B GIÁO DC VẨ ẨO TO
TRNG I HC M TP. HCM


BÁO CÁO KHÓA LUN TT NGHIP

Tên đ tài:
PHÂN LP VÀ KHO SÁT HOT TÍNH
KHÁNG NM, KHÁNG KHUN CA VI
SINH VT NI SINH TRONG CÂY MUNG
TRÂU (Cassia alata L.)

KHOA: CÔNG NGH SINH HC
CHUYÊN NGÀNH: NÔNG NGHIP - C

t Linh
SVTH : Phm Th Nguyt Hng
MSSV: 1053010210
Khóa: 2010  2014
Tp. H Chí Minh, tháng 05

LI C

 hoàn thành đ tài này, em xin gi li cm n đn các Thy Cô khoa Công Ngh
Sinh Hc, Trng i hc M Thành ph H Chí Minh đã ging dy và truyn đt
kin thc cho em trong sut nhng nm va qua đ em làm tt đ tài khóa lun này.
Em xin gi cm n sâu sc ti cô Dng Nht Linh đã tn tình hng dn, ch bo
em trong sut thi gian em thc hin đ tài. Em xin cm n thy Nguyn Vn Minh,
ngi đã truyn đt cho chúng em nhiu kinh nghim quý báu.
Em xin cm thy an Duy Pháp, ch Võ Ngc Yn Nhi và ch Nguyn Th M
Linh, nhng ngi anh, ngi ch luôn ng h, giúp đ em trong lúc làm đ tài.

Hình 3.7 Cách b trí mi kháng 31
Hình 3.8 Phân lp vi nm ni sinh trên PDA có b sung kháng sinh
Chloramphenico41l 0,05% (A), phân lp vi khun ni sinh trên TSA (B) i
chng (C). 43
Hình 3.9 Cy ria vi khun ni sinh trên NA (A), cnh ca si nm trên PDA (B).43
Hình 3.10 Hình nh nhum Gram ca mt s chng vi khun ni sinh. 46
Hình 3.11 nh tính kh S.typhi ca mt s chng vi khun ni sinh 48
Hình 3.12 nh tính kh Pseudomonas aeruginosa ca mt s chng vi
nm ni sinh 51
Hình 3.13 nh tính kh m ca 4 chng vi khun ni sinh 54
Hình 3.14 nh tính kh m ca chng NR1 ni sinh 57
Hình 3.15 Kt qu quan sát vi th ca chng vi nm NR1 60
KHÓA LUN TT NGHIP DANH MC

SVTH: PHM TH NGUYT HNG ii
DANH MC BNG
Bng 3.1 Kt qu i th chng vi khun ni sinh 40
Bng 3.2 Kt qu i th nm ni sinh 41
Bng 3.3 Kt qu quan sát vi th vi khun ni sinh 44
Bng 3.4 Kt qu kh  háng vi khun gây bnh ca vi khun ni sinh t cây
mung trâu 47
Bng 3.5 ng kính vòng kháng khun ca 3 chng vi khun ni sinh t cây mung
trâu và Salmonella Typhi 48
Bng 3.6 Kt qu kh    n gây bnh ca vi nm ni sinh t cây
mung trâu 50
Bng 3.7 ng kính vòng kháng khun ca 3 chng vi nm ni sinh t cây mung
trâu và Pseudomonas aeruginosa 51
Bng 3.8 Kt qu nh tính kh m gây bnh ca vi khun ni sinh t
cây mung trâu 52
Bng 3.9 ng kính vòng kháng nm gây bnh ca vi khun ni sinh t cây mung

NA Nutrient Agar
P.aeruginosa Pseudomonas aeruginosa
PDA Potato Dextrose Agar
S. aureus Staphylococcus aureus
S.typhi Salmonella typhi
T. mentagrophytes Trichophyton mentagrophytes
T. rubrum Trichophyton rubrum
TSA Trypticase Soy Agar
KHÓA LUN TT NGHIP MC LC

SVTH: PHM TH NGUYT HNG v
MC LC
DANH MC HÌNH NH i
DANH MC BNG ii
DANH MC BIU  iii
DANH MC CÁC T VIT TT iv
MC LC v
T VN  1
PHN 1: TNG QUAN TÀI LIU 4
1. VI SINH VT NI SINH VÀ CÂY MUNG TRÂU (Cassia alata L.) 5
1.1. c v vi sinh vt ni sinh 5
1.2. Tình hình nghiên cu trên th gii 6
1.3. Tình hình nghiên cc 7
1.4. c v cây mung trâu (Cassia alata L.) 7
2. TNG QUAN V VI KHUN GÂY BI 8
2.1. Staphylococcus aureus 8
2.2. Escherichia coli 9
2.3. Salmonella typhi 10
2.4. Pseudomonas aeruginosa 11
3. TNG QUAN V VI NM GÂY BI 12


