B GIÁO DC VÀ ÀO TO
TRNG I HC M TP.HCM BÁOăCÁOăKHÓAăLUN TTăNGHIP TÀI:
Xin chân thành cmăn!
Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu
SVTH: Trn Th Phng
DANH MC VIT TT
S. aureus Staphylococcus aureus
MRSA Methycillin-Resistant Staphylococcus aureus
SSI Surgical site infection
NNIS National Nosocomial Infection Surveilance
FAME Fatty acid modifying enzyme
AMR Antimicrobial Resistance
NCCLS National Committee for Clinical Laboratory Standards
R Resistantă( kháng)
I Intermediate (Trung gian)
S Susceptible (Nhy cm)
Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu
SVTH: Trn Th Phng DANH MC HÌNH NH
Hình 1. 1. T l các chng MRSA phân lp đc ti các bnh vin M Latinh và
SVTH: Trn Th Phng
DANH MC BNG
Bng 2. 1. Chun mc bin lun đng kính vòng vô khun ca S. aureus 33
Bng 3. 2. T l các loài vi khun phân lp đc trên vt thng, vt m 38
Bng 3. 3. T l nhim khun S. aureus theo loi bnh lý 39
Bng 3. 4. T l nhim khun S. aureus theo tui và gii tính 40
Bng 3. 5. Mi liên quan gia thi gian nm vin và t l nhim khun S. aureus
trên vt thng, vt m. 41
Bng 3. 6. Mi liên quan gia tin s sc khe đi vi t l nhim khun S. aureus
trên bnh nhân ngoi khoa 42
Bng 3. 7. T l đ kháng kháng sinh ca S. aureus 44
Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu
SVTH: Trn Th Phng
DANH MC BIUă
Biu đ 1. 1. T l các loài vi khun phân lp đc trên vt m, vt thng. 38
Biu đ 1. 2. T l nhim khun S. aureus theo bnh lý 39
Biu đ 1. 3. T l nhim khun S. aureus theo đ tui và gii tính 40
Biu đ 1. 4. Mi liên quan gia thi gian nm vin và t l nhim khun S.aureus
trên vt thng, vt m. 41
Biu đ 1. 5. Mi liên quan gia tin s sc khe đi vi t l nhim khun
S.aureus trên bnh nhân ngoi khoa. 43
Biu đ 1. 6. T l đ kháng kháng sinh ca Staphylococcus aureus. 44
Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu
SVTH: Trn Th Phng
MC LC
2. IăTNG NGHIÊN CU 23
3. TRANG THIT B 23
4. VT LIU VÀ HÓA CHT: 24
5. PHNGăPHÁPăNGHIểNăCU 24
Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu
SVTH: Trn Th Phng
6. K THUT NGHIÊN CU 25
6.1. Phng pháp kho sát trc tip (nhum Gram) 25
6.2. Phng pháp cy phân lp 26
6.2.1. Nguyên tc 26
6.2.2. Cách ly bnh phm 26
6.2.3. X lý bnh phm, nuôi cy và phân lp. 27
6.2.4. nh danh 28
7. KHÁNGăSINHăăTHEOăPHNGăPHÁPăKIRBY-BAUER 31
7.1. Nguyên tc: 31
7.2. Vt liu – Phng pháp 31
7.2.1. aăkhángăsinh 31
7.2.2. Môiătrng 31
7.2.3. Chunăbăhuynădchăviăkhun 32
7.2.4. CácăbcătinăhƠnh 32
CHNG III: KT QU 34
1. KHOăSÁTăTỊNHăTRNGăGỂYăBNHăCAăSTAPHYLOCOCCUS AUREUS 34
1.1. Mt s hình nh thu nhn đc 34
1.2. C cu vi khun phân lp đc t mu bnh phm trên vt thng, vt
m 37
1.3. T l nhim khun theo loi bnh lý 39
1.4. V gii tính và nhóm tui 40
1.5. Mi liên quan gia thi gian bnh nhân nm vin vi t l nhim khun
S. aureus trên vt thng, vt m. 41
Trong s các loài vi khun, Staphylococcus aureus (t cu vàng) là mt
trong nhng loài kháng thuc ph bin nht ậ là tác nhân ca rt nhiu bnh
nhim khun trong cngă đngăcngă nhă trongă môiă trng bnh vin vi bnh
cnh lâm sàng nng và cp tính, có th dnăđn t vong nuăkhôngăđc cha tr
kp thi. Theo mt báo cáo ti Hi tho v chng nhim khun Bnh vin Bch
Mai, hàngănmăcóă1γ.9%ăs trng hp mc bnh phi nhp vinăđiu tr do t
cu vàng
[36]
. ángăchúăỦălƠămt s bnh nghiêm trng nhă: Viêm ni tâm mc,
nhim trùng huyt, ng đc thc phm, nhim trùng bnh vin,ầ Vnăđ đángăloă
ngi là t cu vàng có kh nngă khángă li nhiu loi kháng sinh thông dng,
Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu
2
SVTH: Trn Th Phng
trongăđóăcóăcácăkhángăsinhăth h mi và c cácăkhángăsinhăđc tr cho loài vi
khun này làm cho vicăđiu tr tr nên rtăkhóăkhn và phc tp.
