B GIÁO DO
I HC M TP. H CHÍ MINH
Tên đ tài:
PHÂN LP VÀ KHO SÁT HOT TÍNH
KHÁNG NM, KHÁNG KHUN CA VI
SINH VT N
(Catharanthus roseus L.)
KHOA CÔNG NGH SINH HC
CHUYÊN NGÀNH: VI SINH SINH HC PHÂN T T LINH
MSSV : 1053010038
KHOÁ: 2010 2014
Li Cm n
khóa lu
tiên, Em xin gi c c t n tình
ng dn, ch bo em trong sut thi gian thc hi tài. Em xin cy
Nguyt cho chúng em nhiu kinh nghim quý báu.
Em xin gi li cn các Thy Cô khoa Công Ngh Sinh
Hc, Ti hc M Thành ph H ng dy và truyt
kin thc cho em trong sut nhv
4
1.1 5
1.2 6
1.2.1 6
1.2.2 6
1.2.3 7
1.2.4 7
1.3
T 8
1.3.1 t 8
1.3.2
sinh 9
1.4 .
11
1.4.1 Escherichia coli 11
1.4.2 Salmonella typhi 12
1.4.3 Staphylococcus aureus 12
1.4.4 Pseudomonas aeruginosa 13
KHO A LUA N TO T NGHIÊ P GVHD DNG NHA T LINH
SVTH LÊ SANH BAO ii
1.5 14
1.5.1 Candida albicans 14
1.5.2 Dermatophytes 17
1.6 19
1.6.1 19
1.6.2 20
21
2.1 22
3.2.2. m gây bnh
57
3.3.
61
3.3.1. n gây bnh
64
3.3.2. m gây bnh 67
3.4. 72
3.4.1. 72
3.4.2. 75
3.5. THO LUN 79
80
4.1. 81
4.2. 82
O 83
KHO A LUA N TO T NGHIÊ P GVHD DNG NHA T LINH
SVTH LÊ SANH BAO iv
Hình 1.1: Cây da cn 7
Hình 1.2: Escherichia coli 11
Hình 1.3: Salmonella typhi 12
Hình 1.4: Staphylococcus aureus 13
Hình 1.5: Pseudomonas aeruginosa 14
Hình 1.6: Candida 15
Hình 1.7: Microsporum 17
Hình 1.8: Trichophyton 18
28
Hình 2.2: Kt qu vòng kháng khun gây bnh 32
Microsporum gypseum 71
Microsporum gypseum 71
72
73
74
75
76
77
Hình 3.30: Quan sát khun lc BNT43 trên PDA 77
Hình 3.31: Bào t chi kính hin vi 78
Hình 3.32: Quan sát khun lng PDA 78
Hình 3.33: Chi kình hin vi 79
KHO A LUA N TO T NGHIÊ P GVHD DNG NHA T LINH
SVTH LÊ SANH BAO vi
Bng 2.1: Biu hin các mc phát trin ca khóm nm 47
49
52
nh kh i kháng ca vi sinh vt ni sinh vi vi
khun gây bnh 53
Bng 3.4: K 57
61
t qu nh kh n gây bnh ca các chng vi
nm ni sinh 64
khun lc
SDA : Sabouraud Dextrose Agar
S. aureus: Staphylococcus aureus
E. coli: Escherichia coli
S. typhi: Salmonella typhi
P. aeruginosa: Pseudomonas aeruginosa
C. albicans: Candida albicans
M. gypseum Microsporum gypseum
T. rubrum: Trichophyton rubrum
T.mentagrophytes Trichophyton mentagrophytes
KHO A LUA N TO T NGHIÊ P GVHD DNG NHA T LINH
SVTH LÊ SANH BAO 1
KHO A LUA N TO T NGHIÊ P GVHD DNG NHA T LINH
SVTH LÊ SANH BAO 2
Cc Catharanthus
roseus L.Vinca rosea L., thuc h c hoang di và
c trng nhi c nhit Nam, n Ð, Indonesia, Philippine,
châu Phi, châu Úc, Braxin Vit Nam, da cn là cây hoang di có vùng phân b
tnh Qun Kiên Giang dc theo vùng ven bin,
i tp trung nhiu các tnh mi: Thanh Hóa, Ngh
Hu, Qum dân gian
ting ca cht kháng khu
Kigelia
africana Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus,
Escherichia colit ni sinh thc vt có mt tit l
p cht kháng nm, kháng khun có ho
ch phm sinh hc dùng cho phòng tr
chúng tôiPHÂN LP VÀ
KHO SÁT HOT TÍNH KHÁNG NM, KHÁNG KHUN CA VI SINH
VT NI SINH TRÊN Catharanthus roseus L.)