SVTH: PHM TH NGUYT HNG vii
3.1. i th 40
3.1.1. Vi khun ni sinh 40
3.1.2. Vi nm ni sinh 41
3.2. Quan sát vi th 44
3.3. Kt qu th i kháng gia vi sinh vt ni sinh và vi khun gây bnh. 46
3.3.1. Kt qu th hot tính kháng khun ca vi khun ni sinh t cây mung
trâu 46
3.3.2. Kt qu th hot tính kháng khun ca vi nm ni sinh t cây mung trâu
49
3.4. Kt qu th i kháng gia vi sinh vt ni sinh và vi nm gây bnh 52
3.4.1.Kt qu th hot tính kháng vi nm ca vi khun ni sinh t cây mung trâu .
52
3.4.2.Kt qu th hot tính kháng vi nm ca vi nm ni sinh t cây mung trâu 56
3.5. Kt qu nh danh sinh hóa 58
3.5.1. Chng R5 58
3.5.2. Chng L10 59
3.6. Kt qu  chng vi nm NR1 60
3.7. Tho lun 60
PHN 4: KT LUN VÀ KIN NGH 62
4. KT LUN VÀ KIN NGH 63
4.1. Kt lun 63
4.2. Kin ngh 63
TÀI LIU THAM KHO 65
PH LC 70
KHÓA LUN TT NGHIP T V

SVTH: PHM TH NGUYT HNG 1
T VN 

mc lan rng khi tit nóng. Trong Y hc c truyn, mung trâu có hai
KHÓA LUN TT NGHIP T V

SVTH: PHM TH NGUYT HNG 3
công dng chính là cha bnh ngoài da và làm thuc nhun tràng (Cây mung trâu
cha bnh ngoài da và làm thuc nhun tràng, 2012). Hin nay các nghiên cu còn
cho thy kh n ca dch chit lá mung trâu (Cassia alata L.) (Võ
Th       c mt flavonglucosid là kaempferol-3-O-
sophorosid t dch chit cn ca lá cây mung trâu (Planichamy và Nagarajan,
2007). Vì thi ng rt thích h nghiên cu v vi khun ni
sinh vì mung trâu là mt loi cây hoang di, nc trn s
di phát trin rt tu này cho thy kh n
ni sinh bên trong cây mung trâu là rt cao.
T n hành thc hin  tài nghiên cPHÂN LP VÀ
KHO SÁT HOT TÍNH KHÁNG NM, KHÁNG KHUN CA VI SINH
VT NI SINH TRONG CÂY MUNG TRÂU (Cassia alata L.) 
 Mc tiêu nghiên cu:
 Phân lp vi khun và vi nm ni sinh.
 Kho sát kh kháng vi khun và vi nm gây bnh ca vi sinh vt ni sinh
 nh danh chng vi sinh vt ni sinh có hiu qu cao.

KHÓA LUN TT NGHIP TNG QUAN TÀI LIU

SVTH: PHM TH NGUYT HNG 4

PHN 1: TNG QUAN TÀI
LIU

ca thc vt có s hin din ca vi sinh vt nt cht "kích hot sinh hc"
KHÓA LUN TT NGHIP TNG QUAN TÀI LIU

