SỞ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO HÀ NỘI
TRƯỜNG THPT VÂN TẢO – THƯỜNG TÍN
****************************
ĐỀ TÀI DỰ THI KHOA HỌC, KỸ THUẬT
DÀNH CHO HỌC SINH TRUNG HỌC CẤP THÀNH PHỐ
LẦN THỨ TƯ NĂM HỌC 2014 - 2015
Tên đề tài: TÁCH CHIẾT TINH DẦU CÂY LÁ LỐT
ĐỂ CHỮA BỆNH ĐAU XƯƠNG KHỚP
Lĩnh vực: Hoá sinh
NGƯỜI HƯỚNG DẪN:
- Cử nhân Nguyễn Hồng Long
- Đơn vị công tác: THPT Vân Tảo
TÁC GIẢ:
1. Lương Thị Ngoan
Lớp 11A3, trường THPT Vân Tảo
Hà Nội, tháng 12 năm 2014
MỤC LỤC
Trang
Phần I: Lí do chọn đề tài 3
Phần II: Tổng quan vấn đề nghiên cứu và điểm mới, sáng tạo
của đề tài
4
Phần III: Quá trình nghiên cứu và kết quả nghiên cứu 5
III.1. Nghiên cứu tài liệu 5
III.1.1. Về cây lá lốt 5
III.1.2. Về bệnh đau xương khớp 8
III.2. Thực nghiệm 10
III.2.1. Tách chiết tinh dầu lá lốt 10
III.2.2. Thử nghiệm khả năng trị bệnh đau xương khớp 14
Phần IV: Kết luận 20
Tài liệu tham khảo 21
4. Nhiệm vụ nghiên cứu
- Nghiên cứu cây lá lốt (piper lolot C.DC) và bệnh đau xương khớp ở Việt Nam.
- Tách tinh dầu từ cây lá lốt (thân, lá).
- Thử nghiệm tác dụng tinh dầu lá lốt trong điều trị bệnh đau xương khớp.
5. Phương pháp nghiên cứu
Chưng cất lôi cuốn hơi nước để thu được tinh dầu.
PHẦN II: TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU VÀ ĐIỂM MỚI, SÁNG
TẠO CỦA ĐỀ TÀI
3
Lá lốt là một trong những cây rau gia vị được xem là đặc hữu của vùng
Đông Dương. Do đặc tính là một cây địa phương nên đa số các nghiên cứu khoa
học về lá lốt được thực hiện tại Việt Nam.
Theo tác giả GS.TS Đỗ Tất Lợi trong những cây thuốc và vị thuốc Việt
Nam cũng ghi Piper lolot = Lá lốt (trang 578) và Piper longgum = Tiêu Lốt, Tất
bạt (trang 642).
Các nghiên cứu khoa học cho thấy: Phân chất hóa học ghi nhận lá Piper
lolot có chứa hàm lượng alkaloid, flavonoids, anthranoids, tannins, acid amin và
tinh dầu. Hàm lượng flavonoids tổng cộng khoảng 1,14%. Dịch chiết bằng
alcohol 2:1 cho thấy có những hoạt tính chống sưng khi thử nghiệm trên chuột
qua các test Winter, Koster và dĩa hơ nóng (Tạp chí Dược học số 10 – 2004).
Dịch chiết bằng methanol từ lá Piper lolot có hoạt tính ức chế hoạt động
ngưng tụ tiểu cầu gây ra do arachidonic và yếu tố kích khởi PAF (Platelet
Activating Factor) (J.Agric.Food Chem. Số 55-2007)
Gần đây, Đỗ Đình Rãng và cộng sự [2] đã nghiên cứu thành phần hoá học
tinh dầu lá lốt (Piper lolot C.DC) ở Hà Nội. Thành phần hoá học của tinh dầu
gồm 54 cấu tử, nhận diện 46 cấu tử, trong đó thành phần chính là
α
,
β
-asaron
- Kỹ thuật trồng
+ Thời vụ: Trồng quanh năm.
5
+ Làm đất
Lá lốt thích hợp trên nhiều chân đất, nhưng để cây phát triển tốt thì chọn
chân đất nhiều mùn, nhiều dinh dưỡng.