Da trên tình hình thc t trên,ăđ tài:
"Kho sát kh nng gây nhim khun và đ kháng kháng sinh ca
Staphylococcus aureus (t cu vàng) trên bnh nhân ngoi khoa ti bnh vin
175 t 07/2013 đn 04/2014"ăđc thc hin, nhm kho sát tình trng nhim
khun do t cu vàng trên các vt m, vtăthngăca các bnh nhân ngoi khoa;
đng thi khoăsátătìnhăhìnhăđ kháng ca vi khunănƠyăđi vi các loi kháng
sinhăđangăđc s dng hin nay.
Mc tiêu đ tài:
- Tìm hiu vai trò và tình hình gây bnh ca Staphylococcus aureus trên các vt
thng,ăvt m ca bnh nhân ngoi khoa.
- Xácăđnh t l đ kháng các loi kháng sinh ca Staphylococcus aureus.
Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu
3
SVTH: Trn Th Phng
khoa,ăviăcácătácănhơnăthngălƠăviăkhunăthngătrúătrongăngătiêuăhoá,ăđngăhôă
Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu
4
SVTH: Trn Th Phng
hpătrên.ăViăkhunăhinădinătrongăđngămt,ăđngăniuăcngăcóăthălƠătácănhơnă
chínhầ.
- Viăkhunăcóăngunăgcăngoiăsinh:ăGpăăcácăvtăthng,ătácănhơnăthngă
là Staphylococcus aureus và Streptococcus pyrogens.
Nguyênănhơnăgơyănhimătrùngăngoiăkhoa:ăcóăthădoăchngăloiăsălngăvƠă
đcătínhăcaăviăkhun;ădoătădchătrongăvtăm;ăgimăscăđăkhángătiăvtămă(nhă
vtămăbăthiuămáuădoăkhơuăquáăcht,ầ);ădoăsădngăcácăthucăcoămchătrongălúcă
phuăthut,ầ
[10]
Theo s liu thng kê t h thngăNNISă(TheăCDC’săNationalăNosocomială
Infections Surveillance) ậ H thng giám sát nhim trùng bnh vin quc gia Hoa
K,ă đc thành lpă nmă 1970,ă Staphylococcus aureus, coagulase-negative
staphylococci, Enterococcus spp., và Escherichia coli là các tác nhân gây bnh
thngăđc phân lp t các bnh phm SSI nht. Và hinătngăđ kháng kháng
sinh ca các tác nhân gây nhim trùng ngoiăkhoaăđangăgiaătng,ănh S. aureus đ
kháng methicillin (MethicillinậResistant S.aureus (MRSA) và Candida
albicans
[24]
.
1.2. Tình hình gây bnh ca Staphylococcus aureus trên vt thng,
vt m trên th gii và ti Vit Nam
1.2.1. Trên th gii
Nhim khun vtăthng,ăvt m là hu qu không mong munăthng gp
nht và là nguyên nhân quan trng gây t vong ngi bnhăđc phu thut trên
toàn th gii.