SVTH: PHM TH NGUYT HNG 6
 kích hot các h thng phn ng mnh
m i thc vc h sinh. (Bandara và cs., 2006; Strobel và Daisy,
2003)
1.2. Tình hình nghiên cu trên th gii
Da Ryan và cng s cho thy có nhiu báo cáo liên
n vi sinh vt ni sinh. Ncs. 
lp và mô t m vi khun ni sinh t các loài thc vt khác nhau. Và mt nghiên
cu khác da trên nn tng nghiên cu ca Hallmann và cs. (1997) và Lodewyckx và
cs. (2002), Rosenblueth và Martinez- mt danh sách toàn
din ca vi khun nc phân lp t mt lot các b phn ca cây. Các nghiên
cu ca Sturz và Matheson (1996), Duijff và cs. (1997), Krishnamurthy và
 ra rng vi khun ni sinh có kh c
mm bnh trên thc vt, nghiên cu ca Azevedo và cs. (2000) vi khun ni sinh có
kh c mm bnh  côn trùng và nghiên cu ca Hallmann và cs.
 ra rng vi khun ni sinh có kh c mm
bnh c  tuyn trùng. Nghiên cu ca Chanway (1997) ch ra trong mt s ng hp
chúng có th y mnh t ny mm ca hy s hình thành cây con trong
u kin bt li và nâng cao kh ng ca thc vt. Vi khun ni sinh còn
có th n mm bnh phát trin bng cách tng hp các cht ni sinh trung gian,
 tip tc tng hp các cht chuyn hóa và các hp cht hi. Nghiên
cu ca Strobel và cs. (2004) v  sn sinh cht chuyn hóa mi trong s ng
sinh hc ca vi khun ni sinh có th phát hin các loi thuc m u tr có hiu
qu các bnh  i, thc vng vt.
Hin nay, vic s dng vi sinh v phòng tr bnh cây  trên th gi
cu và áp dng trong sn xut hiu qu cao. Bi nhng li ích mà vi sinh vt ni
sinh mang li, nhiu công trình nghiên cu v vi sinh vt nc thc hin nhm


SVTH: PHM TH NGUYT HNG 8

Hình 1.1 Cây mung trâu (Cassia alata L.)
2. TNG QUAN V VI KHUN GÂY BNH TRểN NGI
c, vi khun gây bc coi là sinh th th ba trên th
gii và là nguyên nhân gây ra các bnh ri lo khác v
sc khe. Vi khun xâm nh qua da, ming và niêm mc, min là trong
ng có li, chúng s cùng lúc truyn bnh. Vi khun gây ra các phn ng d
ng, làm gim s kháng c, khi d nhim bnh và mc các bnh
mãn tính. Khi vi khun xâm nh trong mt th
b h min dch ym trng. (vozz.vn)
2.1. Staphylococcus aureus
Phân lo
Gii : Prokaryote
Phân ngành : Firmicute
Lp : Firmibacteria
H : Micrococceae
Chi : Staphylococcus
Loài : Staphylococcus aureus
(Nguyn Thanh Bo, 2008)
KHÓA LUN TT NGHIP TNG QUAN TÀI LIU

SVTH: PHM TH NGUYT HNG 9
S. aureus là vi khun Gng kính 0,5  1,5 µm, có th ng
riêng l, tng chui ngn, hoc tu gi
i vi khung và không sinh bào t
màng nhy cng vng Baird Parker, khun lc
có vòng sáng rng 2  5 mm.
S.aureus gây ra hai loi hi chng nhic và nhim trùng:

nghi, nhi t 5  40
o
u kin thích hp E.coli phát trin rt nhanh, thi
gian th h ch khon 30 phút.
E.coli là vi khung trú  ng tiêu hóa ci, có th c tìm thy 
ng hô hng sinh dc. E.coli u trong các vi khun gây bnh
tiêu chng tit ning mm khun huyt.
E.coli có kh   nh khi xâm nhp vào nhng v     mà bình
ng chúng không hin din.
E.coli hi khe mnh ch gây bnh khi có d vt hay h
thng min dch ca ký ch b suy yu.
E.coli gây bng rut. Tác nhân gây bng tiêu hóa bt c khi nào
ký ch nu s ng vi khun. Truyn bnh ch yu qua thc
ung b nhim vi khun hay truyn t i khác. (Nguyn Thanh Bo,
ng, 2012)
2.3. Salmonella typhi
Phân loi
Phân ngành : Proteobacteria
Lp : Gamma Proteobacteria
B : Enterobacteriales
H : Enterobacteriaceae
Chi : Salmonella
Loài : Salmonella Typhi
KHÓA LUN TT NGHIP TNG QUAN TÀI LIU

SVTH: PHM TH NGUYT HNG 11
(Nguyn Thanh Bng, 2012)
S.typhi là trc khun Gram âm, có lông xung quanh thân. Vì vy có kh 
c khong 0,4 - 0,6 x 2 - S.typhi là vi khun
hiu khí tùy nghi, phát tring nuôi cng. Trong