Lên liếp: chiều cao x chiều dài x chiều ngang tương ứng với tỉ lệ sau:15
cm x chiều dài vườn x 1,2 m.
Khoảng cách giữa các liếp khoảng 3 cm.
+ Nhân giống và trồng
Chọn những cây lá lốt sinh trưởng mạnh (lá xanh bóng, mượt, kích thước
lá to) cắt thành từng đoạn dài 20 – 30 cm để giâm.
Giâm những đoạn thân vừa cắt trực tiếp trên liếp đã chuẩn bị để trồng,
giâm từng hàng vào đất (ngập 2/3 đoạn thân vừa cắt), sau đó tưới nước nhẹ cho
cây đủ ẩm. Hằng ngày tưới nước 2 lần cho cây.
+ Bón phân
Lượng phân bón cho 1.000 m2 như sau:
Bón lót: Phân chuồng hoai 1,5 tấn, phân lân 35 kg. Bón thúc: phân Urê 10
– 12 kg.
+ Phòng trừ sâu bệnh và thu hoạch
Lá lốt là loại cây trồng ít sâu bệnh hại. Trong trường hợp trồng cây với
mật độ dày thì những lá phía dưới hay bị cháy đầu lá nhưng sản phẩm thu được
từ lá lốt thường là những lá non, do đó công tác bảo vệ thực vật trên cây tương
đối nhẹ.
Sau khi trồng khoảng 1 tháng thì có thể thu hoạch lá lốt. Tuỳ theo mục
đích sử dụng mà cắt nguyên đoạn thân (chừa lại 10 – 15 cm để cho cây tái sinh)
hoặc hái lá.
III.1.1.3. Thành phần hóa học
Thành phần hoá học của chi Piper rất đa dạng và phong phú và đã được
tổng kết hai lần (Sengupta và Ray 1987, Parma và cộng sự 1997). Sau những
mụn nhọt, đau đầu hay đau răng.
- Chữa đau nhức xương khớp[1]:
Bài 1: Dùng 5-10g lá lốt phơi khô, hay 15-30g lá tươi, sắc với nước, chia 2-3 lần
uống trong ngày.
Bài 2: Lá lốt và rễ các cây bưởi bung, vòi voi, cỏ xước, tất cả đều dùng tươi thái
mỏng, sao vàng, liều lượng bằng nhau (khoảng 15g khô mỗi loại), sắc với 600ml
nước, còn 200ml chia 3 lần uống trong ngày.
Bài 3: Lá lốt 20g, thiên niên kiện 12g, gai tầm xoong 16g, tất cả sắc với 400ml,
còn 100ml dùng uống trong ngày. Có thể dùng một trong các bài thuốc này, sắc
uống liên tục 7-8 ngày sẽ có tác dụng tốt.
7
- Chữa bệnh phụ khoa (các viêm nhiễm ở vùng âm đạo, ngứa, ra khí hư): Lá lốt
50g, nghệ 40g, phèn chua 20g, đổ nước ngập lên mặt thuốc 2 đốt ngón tay, đun
sôi, bớt lửa giữ cho sôi lăn tăn 10-15 phút, chắt lấy 1 bát, gạn lấy nước trong
dùng rửa âm đạo. Phần còn lại tiếp tục đun sôi dùng để xông hơi vào âm đạo, có
thể xông nhiều lần.
- Chữa đổ mồ hôi nhiều ở tay chân: Dùng 30g lá lốt tươi cho vào 1 lít nước nấu
sôi, cho thêm ít muối, để nguội dần dùng ngâm hai bàn tay, hai bàn chân thường
xuyên trước khi đi ngủ.
- Chữa lỵ: Lấy 1 nắm nhỏ lá lốt, sắc với 300ml nước, dùng uống.
- Chữa bệnh tổ đỉa ở bàn tay: Đồng bào Mường có kinh nghiệm lấy 1 nắm thật
to lá lốt, rửa sạch, giã nát, vắt lấy 1 bát nước đặc, uống làm một lần. Còn bã cho
vào nồi đun với 3 bát nước, đun sôi vài lần rồi vớt bã để riêng. Khi nước âm ấm
thì dùng rửa sạch tổ đỉa. Lau khô rồi lấy bã đắp lên, băng lại. Ngày làm 1-2 lần,
liên tục trong 5-7 ngày là khỏi.