Ni dung nghiên cu:
- Phân lp vi khun, vi nm ni sinh.
- gia vi sinh vt ni sinh
-
KHO A LUA N TO T NGHIÊ P GVHD DNG NHA T LINH
SVTH LÊ SANH BAO 4
t bng kh c trên thc vt tr
nên màu m thông qua vic hòa tan lân và c m. Nhiu nghiên c ra
rng vi khun ni sinh có kh c mm bnh trên thc vt, côn
trùng và c tuyn trùng. Trong mt s ng hp chúng có th y mnh t
ny mm ca hy s u kin bt li và nâng
cao kh ng ca thc vt (Chanway, 1997; Bent, 1998). Vi khun ni
sinh còn có th n mm bnh phát trin bng cách tng hp các cht ni
tip tc tng hp các cht chuyn hóa và các hp cht
hng hp t hp sn xut
các hp cht ngu nhiên, các cht chuy
KHO A LUA N TO T NGHIÊ P GVHD DNG NHA T LINH
SVTH LÊ SANH BAO 6
c tìm kim các cht
chuy i nên t
M y thuc
kháng sinh mc ch min dch và các hp cht ch
c tính ca mt s
(Schutz, 2001). Nghiên c sn sinh cht chuyn
hóa mi trong s ng sinh hc ca vi khun ni sinh có th phát hin các loi
thuc m u tr có hiu qu các bnh i, thc vng vt (Strobel,
1993). Hixem nni bt,
(Strobel, 2003).
1.2
Catharanthus roseus L., Vinca rosea L.
1.2.1
1.2.4
Catharanthus rosesus
c hoang dc trng nhi c nhi n Ð,
KHO A LUA N TO T NGHIÊ P GVHD DNG NHA T LINH
SVTH LÊ SANH BAO 8
Indonesia, Philippine, châu Phi, châu Úc, Braxin Ti châu Âu và châu M
nhng vùng nóng tr nhng vùng lc trng theo
mùa vì không chc lnh. Cây da cn là loài cây chu kin khô
hn và thiu chng, nó khá ph bin trong các kn cn nhii
Ti Vit Nam, da cn là cây hoang di, có khi mc gn loi trên
các bãi i rng phi lao, trng c cây bi thp, có kh u
kin ca vùng cát ven bin. Da cn có vùng phân b t nhiên
tnh Qun Kiên Giang dc theo vùng ven bin,
i tp trung nhiu các tnh mi An, Tha
Thiên -Hu, Qu
Ta cn ch c trng làm cc tr thu
hoch ly thân, lá và r ch thuc.
1.3 ,
1.3.1 t
Vi sinh
1.3.2
KHO A LUA N TO T NGHIÊ P GVHD DNG NHA T LINH
SVTH LÊ SANH BAO 10
Trên th gii
1.3.2.1
Rhyncholacis penicillata
Serratia marcescens
t cây R. penicillata sn xut Oocydin A, mt
hp cht
1.3.2.2
Kennedia nigriscan
Streptomyces
nghim y hc dân gian
mt s cha st, r da cn có tác
C u kin thích hp E. coli phát trin rt
nhanh, thi gian th h ch khon 30 phút.