Ti Hoa K, NKNK đng hàng th 2 sau nhim khun tit niu bnh vin.
chim 29% tt c các nhim trùng bnh vin do S. aureus
[25]
Ti trung tâm y t Thánh Gioan, t l nhim trùng vt m doăMRSAătngăt
9%ănmă1995ălênăγ0%ăvƠoănmăβ000
[25]
.
Theo báo cáo trên Tp Chí Hip Hi Y Khoa Hoa K nmăβ005,ăt l ngi
M cht vì nhim trùng MRSA nhiuă hnă AIDS.ă Trongă 94000ă trng hp b
nhim MRSA thì có 16650ătrng hp t vong.
Vit Nam cngălƠămt trong nhngănc có t l nhim t cu vàng cao trong
khu vcă chơuăÁ.ă Nmă β000,ăti Hng Kông, t l t cu vàng gây bnh chim
18%
[31]
1.2.2. Ti Vit Nam
Ti Vit Nam, các thng kê v nhim khun vtăthng,ăvt m cònăítăđc
công b. Theo Lê Hoàng Ninh, mi nmăcóăkhong 600000ătrng hp b nhim
khun bnh vin trên tng s 7,5 triu bnh nhân nhp vin
[34]
. NKNK xy ra 5%
ậ 10% trong s khong 2 triuăngi bnhăđc phu thutăhƠngănm.ăNKNK là
loi nhim khună thng gp nht, vi s lng ln nht trong các loi nhim
Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu
6
SVTH: Trn Th Phng
khun bnh vin. Nghiên cu ca Nguyn MnhăNhơmănmă1998ăti bnh vin
Vităc cho thy t l nhim khun vtăthng,ăvt m chung là 9,1%. Ti bnh
vin Giao thông vn ti TW, nghiên cu ca Lê Tuyên HngăDngă(1995)ăchoă
thy t l nhim khun vtăthng,ăvt m ti khoa Ngoi Bnh vin <2%. Khong
Vân t nmăβ010ăđnănmăβ01γăchoăthy t l nhimăMRSAăđưăgiaătngăt 60% lên
64%
[23]
.
Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu
7
SVTH: Trn Th Phng
Nghiên cu ti vin PasteurăTp.ăHCMănmăβ01γăt các bnh phm cho thy t
l nhim khun S. aureus chim 23,6% và đaăs là phân lpăđc t các bnh phm
m (chim 36,3%)
[1]
.
1.3. Tình hình đ kháng kháng sinh ca Staphylococcus aureus
1.3.1. Trên th gii
S. aureus kháng li rt nhiu loi kháng sinh thông dng,ă đc bit là
methicillin
[31]
S xut hin caăkhángăsinhăPenicillinănmă1941ăđưătoănênăbc tin mi
cho ngành y hc, tuy nhiên ch haiănmăsau,ăchng S. aureus khángăPenicillinăđưă
xut hin. Trong thp k tip theo, S. aureus kháng Penicillin tr nên ph bin.
các bnh vin ti Londonănmă1946ămi ch có 14% t cu khun phân lp kháng
Penicillin, t l nƠyătngălênăđnăγ4%ăvƠoănmă1990.ăDoăđóăcácănhƠănghiênăcuăđưă
phát trinăkhángăsinhăMethicillin,ătuyănhiênătrng hpăMRSAăđuătiênăđưăxy ra
AnhăvƠoănmă1961ăvƠăbùngăn M vào nmă1968.ăMRSAătip tc bùng n và
lan rng vào nhng thp k tip theo
[17]
Hu ht các chng S. aureus phân lpăđc nhy cm vi vancomycin. Tháng
11ă nmă β005,ă ch phát hină đc 4 bnh nhân b nhim bnh do kháng
vancomycină(VRSA)ăđưăđc xác nhn bi Trung tâm kim soát dch bnh USA.