III.1.2. Về bệnh đau xương khớp [5],[6], [7].
III.1.2.1. Khái niệm
Viêm khớp dạng thấp (Rheumatoid Arthritis - RA) là một bệnh lý khớp mãn
tính thường gặp, đồng thời là một bệnh tự miễn điển hình với các biểu hiện toàn
thân, tại khớp và ngoài khớp ở nhiều mức độ khác nhau, diễn biến phức tạp, gây
III.1.2.6. Cách chữa bệnh đau khớp
- Dùng thuốc giảm đau: Tham khảo lời khuyên của bác sĩ.
- Châm cứu.
- Luyện tập: Thể thao, aerobic, bơi lội, đi bộ,
III.2. Thực nghiệm
III.2.1. Tách chiết tinh dầu lá lốt
9
III.2.1.1. Nguyên liệu
Cây lá lốt được trồng phổ biến và rất nhiều ở xã Thư Phú, Thường Tín, Hà Nội.
Hình 3: Cây lá lốt.
III.2.1.2. Phương pháp lấy mẫu, xác định thành phần độ ẩm
Mẫu tươi sau khi lấy về được rửa sạch, để nơi thoáng mát hoặc sấy khô ở
40
0
C. Gửi mẫu sang Trung tâm Phân tích giám định và thí nghiệm KDTV để lưu
ảnh tiêu bản mẫu nhằm xác minh đúng mẫu định nghiên cứu. Việc xử lý tiếp
mẫu bằng phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước để thu được hỗn hợp các
hợp chất dùng cho nghiên cứu được nêu ở phần thực nghiệm.
Để xác định độ ẩm ta sử dụng phương pháp trọng lượng.
Nguyên tắc: Sấy nguyên liệu ẩm ở 100
0
C đến khối lượng không đổi
Cách tiến hành: Chuẩn bị sẵn 3 chén sứ sạch, đánh dấu và sấy trong tủ sấy
đến 100
0
C. Sau khi sấy xong, đặt chén sứ vào bình hút ẩm, để nguội ở nhiệt độ
phòng, cân các chén sứ ta được khối lượng m
1
. Cho vào mỗi chén sứ m
2
Xác định thành độ ẩm của lá lốt:
Mẫu m
1
M
2
m
3
W
11
Chén sứ 1 (g) 30,0 5,0 31,1 78,0%
Chén sứ 2 (g) 32,0 5,0 33,1 78,0%
Chén sứ 3 (g) 31,0 5,0 32,0 80,0%
Độ ẩm trung bình 78,7%
Bảng 1: Thành phần độ ẩm của lá lốt.
III.2.1.3. Dụng cụ
Tủ sấy, cân điện tử, thiết bị chương cất lôi cuốn hơi nước, máy đo, cốc
đựng, bình florentin.
Hình 6: Sơ đồ bộ dụng cụ chưng cất lôi cuốn hơi nước.
III.2.1.4. Hóa chất
Natri sunfat khan Na
2
SO
4
III.2.1.5. Cách tiến hành
- Lắp bộ tách tinh dầu lôi cuốn hơi nước.
- Chuẩn bị mẫu: rửa sạch, để ráo, thái khúc, cho vào bộ chưng cất.
- Bật nồi chưng cất.
- Thu được tinh dầu.
12
èng sinh hàn thẳng
và có tính lành đối với con người (Nguồn: Cây thuốc Việt Nam – GS.TS Đỗ Tất
Lợi – NXB Hồng Đức 2013.)
- Theo tài liệu từ điển Hóa Học (NXB Khoa học kỹ thuật – 2013) các chất trong
Tinh dầu lá lốt được sử dụng trong sản xuất các loại dược phẩm và không nằm
trong danh mục các chất bị cấm của Bộ Y tế (Thông tư 06/2011/TT-BYT của Bộ
Y tế ngày 25 tháng 11 năm 2011).
