NGHIêN CứU P DụNG Kỹ THUậT QF-PCR TRONG
chẩn đoN MộT Số hội CHứNG BấT THờNG NHiễM SắC THể

Triu Tin Sang*; Nguyn Duy Bc*; Trn Vn Khoa*;

Trn Ngc Anh*; ng Tin Trng*
Tóm tắt
Chỳng tụi nghiờn cu ỏp dng v ci tin quy trỡnh chn oỏn cỏc hi chng bt thng s
lng nhim sc th (NST) bng k thut QF-PCR, ng thi ỏnh giỏ chớnh xỏc ca k thut.
Phõn tớch 9 mu dch i mc cỏc bnh bt thng NST, 23 mu mỏu ca nhng tr mc hi chng
Down v 10 mu dch i bỡnh thng (mu chng) bng cỏc k thut multiplex PCR, k
thut in di
hunh quang trờn mỏy c trỡnh t t ng ABI 3130 XL, k thut phõn tớch s liu kt qu in di
hunh quang bng phn mm GernerMaper ID 3.2. ó xõy dng c quy trỡnh chn oỏn bt
thng s lng NST cú chớnh xỏc 100% so vi k thut di truyn t bo. K thut QF-PCR cú
nhng u im ni bt, chớnh xỏc cao, giỏ thnh thp v kh nng ỏp dng r
ng trờn quy mụ ln,
do ú cú th trin khai ỏp dng ti cỏc c s y t iu kin trờn c nc.
* T khoỏ: Hi chng bt thng nhim sc th; K thut QF-PCR.

STUDY OF APPLYING QF-PCR ASSAY FOR DETECTION
OF MAJOR CHROMOSOME NUMERICAL DISORDERS

Summary
We have studied this thesis aimed: to apply and adjust this technique in prenatal diagnosing
chromosome numerical disoders; to evaluate the detection power and accuracy of this approach.
The Quantitative fluorescent polymerase chain reaction (QF-PCR) tests were performed on a total of
9 anormal
amniocentesis samples, 23 blood samples and 10 control sample. The results of this
investigation provided clear evidence that the QF-PCR assays are powerful adjuncts to conventional
cytogenetic techniques and can be applied for the rapid and accurate prenatal diagnosis of the most

bt thng s
lng NST X, Y bng k
thut QF-PCR.
- ỏnh giỏ k thut QF-PCR trong chn
oỏn cỏc hi chng trờn.

đối tợng và phơng pháp
nghiên cứu

1. i tng nghiờn cu.
9 mu dch i thu thp t Bnh vin T
D ca nhng ph n mang thai mc cỏc
hi chng trisomy 13, 18, 21 Klinefelter (XXY)
v Turner (X0), c chn oỏn xỏc nh
bng k thut FISH.
23 mu mỏu ca nhng tr mc hi chng
Down c chn oỏn sau sinh bng k
thut Karyotype ti Trung tõm Sao Mai.
10 mu chng l dch i ca ph
n
mang thai bỡnh thng.
2. Phng phỏp nghiờn cu.
- Phng phỏp chc hỳt nc i.
- Tỏch chit ADN v lu tr ADN t dch i.
- Thit k mi c hiu cho tng on
STR v ỏnh du hunh quang.
- K thut Multiplex PCR vi cỏc cp mi
hunh quang.
- in di hunh quang trờn mỏy c trỡnh
t t ng ABI 3130XL.

H2O 1 àl
Tng th tớch 7àl
Chu trỡnh nhit phn ng PCR:
Hoạt
hoá taq
Biến
tính
Gắn
mồi
kéo
dài
chuỗi
kéo dài
chuỗi
cuối
Duy
trì
1 chu k 30 chu k 1 chu k
95C
(15 phỳt)
95C
(40 giõy)
60C
(1 phỳt,
30 giõy)
72C
(40 giõy)
60C
(30 phỳt)
4 -

d
ịch ối). Những trường hợp này đều có kết
quả chẩn đoán xác định tại Khoa Di truyền,
Bệnh viện Từ Dũ TP.HCM.
Kết quả phân tích những hình ảnh điện
di huỳnh quang trên phần mềm chuyên
dụng cho kết luận chính xác mẫu bệnh
trisomy 13, 18, 21, XXY và XO.
Bảng 2: Độ đặc hiệu của kỹ thuật QF-
PCR so với kỹ thuật chẩn đoán NST.
Kü thuËt di
truyÒn tÕ bµo
Kü thuËt
QF-PCR

ThÓ bÊt
th−êng
Số ca Tỉ lệ Số ca Tỷ lệ
Trisomy 21
28/28 100% 28/28 100%
Trisomy 13,18
3/3 100% 3/3 100%
XXY, XO
3/3 100% 3/3 100%

Sử dụng kỹ thuật QF-PCR cho kết quả
chẩn đoán tương đương như kỹ thuật di
truyền tế bào với độ chính xác 100%. Kết
quả này bổ sung số liệu khoa học cho việc
áp dụng kỹ thuật QF-PCR trong chẩn đoán

Ther. 2006, 21 (4), pp.326-31.
4. Haissam Rahil1, Je´rome Solassol, Christophe Philippe, et al. Rapid detection of common autosomal
aneuploidies by quantitative fluorescent PCR on uncultured amniocytes.
5. Moon-Hee Lee, Hyun-Mee Ryu, Do-Jin Kim, Bom-Yi Lee, Eun-Hee Cho, et al. Rapid prenatal
diagnosis of down syndrome using quantitative fluorescent PCR in uncultured amniocytes. Eur J Hum
Genet. 2002, Aug, 10 (8), pp.462-426.
6. Lothar Kochhan, Karsten R. Held, et al. Detection of aneuploidy in chromosomes X, Y, 13, 18
and 21 by QF-PCR in 662 selected pregnancies at risk. Mol Hum Reprod. 2000, Sep, 6 (9), pp.855-
860.
7. Onay H, Ugurlu T, Aykut A, Pehlivan S, Inal M, Tinar S, Ozkinay C, Ozkinay F. Rapid prenatal
diagnosis of common aneuploidies in amniotic fluid using quantitative fluorescent polymerase chain reaction.
Gynecol Obstet Invest. 2008, Apr 29, 66 (2), pp.104-110.