2+





i li cc ti PGS.TS. Phi
TS. Phan Tu nhi th bng dn,
 c t 
 , anh ch em trong B nh
hc P Thc vt, Vin Di truyng d
 t nhiu trong thi gian i B 
   i li c       c Khoa Sinh hc,
i hc Khoa hc T nc bi  
c vng kin th
thi gian hc tp tng.
Cu i li cng
u kin tt nh  lun  

 03 
H  



Bng 8n phn ng ct gii hn pGEMT/P10 28a
Bng 9n phn ng ct gii hn pET28a/P10
Bng 10u kin cm ng biu hi hp
Bng 11: Kt qu 
492
th  c hiu c bng phn ng ELISA
Bng 12: Kt qu 
492
ca phn u ry.






Triu chng c nhim b
Rng Sogatella furcifera truyn SRBSDV












BamHI/XhoI
2 vector pET28







P10
13: Bin n h

P10 E. coli DH5
14: in di sn phm PCR t n lc vi cp mi T7-Fw/T7-Rv
15: in di sn phm PCR kim tra plasmid pET28a/P10
16: in di sn phm ct gii h hp pET28a/P10
17: Bin np vector pET28a/P10 n E. coli Rossetta
18n di SDS-PAGE kim tra s t ca protein P10  hp trong
u kin chun
: Kim tra s t ca protein P10  hu ki
v nhi i gian
20: in di sn phm sau tinh sch dch chit t 
21: King min dch ct thanh bng thn dch

kDa Kilodalton
LB ng Luria Bertani
 
ORF c m (open reading frame)
PCR Phn ng chui polymerase (polymerase chain reaction)
SDS-PAGE Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide
SRBSDV 





strike
dwarf virus)
TAE Tris base  Acetic - EDTA
TBE Tris base  Axit Boric  EDTA
TEMED N,N,N'N'-Tetramethyl-Ethylenediamine 1


 (Oryza sativa L.) c i nh
cc quan trng cung cp nguc cho khong  th gii.  c
ta c ch lc n vi p
ca khong 80% s h . Trong nhng
i mt vi nhic, nh
hc bidch bnh x n sn
xuo. m v  u, Vi ng di
chuyn ca nhiu lon dch; dnh virus 




 P10  




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



 , 




 c hi 




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


  do vi thuc
n bin ph i c
b c tt.
Trong sn xup  khoi cho thc
v khong 16 loi virus
ph lc 1). Trong s , Rice hoja blanca virus
(m ti Nam M), Rice giallume virus (m
b t Rice stripe necrosis virus (m t
n thy tc tr, ch
i nghim tr binh
), bnh Tungro, bm thi
[7, 11-13, 16].
Ngh tr Vii mt vt dch bnh
virus din bin rt phc tp. Trong khi d
n  mit  nh min B
phi mt vi dch SRBSDVy, ng u bnh virus h
n hin nay cn ph kt hi 
i ng t o sn xu
hinh t  hiu qu.


nh bn cht h gen, mc
 ng di truy t bi 
 chng
mn t hiu qu nh d

4

ngh u v virus  Vit Nam hin mi tp trung  n
 b nh, dii truyn

spherical virus-RTSV), tungro (Rice tungro bacilliform virus RTBV), b

5

(Rice dwarf virus-      Rice gall dwarf virus-RGDV) vi s
 cho hu n b u virus
h Vit Nam trong th 
c vi din bin phc tp ca dch virus hic biSRBSDV
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1.2.1.3. Đặc điểm triệu chứng bệnh lúa lùn sọc đen
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1.2.2.1. Tình hình nghiên cứu virus gây bệnh lúa LSĐ ở Việt Nam
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(SRBSDV).
1.2.2.2. Đặc điểm sinh học của SRBSDV
T t bt hiO. sativa) ti mt
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Trích đoạn CÁC PHƢƠNG PHÁP CHẨN ĐOÁN VÀ PHÁT HIỆN SRBSDV KHÁNG THỂ ĐA DÒNG VÀ ỨNG DỤNG THỰC TIỄN Một số ứng dụng của kháng thể đa dòng Điện di protein trên gel polyacrylamide có chứa SDS Phƣơng pháp thẩm tách miễn dịch (Western blotting)
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