I H C THÁI NGUYÊN
NG
I H C NÔNG LÂM
TR
TR N HUY HÀO
NGHIÊN C U K THU T NHÂN GI NG LOÀI CÂY BÌNH VÔI
(STEPHANIA ROTUNDA LOUR) B NG PH
NG PHÁP
GIÂM HOM T I CÔNG TY LÂM NGHI P S N
XÃ YÊN
NH, HUY N S N
NG, T NH B C GIANG
KHÓA LU N T T NGHI P
H
ào t o
NG T I
: Chính quy
Chuyên ngành
NH, HUY N S N
NG, T NH B C GIANG
KHÓA LU N T T NGHI P
H
ào t o
IH C
: Chính quy
Chuyên ngành
: Lâm nghi p
Khoa
: Lâm nghi p
L p
: LN43 – N01
Khóa h c
: 2011 - 2015
XÁC NH N C A GVHD
Ng
tháng
n m 2015
i vi t cam oan
ng ý cho b o v k t qu
tr
ch i
Ths. L
ng khoa h c!
ng Th Anh
Tr n Huy Hào
XÁC NH N C A GV CH M PH N BI N
Giáo viên ch m ph n bi n xác nh n sinh viên
ã s a ch a sai sót sau khi H i
(Ký, h và tên)
ng ch m yêu c u!
tôi trong su t th i gian th c t p
nghi p này.
ng Th Anh ã
tôi hoàn thành khóa lu n t t
ng th i tôi c ng xin chân thành c m n s giúp
cán b và nhân viên công ty Lâm Nghi p S n
ng
quý báu c a
tôi hoàn thành bài
khóa lu n này.
Cu i cùng tôi xin bày t s bi t n t i gia ình, b n bè và ng
ã quan tâm giúp
i thân
tôi trong su t quá trình th c t p..
Trong quá trình nghiên c u do có nh ng lý do ch quan và khách quan
nên khóa lu n không tránh kh i nh ng thi u sót và h n ch . Tôi r t mong
nh n
các n ng
và th n n khác nhau
n t l hom ra ch i ............................................................................................. 17
B ng 4.3.
nh h
ng c a BAP
các n ng
và th n n khác nhau
n s ch i trên hom ............................................................................................ 19
B ng 4.4.
nh h
ng c a BAP
các n ng
và th n n khác nhau
n chi u dài ch i ................................................................................................ 21
B ng 4.5. T ng h p k t qu giâm hom c loài Bình vôi s d ng Kinetin
n ng
ng c a Kinetin
các n ng
và th n n khác nhau
n chi u dài ch i ................................................................................................ 29
B ng 4.9. So sánh nh h
B ng 4.10. So sánh nh h
ng c a BAP và Kinetin
ng c a BAP và Kinetin
n t l ra ch i ................. 31
n
s ch i trung bình/hom ........................................................................................ 34
B ng 4.11. So sánh nh h
ng c a BAP và Kinetin
n chi u dài
ch i trung bình trên hom ..................................................................................... 36
iv
DANH M C CÁC HÌNH TRONG KHÓA LU N
n t l hom ra ch i .......................................................................... 26
Hình 1.5: Bi u
khác nhau
ng c a BAP
.......................................... 17
n chi u dài ch i .............................................................................. 22
Hình 1.4: Bi u
khác nhau
các n ng
n s ch i trên hom .......................................................................... 20
Hình 1.3: Bi u
khác nhau
ng c a BAP
nh h
ng c a Kinetin
các n ng
và th n n
Hình 1.9: Bi u
khác nhau
t l hom ra ch i v i BAP và Kinetin
nh h
ng c a BAP và Kinetin
các n ng
n chi u dài ch i trung bình trên hom ............................................. 36
CÁC HÌNH NH TRONG KHÓA LU N
Hình nh 01: X lý b ng BAP 20ppm
Hình nh 02: X lý b ng BAP n ng
th n n 1 và 2 ..................................... 18
10ppm và 20ppm ................................. 23
Hình nh 03:
nh h
ng c a n ng
Kinetin
Hình nh 04:
1.3. M c tiêu c a
tài............................................................................................ 2
1.4. Ý ngh a c a
tài ............................................................................................. 2
PH N 2.T NG QUAN TÀI LI U ....................................................................... 3
2.1. C s khoa h c ............................................................................................... 3
2.2. Tình hình nghiên c u trong và ngoài n
c ........................................................ 4
2.2.1. Tình hình nghiên c u trên th gi i .............................................................. 4
2.2.2. Tình hình nghiên c u giâm hom t i Vi t Nam ............................................... 6
2.3. T ng quan
it
ng nghiên c u .................................................................... 8
2.3.1.