E. coli là vi khung trú ng tiêu hóa ci, có th c tìm
thy ng hô hng sinh dc. E. coli u trong các vi khun
gây bnh tiêu chng tit ning mm
khun huyt. E. coli có kh nh khi xâm nhp vào nhng v
th ng chúng không hin din.
E. coli hi khe mnh ch gây bnh khi có d vt hay
h thng min dch ca ký ch b suy yu.
KHO A LUA N TO T NGHIÊ P GVHD DNG NHA T LINH
SVTH LÊ SANH BAO 12
E. coli gây bng rut. Tác nhân gây bng tiêu hóa bt c khi
nào ký ch nu s ng vi khun. Truyn bnh ch yu qua th
c ung b nhim vi khun hay truyn t i khác. (Nguyn
Thanh Bng, 2012)
1.4.2 Salmonella typhi
Phân loi
Phân ngành : Proteobacteria
Lp : Gamma Proteobacteria
B : Enterobacteriales
H : Enterobacteriaceae
Chi : Salmonella
Loài : Salmonella typhi
(Nguyn Thanh Bng, 2012)
Hình 1.3: Salmonella typhi
S. typhi là trc khun Gram âm, có lông xung quanh thân. Vì vy có kh
c khong 0,4 - 0,6 x 2 - S. typhi là vi
khun hiu khí tùy nghi, phát tring nuôi cng.
ng thích hp sau 24 gi khun lc trung bình 2 4
tm chm trùng da và mô mm, nhim trùng h
hô hp, nhim trùng h thm trùng huyt, nhim trùng tiu,
nhim trùng ni mch, nhi
S. aureus gây ra nhiu bnh nhim trùng, tao m c ng
xy ra nhng ch c trên b mt, gây ra nhiu bnh truyn
nhim nghiêm trch, viêm màng não, nhim trùng
tiu và nhng bnh nguy hi y, viêm màng trong tim.
(Nguyn Thanh Bo, 2008).
1.4.4 Pseudomonas aeruginosa
Phân loi
Phân ngành : Proteobacteria
KHO A LUA N TO T NGHIÊ P GVHD DNG NHA T LINH
SVTH LÊ SANH BAO 14
Lp : Gamma Proteobacteria
B : Pseudomonadales
H : Pseudomonadaceae
Chi : Pseudomona
Loài : Pseudomonas aeruginosa
(Nguyn Thanh Bo, 2008;
ng, 2012)
Hình 1.5: Pseudomonas aeruginosa
P. aeruginosa là trc khun m xanh, thng ho
xou tròn, dài 1 - 5 µm, rng 0,5 - 1 µm, ít khi có v có mt ít lông mt
ng, không sinh nha bào, bt màu Gram âm. Chúng mc nhit
rng (10 44
0
35
0
c, có th gp hai loi
C. albicans là thành viên ca h vi sinh vt da và niêm mc. Nó là nhân t
gây nhim khi có s và cho phép nó phát trit
ngoài tm kim soát. C. albicans ng sng vô hi màng nhy ci và
ng vt máu nóng (ming, rung xuyên trên da dng
nhu kin nhnh, nm men phân hóa thành dng s xâm
nhp vào màng nhng không kim soát và gây nhng bm nm
ng.
C. albicans là tác nhân gây bnh da, móng, niêm mc (Candidasis,
Moniliasis). vi nm có th xâm nhm huyt
và bnh nm ni tng rt nguy him. Kh n ti hai dng hình thái là t bào
và si giúp loài này nhanh chóng chuyu kin thích hp và
khó b tiêu dit (Trn Linh Tc, 2006; Maheshwari, 2010).
1.5.1.2 c tính sinh lý ca Candida albicans
C. albicans có th phát trin tt 20 38
0
C, pH t 2,5 7,5, hình dng t bào
i t u dc sang dng si, ng bi
sinh sn hu tính, có th sn sinh ng mm và bào t vách
dày chic sinh ra u khun ty gi.