LỜI CẢM TẠ
Tôi xin chân thành gởi lời cảm tạ với tấm lòng biết ơn sâu sắc đến:
* Gia đình đã tạo cho tôi chỗ dựa vững chắc về vật chất lẫn tinh thần. Ba mẹ đã
luôn sát cánh bên tôi, nuôi dưỡng chăm sóc tôi nên người, động viên tôi học tập.
* Ban Giám hiệu trường Đại học Nông Lâm thành phố Hố Chí Minh, Ban chủ
nhiệm Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học, cùng tất cả quý thầy cô đã truyền đạt kiết thức
cho tôi trong suốt quá trình học tại trường.
* PGS. TS. Nguyễn Ngọc Tuân đã hết lòng giúp đỡ, hướng dẫn cùng những hỗ
trợ rất thiết thực cho tôi trong suốt quá trình thực hiện đề tài, giúp tôi hoàn thành tốt
khóa luận tốt nghiệp cũng như nâng cao kiến thức.
* BSTY. Bùi Thị Thu Trang đã nhiệt tình hướng dẫn, động viên và giúp đỡ tôi
hoàn thành tốt khóa luận này.
* Quý thầy cô, cán bộ công chức tại Trung Tâm Phân Tích Thí Nghiệm Hóa sinh
Trường Đại học Nông Lâm TP. HCM.
* BSTY. Lê Hữu Ngọc, phòng thực hành Kiểm nghiệm Thú sản và Môi trường,
Khoa CNTY Trường Đại học Nông Lâm TP. HCM.
* Các bạn bè thân yêu của lớp CNSH K27 đã chia sẻ cùng tôi những vui buồn
trong thời gian học cũng như hết lòng hỗ trợ, giúp đỡ tôi trong thời gian thực tập.
Chân thành cảm ơn
Đoàn Thị Tuyết Lê
iii
TÓM TẮT
ĐOÀN THỊ TUYẾT LÊ, Đại học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh, Tháng 8/2005. “ỨNG
DỤNG KỸ THUẬT MULTIPLEX – PCR ĐỂ PHÁT HIỆN CÁC GEN ĐỘC LỰC
CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI PHÂN LẬP TỪ PHÂN BÒ, PHÂN HEO
TIÊU CHẢY VÀ THỊT BÒ”.
Hội đồng hướng dẫn:
PGS. TS. Nguyễn Ngọc Tuân
BSTY. Bùi Thị Thu Trang
Đề tài được thực hiện nhằm xác định các gen độc lực stx1, stx2, eae, hly, lt-I, sta,
stb, vt2e của vi khuẩn E. coli được phân lập từ 27 mẫu phân tiêu chảy của bò, heo, bê và

piglets (stb, lt-I, vt2e, hly, stx1, eae).
(3) 9 swabs of the beef surface were detected that non virulence genes of E. coli.
(4) Sta gene of E. coli isolated from 27 diarrhea cattle, calf, piglet stools samples
weren’t detected.
v
MỤC LỤC
CHƯƠNG TRANG
Trang tựa
Lời cảm tạ................................................................................................................iii
Tóm tắt....................................................................................................................iv
Summary...................................................................................................................v
Mục lục....................................................................................................................vi
Danh sách các chữ viết tắt......................................................................................viii
Danh sách các hình...................................................................................................x
Danh sách các bảng..................................................................................................xi
1. ĐẶT VẤN ĐỀ........................................................................................................1
2. TỔNG QUAN.........................................................................................................3
2.1. Vi khuẩn E. coli............................................................................................3
2.1.1. Định nghĩa...........................................................................................3
2.1.2. Nuôi cấy và đặc điểm sinh hóa............................................................3
2.1.3. Yếu tố kháng nguyên...........................................................................4
2.1.4. Cơ chế chung về khả năng gây tiêu chảy của E. coli............................4
2.1.5. Phân loại E. coli...................................................................................4
2.1.5.1. Nhóm STEC/ VTEC/ EHEC.....................................................4
2.1.5.2. Nhóm EPEC.............................................................................7
2.1.53. Nhóm ETEC..............................................................................8
2.2. Kỹ thuật PCR.............................................................................................11
2.2.1. Nguyên tắc........................................................................................11
2.2.2. Các giai đoạn của phản ứng PCR.......................................................12
2.2.3. Các thành phần của phản ứng PCR....................................................14

phân lập từ mẫu bề mặt thịt bò....................................................................38
4.6. Tổng kết kết quả phát hiện các gen độc lực
của E. coli trên các mẫu khảo sát...............................................................39
5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ.................................................................................41
5.1. Kết luận......................................................................................................41
5.2. Đề nghị.......................................................................................................41
6. TÀI LIỆU THAM KHẢO..................................................................................42
7. PHỤ LỤC.............................................................................................................46
vii