c i m hình thái ....................................................................................... 8
2.3.2.
c i m sinh h c ........................................................................................ 9
3.4.1. Ph
ng pháp k th a tài li u ........................................................................ 11
3.4.2. Ph
ng pháp ngo i nghiêp ........................................................................... 11
3.4.3. Ph
ng pháp n i nghi p .............................................................................. 14
PH N 4. K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N ................................... 16
4.1. K t qu nghiên c u nh h
sinh tr
ng
ng c a n ng
các d ng th n n khác nhau
hình thành cây hom
và lo i ch t kích thích
n kh n ng
Bình vôi .............................................................................. 16
4.2.1. nh h
ng c a BAP và Kinetin
n t l hom ra ch i ................................. 31
4.2.2. nh h
ng c a BAP và Kinetin
n s ch i trung bình trên hom ................ 34
4.2.3. nh h
ng BAP và Kinetin
PH N 5.K T LU N –
n chi u dài ch i trung bình trên hom ............ 35
NGH ....................................................................... 38
5.1. K t lu n .......................................................................................................... 38
5.2.
ngh ........................................................................................................... 38
TÀI LI U THAM KH O ................................................................................... 39
i dân s ng
nông thôn và vùng núi cao th
làm thu c. Kinh nghi m s d ng cây làm thu c ch a
i dân r t phong phú, nh ng
l i mang nh ng nét
ng dùng
c áo,
i v i m i dân t c ki n th c này
c tr ng riêng. S tàn phá tài nguyên r ng kéo
theo s gi m sút a d ng sinh v t, chúng ta ang
i m t v i vi c s d ng
quá m c ngu n tài nguyên cây c , trong ó có cây thu c. H n n a do ch y
theo l i s ng th tr
ng, nh ng tri th c b n
a v vi c s d ng cây thu c
ang b mai m t d n. Nhi m v c a các nhà th c v t là s d ng d
c t m quan tr ng, l i ích và giúp b o t n ngu n Bình vôi thì
công tác nhân gi ng c n
c phát huy,
c bi t là nhân gi ng sinh d
ng
2
giúp cây
hi n
t
c c ch t l
ng l n s l
ng. Chính vì th tôi ti n hành th c
tài : “Nghiên c u k thu t nhân gi ng loài cây Bình Vôi (Stephania
rotunda Lour) b ng ph
ng t i xã Yên
ng pháp giâm hom t i công ty lâm nghi p S n
1.3. Ý ngh a c a
ng, n ng
và
ng ch i.
tài
- Ý ngh a trong h c t p và nghiên c u khoa h c: Giúp sinh viên v n d ng
c nh ng ki n th c v giâm hom ã
- Ý ngh a trong th c ti n: Xác
b ng ph
c h c vào trong th c t .
nh k thu t nhân gi ng loài cây Bình vôi
ng pháp giâm hom có th áp d ng trong th c ti n
s n xu t.
3
PH N 2
T NG QUAN TÀI LI U
2.1. C s khoa h c
cây con t m t b ph n sinh d
ng c a cây nh lá, cành, c , thân, mô
phân sinh ho c s ti p h p các b ph n dinh d
ng (ghép)
t o thành
cây m i. Theo ngh a r ng thì nhân gi ng sinh d
ng bao g m nhân gi ng
b ng hom, chi t cành, ghép cây và nuôi c y mô – t bào.
+ Ph
ng pháp chi t là vi c t o ra r cho m t o n cành (thân) trên
cây m r i m i tách cành (thân) ra kh i thân cây m
Ph
nhân gi ng.
ng pháp này có u i m cây chi t ra qu s m. Tuy nhiên, h s nhân
gi ng th p, cây chi t nhanh b c i.
+ Ph
l a chon cành m t chi t
t yêu c u
ng cây con t t.
ng pháp nhân gi ng b ng nuôi c y mô – t bào là ph
ng
pháp t o cây con t các b phân r t nh c a cây (các c quan, mô, t bào)
b ng cách nuôi chúng trong bình nuôi
thích h p và
i u ki n vô trùng có môi tr
c ki m soát nghiêm ng t.