Ta thyăđc S.aureus còn nhy cm vi vancomycin, s xut hin nhng chng
Ti bnh vină i Hcă Yă Dc TP.HCM, Staphylococcus aureus có hin
tng kháng li các kháng sinh nhóm Cephalosphorin th h III, Nitrofurantoin,
Oxacillin vi t l t 44%-64%ă nhngă vn nhy cm tt vi Vancomycin
(100%)
[15]
.
Theo kt qu ca mt nghiên cuăđaătrungătơmăca Phm Hùng Vân và Phm
Thái Bình nmăβ005 v tínhăđ kháng kháng sinh ca Staphylococcus aureus cho
thy 47% kháng Methicillin, 4β%ăđiăviăGentamicin,ă6γ%ăđiăviăErythromycin,ă
68%ăđiăviăAzithromycin,ăγ9%ăđiăviăCiprofloxacin,ăγ8%ăđiăviăCefuroxime,ă
γ0%ă điă viă Amoxicillin-clavulanică acid,ă γ4%ă đi viă Cefepime,ă β8%ă điă viă
Ticarcillină clavulanică acid,ă γ8%ă điă viă chloramphenicol,ă β5%ă điă viă
cotrimoxazol,ă17%ăđiă viă Levofloxacin,ăvƠ ch 8% điăviăRifampicine. Nghiên
cuă choă thyă viă khună Staphylococcus aureus kháng methicillin (MRSA)
có t l đ khángă cácă khángă sinhă caoă hnă rtă rõ rtă soă viă viă khună nhy cmă
Methicillin (MSSA). MRSAăkhángărtăcaoăviăErythromycină(76%),ăAzithromycină
(88%), Gentamicin (67%), Ciprofloxacin (65%), Cotrimoxazol (47%),
Chloramphenicol (43%), và Levofloxacin (35%). MRSA kháng
Rifampicin t l 15% và chaă cóă ghiă nhnă khángă viă Vancomycină (0%)ă
và Linezolid (0%) và MRSA cngă có t l đ kháng khá cao điă viă cácă khángă
sinh thucă dòngă beta-lactamsă nhă Amoxicillin/clavulanic acid (49%),
Ticarcillin/clavulanic acid (57%),Cefuroxim (79%) và Cefepim (72%) (Hình
1.2)
[21]
.
Ti bnh vinăNhiăng 2, Staphylococcus aureus kháng nhiu kháng sinh
mc cao: Penicilline G (94%), Erythromycine (70%), Clindamycine (50,2%), Kháng
thp vi Vancomycine (1,35%), Amikacin(8,25%), Ciprofloxacine (8,3%), Cefepime
(21,9%), Trimethoprim/sulfamethoxazol (15,3%)
[2]
0
0
0
76
50
67
19
35
2
65
17
88
50
47
5
43
35
15
2
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
MRSA (110) MSSA (125)
o
C) là ttănhtăđăviăkhunătităscăt.ăKhongăpHăcóăthăphátătrinătă
4.5-9.γ,ănhngă pHătiă thíchă khongă7.0-7.5. Trênă môiătngă đcăS. aureus mcă
thành khúm màuă vƠngă vƠă cóă kh nngă gơyă tiêuă huytă trênă thchă máu. Mtă să
dòng S. aureus cóăkhănngăgơyătanămáuătrênămôiătrngăthchămáu,ăvòngătanămáuă
phă thucă vƠoă tngă chngă nhngă chúngă đuă cóă vòngă tană máuă hpă hnă soă viă
đngăkínhăkhunălc.ăHuăhtăcácăchng S. aureus đuătoăscătăvƠng,ănhngăcácă
scătănƠyăítăthyăkhiăquáătrìnhănuôiăcyăcònănonămƠăthngăthyărõăsauă1-2 ngày
Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu
12
SVTH: Trn Th Phng
nuôiăcyăănhităđăphòng.ăScătăđcătoăraănhiuăhnătrongămôiătrngăcóăhin
dinălactoseăhayăcácăngunăhidrocacbonăkhácămƠăviăsinhăvtănƠyăcóăthăbăgưyăvƠă
s dng.