III.2.2.2.Thử nghiệm tác dụng của tinh dầu cây lá lốt trong điều trị bệnh đau
xương khớp
Sau khi có tinh dầu lá lốt và khẳng định tính an toàn trong sản phẩm thu
được, em đã liên hệ và thử nghiệm trên các tình nguyện viên:
1. Ông: Nguyễn Văn Đoàn – Nhân viên bảo vệ trường THPT Vân Tảo
Tình trạng bệnh: Viêm khớp dạng thấp ở tay và chân.
Quá trình thử nghiệm: Trong 15 ngày.
14
Phương pháp:
+ Ngâm tay chân bằng nước ấm có pha tinh dầu 1 lần/ ngày vào các buổi
tối trước khi đi ngủ.
+ Bôi tinh dầu vào vị trí bị viêm khớp: ngày bôi 2 lần (Sáng, tối).
Hình 10: Vị trí viêm khớp của đối tượng tình nguyện.
15
2. Bà Nguyễn Thị Lý – Thôn Vĩnh Lộc, Thư Phú, Thường Tín – Hà Nội
Hình 11: Vị trí viêm khớp của đối tượng tình nguyện.
Tình trạng bệnh: Viêm khớp: Cổ tay, khuỷu tay, đốt cột sống
Quá trình thử nghiệm: Trong 30 ngày.
Phương pháp:
+ Ngâm tay chân bằng nước ấm có pha tinh dầu 2 lần/ ngày vào các buổi
sáng và tối trước khi đi ngủ.
+ Bôi tinh dầu vào vị trí bị viêm khớp: ngày bôi 2 lần (Sáng, tối).
16
3. Bà Nguyễn Thị Ngan - Thôn Vĩnh Lộc, Thư Phú, Thường Tín – Hà Nội
PHẦN IV. KẾT LUẬN
Sau quá trình nghiên cứu, tiến hành chiết xuất tinh dầu, phân tích thành
phần hóa học của lá cây lá lốt và thử nghiệm khả chữa bệnh đau xương khớp.
Em rút ra một số kết luận sau:
1. Biết tách chiết tinh dầu cây lá lốt để xác định thành phần hóa học có trong
tinh dầu lá lốt.
2. Tinh dầu lá lốt có khả năng trị bệnh đau xương khớp ở người.
3. Đề tài là cơ sở bước đầu để em tiếp tục nghiên cứu tác dụng trị bệnh của một
số loại thực vật có trong tự nhiên và đặc biệt hơn nữa là các loại cây có ở địa
phương em có thể làm dược liệu.
4. Việc nghiên cứu đề tài này giúp em biết cách vận dụng khoa học vào thực tế
cuộc sống, đồng thời cũng bổ sung cho bản thân em kỹ năng độc lập nghiên cứu
khoa học.
20
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. GS.TS Đỗ Tất Lợi, Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam.
2. Đỗ Đình Rãng, Đoàn Thanh Tường, Vũ Thị Lựu (2001), Nghiên cứu thành
phần hoá học của tinh dầu và dịch chiết của cây lá lốt huyện Từ Liêm – Hà Nội,
Hoá học và công nghiệp hoá chất, 5 (70) 25-29.
3. Trịnh Xuân Thủy, Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học của cây lá lốt
(Piper lolot C.DC). Luận văn Thạc sĩ, 2006.
4. Trương Đình Xuân Tịnh, Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa
học trong dịch chiết lá lốt ở huyện Hòa Vang, Đà Nẵng. Khóa luận tốt nghiệp
cử nhân,2005.
5. PGS.TS.BS Lê Anh Thư. Điều trị cơ bản bệnh Viêm khớp dạng thấp, mười
hai năm theo dõi và đánh giá (8/1993 - 12/2004). Thành tựu của Bệnh viện Chợ
Rẫy 5 năm đầu thế kỷ 21. Tháng 5 năm 2005
6. PGS.TS.BS Lê Anh Thư. Bệnh Viêm khớp dạng thấp. Nhà xuất bản Y học
năm 2006
7. PGS.TS.BS Lê Anh Thư. Kinh nghiệm điều trị Viêm khớp dạng thấp tại Bệnh