ây là ph
gi ng vô tính mang l i hi u qu cao nh t, ch t l
u. Tuy nhiên, vi c nuôi c y mô
ng pháp nhân
ng cây con t t,
ng
ng pháp dùng m t
t o ra cây m i g i
c tính tr ng c a
u),
n gi n có h
c s d ng r ng rãi trong
nhân gi ng cây r ng, cây n qu , cây c nh…
- Tu thu c vào lo i hom
ó có s
c s d ng mà các b ph n còn thi u
khác nhau nh ng nhìn chung các b ph n còn thi u là r cây
(ph n d
im t
n ng ra r có
t) và các b ph n trên m t
ngh a quy t
t nh thân, cành, lá… Kh
nh thành b i trong giâm hom, tuy nhiên s
5
l
ng cây gi ng, n ng su t cây tr ng, trong ó có c cây r ng hàng n m
c a các n
c t ng lên r t nhi u. Hi n nay, nhân gi ng b ng hom các loài
cây r ng trên th gi i ang
c nghiên c u và ng d ng
m c sâu h n
và r ng h n.
- N m 1883, Velenski.A.H ã công b công trình nhân gi ng m t s
cây lá kim và cây lá th
ng xanh b ng hom.
- T n m 1961 vi c nhân gi ng thành công B ch àn (Eucalyptus
camaldulensis) b ng ph
hi n tr
c
)
ã ti n hành giâm hom ch i g c
B ch àn Eucalyptus b ng thu c IBA n ng
gi cho k t qu t l ra r
100ppm, th i gian x lý 24
t 60% n m 1973.
- Martin và Quilet th nghi m nhân gi ng giâm hom
àn, k t qu ch ng minh ch t kích thích ra r làm nh h
i v i B ch
ng
n t l ra
r c a hom, th y IBA làm t ng t l ra r c a B ch àn t ng lên 12% 15% so v i
i ch ng, nh ng t l ch t v n còn cao (n m 1974).
- Sach (
c) n m 1982 ã cho r ng ch i và lá có tác d ng t ng h p
Auxin và ch t kích thích ra r , nh ng ch t này nh h
c m nh.
- Theo nghiên c u c a Darsin n m 1983
Vi n di truy n và ch n gi ng
cây g Liên Xô, ã ti n hành thí nghi m v i cây S i
giai o n 3 tu i cho th y
k t qu là 12 cây có t l 100% hom ra r , 28 cây có t l ra r là 50% và 10 cây
không ra r . i u này ch ng t r ng,
h
ng r t khác nhau
c i m di truy n c a t ng cá th có nh
n kh n ng ra r c a hom.
2.2.2. Tình hình nghiên c u giâm hom t i Vi t Nam
Trong quá trình phát tri n c a l nh v c nhân gi ng cây tr ng
cây r ng
n
c ta ã có m t s nghiên c u liên quan
c bi t là
i ch ng ch
i v i nhân gi ng hom cây Sao en b ng thu c b t TTG (Trung tâm
gi ng – Lê ình Kh và c ng s , 2002) theo k t qu nghiên c u cho th y x lý
hom giâm cho Sao en giai o n 9 tháng tu i b ng thu c TTG ( c bi t n ng
0,5%) cho hi u qu ra r cao nh t 96,7%.
- N m 1995, Nguy n Hoàng Ngh a và Tr n C
hom cây Thông
thí nghi m giâm
t i tr m Ba Vì v i th i gian nghiên c u 4 tháng, k t
qu giâm hom v i 3 lo i thu c ABT, IBA, IAA d ng b t
1%; 1,5% và 2% cho th y IBA 1%
n ng
t t l ra r cao nh t v i 100%.
0,5%;
7
- N m 1999, theo Nguy n Hoàng Ngh a trong
án nghiên c u b o
hi n nghiên c u kh
c Tu n và Hoàng V Th (2009) th c
n ng ra r
cajuputi Powell) v i cành hom
cao trong tinh d u (65 – 72%)
t t l ra r cao nh t là 85,19%.
c a hom Tràm cajuputi (Melaleuca
c c t t cây tr i có t l 1,8 –cineole
qu n th tràm t nhiên thu c khu v c h
i L i, t nh V nh Phúc. Các hoormone
c s d ng là NAA, IBA và
thu c b t TGG 1% k t qu cho th y trong các lo i hoocmone
d ng
c s
nhân hom Tràm cajuputi thì IBA 1000ppm có t l ra r và ch s
ra r là l n nh t (t
ng ng là 75% và 27%). Th i gian c n thi t
nhi u nghiên v u v giâm hom các loài cây khác nhau, c các loài cây
Lâm nghi p (cây g c ng nh các loài lâm s n ngoài g ), cây n qu hay
8
các loài cây nông nghi p. Tuy nhiên, nghiên c u v giâm hom cây Bình
vôi còn h n ch ho c ch a
-
c công b .
