30
Kết quả xử lý thống kê cũng cho thấy có sự khác biệt về hoạt độ của hai
loại enzyme giữa hai khoảng thời gian nuôi cấy (24 giờ, 48 giờ) (với P < 0,05) (Phụ
lục A). Theo kết quả của chúng tôi khi nuôi cấy vi khuẩn Bacillus subtilis ở 48 giờ
với chế độ sục khí liên tục sẽ cho hoạt độ enzyme cao hơn so với điều kiện nuôi cấy
sục khí liên tục trong 24 giờ. Như vậy chứng tỏ khi vi khuẩn được cung cấp oxy
càng nhiều thì chúng phát triển càng tốt và sinh càng nhiều enzyme.
Cũng theo kết quả thống kê: có sự khác biệt về mặt thống kê giữa 9 chủng
vi khuẩn Bacillus subtilis được nuôi cấy (cụ thể có sự khác biệt giữa các chủng:
chủng 2 – 5, chủng 2 – 6, chủng 2 – 8, chủng 1 - 9, chủng 4 - 9, ).
Tuy nhiên giữa hai chế độ sục khí và không sục khí thì hoạt độ enzyme
trong cùng một chủng không đồng nhất, có thể ở điều kiện cung cấp oxy một số
chủng này phát triển tốt hơn và ở chế độ không cung cấp oxy một số chủng khác lại
phát triển tốt hơn. Điều này cho thấy có sự khác biệt về đặc điểm sinh học giữa các
chủng.
Từ các kết quả có được như trên, chúng tôi quyết định chọn chế độ sục khí
liên tục trong thời gian 48 giờ và chọn 4 chủng: 2, 7, 9, 10 trong 9 chủng phân lập
được để tiếp tục khảo sát hoạt độ của hai loại enzyme trong các môi trường nuôi cấy
khác nhau ở thí nghiệm tiếp theo.

31
Bảng 4. 3: Kết quả hoạt độ enzyme trung bình của 9 chủng vi khuẩn
thí nghiệm
Chủng vi
khuẩn
Hoạt độ enzyme
amylase (W
0
/ml)
Hoạt độ enzyme

5
32
48
20
32
40
26
6
32
40
24
40
36
32
7
32
48
56
48
40
52
8
32
40
32
32
36
32
9
48

0
/ml)
Hoạt độ enzyme
protease
(Hdp/ml)
Rỉ đường + 2% tinh bột
(1)
(n = 8)
26
30
Rỉ đường + 1% tinh bột
(2)
(n = 8)
18,5

22

Rỉ đường + 1% tinh bột
+ 0,5% pepton (3)
(n = 8) 20

32
TSB + 1% tinh bột (4)
(n = 8)
14,5
20


Bảng 4. 5. Khảo sát điều kiện (pH, thời gian) thích hợp cho sản xuất enzyme
của các chủng vi khuẩn Bacillus subtilis.
pH

Thời gian
6,0
7,0
Hoạt độ
amylase
Hoạt độ
protease
Hoạt độ
amylase
Hoạt độ
protease
24 giờ
(n = 8)
27
13
32
18
48 giờ
(n = 8)
32
18
36
18

Qua kết quả khảo sát điều kiện (pH, thời gian) thích hợp cho sự sản xuất
enzyme của các chủng vi khuẩn Bacillus subtilis ở bảng 4.5 chúng tôi thấy ở

4 - 10
0
C
30 - 37
0
C
Hoạt độ
amylase
Hoạt độ
protease
Hoạt độ
amylase
Hoạt độ
protease
0 ngày
56
38
56
38
10 ngày
5,25
0,0
4,75
0,0
20 ngày
5,25
0,0
4,25
0,0
30 ngày


36 Chƣơng 5
KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
5.1. Kết luận
Sau một khoảng thời gian thực hiện đề tài, chúng tôi có những kết luận sau:
Phân lập được 10 chủng vi khuẩn Bacillus subtilis từ đất.

1. Vương Thị Việt Hoa, 2002, Giáo trình thực tập vi sinh thực phẩm.
Trường Đại học Nông Lâm TP.HCM. 74 trang.

2. Lê Minh Cẩm Ngọc, 2005. Phân lập vi khuẩn Bacillus subtilis từ chế
phẩm probiotic, tìm hiểu môi trường nuôi cấy thích hợp và sản xuất thử
nghiệm. LVTN, Khoa Chăn nuôi thú y. Trường Đại học Nông Lâm
TP.HCM.

3. Nguyễn Đức Duy Anh, 2005. Phân lập và khảo sát một số đặc điểm của
vi khuẩn Lactobacillus acidophilus và Bacillus subtilis. LVTN, Khoa
Công nghệ Sinh học. Trường Đại học Nông Lâm TP.HCM.

4. Nguyễn Ngọc Hải, Tô Minh Châu, 2001. Giáo trình thực tập vi sinh. Tủ
sách trường Đại học Nông Lâm TP.HCM.

5. Lý Kim Hữu, 2005. Khảo sát đặc điểm của vi khuẩn Bacillus subtilis và
tìm hiểu điều kiện nuôi cấy thích hợp sản xuất thử nghiệm chế phẩm
Probiotic. LVTN, khoa Chăn nuôi thú y. Trường Đại học Nông Lâm
TP.HCM

6. Vũ Thị Thứ, 1996. Nghiên cứu đặc điểm sinh học và khả năng ứng dụng
của một số chủng vi khuẩn thuộc chi Bacillus subtilis. Luận án phó tiến sĩ
khoa học, sinh học, Viện sinh học nhiệt đới. 38
7. Tô Minh Châu, 2000. Giáo trình thực tập vi sinh vật học. Tủ sách trường
Đại học Nông Lâm TP.HCM.
8. Nguyễn Ngọc Thanh Xuân, 2006. Phân lập vi khuẩn Bacillus subtilis từ
đất và khảo sát khả năng sử dụng các chủng phân lập được trong xử lý

thực phẩm và mĩ phẩm. Nhà xuất bản giáo dục.

17. Lương Đức Phẩm, 1998. Công nghệ vi sinh vật. Nhà xuất bản khoa học
kỹ thuật, Hà Nội.

18. Nguyễn Văn Đông, 1993. Khảo sát một số tính chất của vi khuẩn
Bacillus subtilis dùng sản xuất chế phẩm Biosubtyl phòng và trị bệnh tiêu
chảy heo con. LVTN, khoa Chăn nuôi Thú y. Trường Đại học Nông Lâm
TP.HCM.

Tài liệu tham khảo trên internet
19. www.sciencebuddies.org/ /MicroBio_img_004.jpg
20. www.fam.br/microrganismos/bacteriologia_bacil
21. www.mbc.ntu.edu.tw/faculty/LeeKT/fig3.jpg
22. www.biol.pmf.hr/e-skola/odgovori/odgovor451.htm
23. www.microscopyconsulting.com/ Gallery/pages/Ba