Nghiên cứu định lợng đồng thời
adenosin và allopurinol trong
dung dịch wisconsin - a bằng phơng
pháp quang phổ cộng tính
bộ quốc phòng
Học viện quân y
*****
Ngời hớng dẫn: TS. Phan Văn Bình
Thực hiện: SV. Nguyễn Hồng Sơn Dợc 7
Báo cáo khóa luận TN DS Đại học
- Trong y học hiện đại ghép tạng là phơng pháp chữa bệnh hữu
hiệu.
- Dung dịch Wisconsin V là dung dịch để rửa và bảo quản tạng
ghép dạng Wisconsin.
- Dung dịch Wisconsin V đợc đóng gói thành 2 đơn vị thành
phẩm riêng biệt.
-Trong dung dịch Wisconsin A adenosin và allopurinol là các
hợp chất hữu cơ có hàm lợng nhỏ nhng có vai trò quan trọng.
đặt vấn đề
Chúng tôi chọn đề tài:
Nghiên cứu định lợng đồng thời adenosin và
allopurinol trong dung dịch Wisconsin - A bằng phơng
pháp quang phổ cộng tính với mục tiêu sau :
1. Xây dựng phơng pháp định lợng đồng thời adenosin và
allopurinol trong dung dịch Wisconsin - A bằng phơng pháp
quang phổ cộng tính.
2. Khảo sát độ lặp lại và độ đúng của phơng pháp.
đặt vấn đề
I. Tæng quan
1.1.Thµnh phÇn & nång ®é c¸c chÊt trong dd Wisconsin - A.
MgSO

chất riêng rẽ có cùng nồng độ nh trong hỗn hợp. Trờng hợp đơn giản
nhất là hỗn hợp gồm hai chất, ta có : A
hh
= A
1
+ A
2
Chọn hai bớc sóng
1
,
2
và đo độ hấp thụ của hỗn hợp ở 2 bớc sóng đó
Tại
1
: A
hh
1
= E
1
1
C
1
+ E
2
1
C
2
; Tại
2
: A

E
2
2
-A
2
E
2
1

x 100;
C
2
=
A
2
E
1
1
-A
1
E
1
2

x 100;
2.1. Vật liệu nghiên cứu.
2.1.1. Nguyên liệu, hoá chất, dung môi :
- Adenosin ( C
10
H

chuẩn hỗn hợp adenosin và allopurinol, dung dịch chuẩn hỗn hợp có
thêm các thành phần khác.
Xem xét phổ hấp thụ của các dung dịch thành phần khác trong dung
dịch Wisconsin A. So sánh phổ hấp thụ của hai hỗn hợp.
2.3.3. Khảo sát, chọn cặp bớc sóng thích hợp để định lợng đồng
thời adenosin và allopurinol trong d dịch Wisconsin - A.
Trên cơ sở phổ UV của adenosin và allopurinol trong dung dịch
đệm phosphat pH = 7,0 chọn 4 bớc sóng tơng ứng với cực đại hấp
thụ của adenosin và allopurinol là 205, 207, 250, 260nm.
đo độ hấp thụ của tất cả các mẫu tại các bớc sóng 205, 207, 250,
260nm. Lấy giá trị độ hấp thụ quang trung bình của adenosin và
allopurinol ở từng bớc sóng
Tính nồng độ adenosin và allopurinol trong hỗn hợp theo công
thức :
= E
1
1
E
2
2
E
1
2
E
2
1
Chọn cặp bớc sóng thích hợp để định lợng đồng thời adenosin và
allopurinol.
C
Ad

2.3.4.1. đề xuất phơng pháp.
Dựa vào kết quả nghiên cứu ở các mục 2.3.1, 2.3.2, 2.3.3 để
đề xuất phơng pháp định lợng đồng thời adenosin và
allopurinol trong dung dịch Wisconsin - A.
2.3.4.2. Khảo sát ảnh hởng của độ lệch tỷ lệ nồng độ
adenosin và allopurinol đối với kết quả phân tích.
Pha 2 dung dịch hỗn hợp adenosin và allopurinol chuẩn có độ
lệch nồng độ là 11/0,9 & 9/1,1. định lợng theo phơng pháp đã
đề xuất.
2.3.4.3. Khảo sát độ lặp lại của phơng pháp.
độ lặp lại của phơng pháp đợc xác định bằng độ lệch chuẩn t-
ơng đối của 5 mẫu đo trên cùng 1 chai WA ( lô 20/10/04 ) và so
sánh nồng độ trung bình tìm thấy trên một chai khác cùng lô,
định lợng vào ngày hôm sau.
2.3.4.4. Khảo sát độ đúng bằng phơng pháp thêm chuẩn.
độ đúng của phơng pháp đợc xác định bằng phơng pháp thêm
một lợng chính xác adenosin và allopurinol chuẩn vào hai mẫu
thử WA trong cùng lô 20/10/04 (đã đợc xác định hàm lợng
adenosin & allopurinol ở mục khảo sát độ lặp lại ).
đánh giá độ đúng dựa vào độ sai số tơng đối.
2.4. Phơng pháp xử lý số liệu.
Các số liệu đợc xử lý bằng phơng pháp toán thống kê dùng
trong y sinh học.
Thông qua các đặc trng: Giá trị trung bình, độ lệch chuẩn, độ
lệch chuẩn tơng đối, t tính toán
3.1. Kết quả khảo sát ảnh hởng của pH đến độ hấp thụ quang
phổ của dung dịch adenosin và allopurinol
3.1.1.Đối với adenosin.
nm
0.0

0.6
Abs
200.0 225.0 250.0 275.0 300.0 325.0 350.0 375.0 400.0
260

207


226
H×nh 3.2. Phæ hÊp thô cña dung dÞch adenosin ë pH = 6,5.
nm
0.0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
Abs
200.0 225.0 250.0 275.0 300.0 325.0 350.0 375.0 400.0
260

207


226
H×nh 3.3. Phæ hÊp thô cña dung dÞch adenosin ë pH = 7,0.
nm
0.0
0.1


226
H×nh 3.5. Phæ hÊp thô cña dung dÞch adenosin ë pH = 8,0.
0.0
0.25
0.5
0.75
1.0
1.25
Abs
200.0 225.0 250.0 275.0 300.0 325.0 350.0 375.0
400.0
nm
250

205


230
3.1.2. §èi víi allopurinol
H×nh 3.6. Phæ hÊp thô cña dung dÞch allopurinol ë pH = 6,0
0.0
0.25
0.5
0.75
1.0
1.25
Abs
200.0 225.0 250.0 275.0 300.0 325.0 350.0 375.0 400.0
nm

200.0 225.0 250.0 275.0 300.0 325.0 350.0 375.0
400.0
nm
250

205


230
H×nh 3.9. Phæ hÊp thô cña dung dÞch allopurinol ë pH = 7,50
0.0
0.25
0.5
0.75
1.0
1.25
Abs
200.0 225.0 250.0 275.0 300.0 325.0 350.0 375.0 400.0
nm
250

205


230
H×nh 3.10. Phæ hÊp thô cña dung dÞch allopurinol ë pH = 8,0
0.0
0.5
1.0
1.5

nm