i v i các dân t c vùng
ông B c thì vi c b o t n và phát huy
giá tr truy n th ng c a loài Bình vôi là vô cùng quan tr ng, vi c nhân
gi ng Bình vôi v n
c
ng bào vùng này th c hi n theo ph
ng pháp
truy n th ng ó là nhân gi ng b ng h t. Vi c nhân gi ng loài này theo
ph
ng pháp nhân gi ng sinh d
2.3.1.
u có th
c dùng làm thu c.
c i m hình thái
- Bình vôi là dây leo, s ng hàng n m. Thân non nh n, khi già có
nhi u bì kh ng, h i hóa g có khi xo n v n. R c to, v ngoài xù xì, màu
nâu xám. Lá m c so le, có cu ng dài, ính kho ng 1/3 vào trong phi n lá,
phi n lá m ng, gân hình tròn ho c tam giác, g c b ng,
l
n sóng, hai mép nh n, gân lá xu t phát t ch
hình chân v t n i rõ
- C m hoa m c
m td
u tù, mép h i
ính c a cu ng lá, t a ra
i.
k lá ho c nh ng cành già ã r ng lá thành sim tán. Hoa
c và hoa cái khác g c, hoa
lo i hình r ng m trên núi á vôi.
Diels th
ng t
vài ch c
cao phân b c a loài S. sinia
n vài tr m mét và ch a phát hi n th y
kho ng 100m so v i m t bi n.
- Bình vôi có hi n t
ng r ng lá vào mùa ông, m c l i vào mùa
xuân và hoa xu t hi n sau khi ra lá non. Mùa hoa qu vào tháng 4-8, cá
bi t th y qu chín vào tháng 10. Cây tái sinh t nhiên ch y u t h t ho c
t các ph n khác còn l i sau khi c t. Ngoài ra, t c Bình vôi em vùi 1/3
xu ng
t ho c ch c n
t ph n g c ti p xúc v i
t m c ng m c thành
cây m i.
2.3.3.
c áp d ng, vì d b ng
c (gây nôn) do có alkaloid. Bình vôi là nguyên li u chi t alcalid làm thu c
10
an th n, ch a m t ng . Thu c
c làm d
i d ng viên có tên là Rotunda,
m i viên ch a 0,05g L-tetrahydropalmatin clohydrat. Li u dùng m i viên 1-2
viên tr
c khi i ng .
2.3.5. Giá tr kinh t , khoa h c, b o t n
- Bình vôi là cây thu c quý. Do ngu n nguyên li u t
ng
i d i dào
nên giá thu mua r . T i n i khai thác, giá mua kho ng 4.000 – 4.500 /kg
t
i. B i v y giá thành thu c c ng r t r (3.000- 3.500
m t s vùng núi cao trên 1.000m. Ho c loài
Stephania cepharantha Hayta ch a h p ch t Cepharantin, có tác d ng làm
thu c ch a ung th , m i ch phát hi n
… Nh ng loài này ã
thu c Vi t Nam
-
c
2 i m t i Qu ng Ninh và Hòa Bình
a vào danh m c Sách
và Danh l c
cây
b o v , do m c e d a tuy t ch ng cao.
khai thác lâu dài ngu n Bình vôi
thác h n ch , v i kh i l
ng v a
Vi t Nam, tr
c m t nên khai
it
ng nghiên c u c a
tài là ch i t c Bình vôi.
- Ph m vi nghiên c u: Nghiên c u nh h
n ng
3.2.
và giá th
n kh n ng ra ch i và ch t l
ng c a ch t kích thích,
ng ch i c a Bình vôi.
a i m và th i gian nghiên c u
-
xã Yên
a i m nghiên c u: V
nh huy n S n
n
m c a công ty Lâm nghi p S n
ng
3.4.1. Ph
ng pháp nghiên c u
ng pháp k th a tài li u
- K th a tài li u k t qu nghiên c u v giâm hom c a các lo i cây c a
các tác gi tr
c ây.
- K th a tài li u c s v t ch t t i n i làm thí nghi m, i u ki n khu
v c nghiên c u.