gim min dch, b bnh ác tính hay mãn tính, khi dùng corticoid lâu dài, vic s dng
kháng sinh tùy tim trùng da, m
ch c  các vùng k hoc viêm tai ngoài, viêm loét giác mc, Ngoài ra
P.aeruginosa m trùng vt bng, vp, huyt,
dch não ty, tit niu và hô hp.
Trc khun gây viêm m (m u kin thun li chúng gây
bm khun huyt hoc viêm ph qun, viêm màng não, viêm tai
giy. (Nguyn Thanh Bng, 2012)
3. TNG QUAN V VI NM GÂY BNH TRểN NGI
t, vi nm t vai trò quan trng trong h sinh thái, chúng phân
hy các vt cht h và không th thic trong chu trình chuyi
vt cht. Nhiu loi vi nm li kí sinh trên thc vng vt (c i) và nm
khác. Ví d  nm o ôn (Magnaporthe oryzae) gây bnh cho lúa, Cryphonectria
parasitica là nguyên nhân ca bnh thi cây d, còn nhng loài có kh nh
i li thu Candida, Cryptoccocus, Pneumocystis. Chúng có th
gây ra nhng bnh ngoài da   nm chân hay hc lào n nhng bnh
nguy him có th gây ch   viêm màng não (nm Cryptococcus
neoformans) hay viêm phi. Vi nm gây ra nhiu bi, tc nhng bnh tn công
trên i b suy gim min dch, chng l ming
 tr em và rt nhiu bnh khác. (wikipedia.org)
3.1. Candida albicans
3.1.1. Phân loi
Gii : Nm
Ngành : Ascomycota
Phân ngành : Saccharomycotina
Lp : Saccharomycetes
KHÓA LUN TT NGHIP TNG QUAN TÀI LIU

SVTH: PHM TH NGUYT HNG 13
B : Saccharomycetales


SVTH: PHM TH NGUYT HNG 14
3.1.3. Bnh do nm Candida gây ra
Candida sng ho i khi gu kin thun li, nh
gim s kháng s chuyn sang dng gây b
+ Yu t sinh lý: s i các hoormon, suy gim min dch.
+ Yu t bnh lý: ting, béo phì, suy ng.
+ Yu t ngh nghip: làm ving ng xuyên tip xúc
vc.
+ Yu t thuc men: dùng các thuc kháng sinh ph rng, corticoid, thuc c ch
min dch.
Candida có th gây bnh  nhi bin là da
và niêm mc (Trn Tc, 2006).
+ Bnh  niêm mn, viêm thc qun, viêm ruo - âm h, viêm
hu môn và quanh hu môn.
+ Bnh trên da: viêm da, viêm da ht, viêm móng và viêm quanh móng.
+ Bnh ni tng: viêm ni mng hô hp, bng tiu,
bnh Candida lan ta.
+ Bnh d ng: có th ng chàm, t  
 i khe mng, nm Candida tìm thc 30%  ming, 38% 
rut, 39%  o, 17%  ph qu   ng hp nhim Candida ng
 tiêu dit mt cách an toàn. Candida sppt s bnh
nhii, vi nm xâm nhp vào máu gây nhim trùng huyt hoc lan ta gây
bnh  i tng (Maheshwari, 2010).
3.2. Dermatophytes
Dermatophytes là nhóm nm có quan h gi loi nm có enzym karatinase
và có th gây ra nhim trùng trong các mô keratin ca   ng vt (da, tóc,
móng), dn mc gc gi là bnh
nm ngoài da. Nhóm này bao gm chi Epidermophyton, Trichophyton và
KHÓA LUN TT NGHIP TNG QUAN TÀI LIU

SVTH: PHM TH NGUYT HNG 16
: nhic sc 10 x 40 µm thành mng,
có gai, có 3 - 
+ Ti: him.
Bnh do nm Microsporum gypseum gây ra:
+ M. gypseum có th sinh chu và hc lào  i và thú. Bnh nhim nm
do M. gypseum gây phn ng mô rt mnh  kí chng ch có mt vt chc
hay hc lào.
+ Vi nm khi xâm nhp tóc sinh ra nh, mi bào t ng kính
khong 5 - 8 µm, nhng bào t này  phn bao tóc. (Molina de Diego, 2011).
3.4. Trichophyton
Gii : Nm
Ngành : Ascomycota
Lp : Eurotiomycetes
B : Onygenales
H : Arthrodermataceae
Chi : Trichophyton
(Weitzman, 1995).
Trichophyton spp. Có bào t  n, khi
ng thành, có dng phng có t n
c t
hoc thành các chùm, hình thùy, hình thoi, hình
trng trong khong chiu dài
8  86 µm, chiu rng 4  14 µm. Bào t 
nhng nhi n, chúng có
th là hình cu, hình qu lê hoc hình chùm, không cuc t dc
theo 2 bên si nm hoc thành cm gi

Trích đoạn nh danh

---