3.4.2. Ph
ng pháp ngo i nghiêp
- Chu n b thí nghi m:
+ Giá th giâm hom.
12
Giá th giâm hom là cát sông và t ng
t B. Tr
c khi c y hom vào lu ng
giâm ti n hành x lý th n n (phun dung d ch Benlate n ng
50m2, ho c thu c tím 0,1%)
các n ng
ng
c s d ng là ch t kích thích ra ch i
10ppm, 20ppm và 30ppm d ng n
c. Hom sau
c c m vào 2 lo i th n n sau: th n n 1: 100% là cát ã
s ch, th n n 2: 70% cát s ch + 30%
c làm
t t ng B.
- Ti n hành thí nghi m và ch m sóc thí nghi m:
+ Ti n hành thí nghi m: ti n hành b trí 10 công th c v i các ch t i u
hòa sinh tr
ng khác nhau,
các n ng
khác nhau và công th c
i ch ng.
13
. Công th c 4 (CT4): Hom giâm
c x lý b ng dung d ch BAP, n ng
30 ppm (th n n 1, th n n 2).
+ nh h
d ng th n n
ng c a n ng
ch t i u hòa sinh tr
i ch ng (th n n 1, th n n 2).
. Công th c 6 (CT6): Hom giâm
c x lý b ng dung d ch Kinetin,
20 ppm (th n n 1, th n n 2).
. Công th c 8 (CT8): Hom giâm
n ng
c x lý b ng dung d ch Kinetin,
10 ppm (th n n 1, th n n 2).
ng
t t ng B.
n quá trình giâm hom và s
c ghi vào các bi u sau:
14
M u bi u 01:
nh h
Công th c
Lo i th
Thí nghi m
n n
(CTTN)
Th n n 1
C
Th n n 2
Th n n 1
10ppm
Th n n 2
Th n n 1
20ppm
Th n n 2
Lo i th
n n
Các s li u
S hom ra ch i
ng c a Kinetin
S
hom
TN
Th n n 1 45
C
Th n n 2 45
Th n n 1 45
10ppm
Th n n 2 45
Th n n 1 45
20ppm
Th n n 2 45
Th n n 1 45
30ppm
Th n n 2 45
3.4.3. Ph ng pháp n i nghi p
CTTN
n k t qu thí nghi m
c thu th p, o
c tr ng m u t l (X%): Hom s ng, hom ch t, hom ra
ch i theo công th c:
S hom (s ng, ch t, ra ch i )
T l (X%) = --------------------------------------- x 100%
T ng hom thí nghi m
+ Ch s ra ch i: Ch s ra ch i = S l
ng ch i* Chi u dài ch i
15
- Tính giá tr trung bình và các
c tr ng m u cho các ch tiêu: S ch i
trung bình/hom, chi u dài ch i. S d ng ch
- Ki m tra nh h
ch i b ng ph
ng trình Excel
ng c a ch t i u hòa sinh tr
ng pháp phân tích ph
ng
tính toán.
(a-1) x (b-1).
N u
N u
n
2
2
(k) thì gi thuy t Ho t m th i
05
2
05
c ch p nh n.
(k) thì gi thuy t Ho b bác b , ngh a là có s sai
c > 1,96, gi thuy t Ho không
c ch p nh n, 2
m u không thu n nh t v i nhau.
-
ánh giá nh h
ng c a các ch t và các lo i th n n, sau ó
ra nh n xét v công th c thí nghi m t t nh t.
a
16
PH N 4
K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N
4.1. K t qu nghiên c u nh h
thích sinh tr
ng
thành cây hom
4.1.1.
b ng sau:
B ng 4.1. T ng h p k t qu giâm hom c loài Bình vôi s d ng BAP
các n ng
CTTN
Lo i th
n n
Th
Th
10ppm Th
Th
20ppm Th
Th
30ppm Th
Th
4.1.1.1 nh h
C
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
ng c
26
57,8
2,12
2,55
22
48,9
2,46
1,56
33
73,3
3,55
3,32
34
75,6
2,79
2,36
35
77,8
3,17
3,72
32
71,1
2,5
2,5
18
40,0
1,78
1,84
18
40,0
1
Th n n
2
K t qu giâm
hom
S hom TN
S hom ra ch i
T l (%)
S hom ra ch i
T l (%)
Hình 1.1: Bi u
i ch ng
45
26
57,8
22
48,9
nh h
N ng
10ppm
20ppm
45
45
33
35