cătínhăsinhăhóa:ăcóăkhănngăsnăxutăenzymeăcatalaseă(đcăđimănƠyăgiúpă
phơnă bită chúngă viă Streptococci), coagulase (+), lên men glucose, manitol,
lactose,ă snă xută acidă lactică nhngă khôngă sinhă hi. ThƠnhă tă bƠoă chaă
peptidoglycană hìnhă thƠnhă mtă hƠngă rƠoă vngă chcă xungă quanhă tă bƠoă vƠă acidă
techoicăgiúpăduyătrìămôiătngăionăthíchăhpăchoămƠngăcytoplasma,ăđngăthiăgiúpă
boăvăbămtăt bƠoătăcu.ăThƠnhătăbƠoănƠyăkhángăviălysozymeăvƠănhyăviă
lysotaphin-mtăchtăcóăthăpháăhyăcuăniăpentaglycinăcaătăcu.ăTăcuăvƠngăcóă
kh nngăkhángăđcăviăcácăchtăditătrùng,ăđăkhôănóngăvƠăcóăkhănngătngă
trng trongămôiătngăcha đnă15%ăNaCl.
Phơnăb:ăStaphylococcus aureus cătrúătrênădaăvƠămƠngănhy,ăđcăbitătrênă
cácăvtăthngămngămăcaăbnhănhơnăngoiăkhoa, gơyăraăhuăqu rtănghiêmă
trngăbiăkhănngăkhángăthucăcaoăcaăloƠiăviăkhunănƠyăgơyăkhóăkhnăchoăvică
điuătr.
Hình 1. 3. Hình thái Staphylococcus aureus trên kính hinăviăđin t.
(Ngun:
[4, 8, 6]
:
2.3.1. Các kháng nguyên:
Peptidoglycan:ălƠăpolymerăcaăpolysaccharideăgiăchoăváchăđc vngăchcă
vƠăgópăphnăquanătrngătrongăcăchăgơyăbnhă(kíchăthíchătăbƠoăđnănhơnăsnăxută
interleukin-1ălôiăkéoăbchăcuătrungătính,ăcóăhotătínhănhăniăđcătăvƠăhotăhóaă
băth).
Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu
14
SVTH: Trn Th Phng
Techoicăacid:ălƠănhngăpolymerăcaăglycerolăhayăribitolăphosphate,ăliênăktă
viăpeptidoglycanăvƠăcóătínhăkhángănguyên.ăLƠăkhángănguyênăngngăktăchăyuă
caă tă cuă vƠngă vƠă lƠmă tngă tácă dngă hotă hóaă bă th.ă Acidă nƠyă gnă vƠoă
polysaccharideăváchătăcuăvƠng. ơyălƠăthƠnhăphnăđcăhiuăcaăkhángănguyênăO.
Khángăthăchngătechoicăacidăđcătìmăthyăăbnhănhơnăviêmăniătơmămc.
ProteinăA:ălƠăthƠnhăphnăváchătăbƠo,ă ttăcăcácăchngătăcuăvƠngăđuăcóă
proteinănƠy.ăGnăđcăvƠoăkhángăthăFcăcaăIgGădnăđnămtătácădngăcaăIgG,
chăyuălƠmăgimăkhănngăopsoninăhóaănênălƠmăgimăthcăbƠo.ăTrongăphòngăthíă
nghim,ăngiătaăsădngăS. aureus giƠuăproteinăAălƠmăgiáăthăgnăkhángăthăđă
phátăhinănhngăkhángănguyênăhòaătan.
Nang:ăchăcóăămtăsăchngăS. aureus có tác dngăngnăcnăsăthcăbƠoăcaă
bchăcuătrungătính.
Văbiofilm:ăcóăcuătoăpolysaccharideăcóăítănhtă11ăserotype.ăChămtăsăítă
S.aureus cóăvănƠyăvƠăcóăthăquanăsátăđcăbngăphngăphápănhumăv.ăLpăvă
nƠyăcóănhiuătínhăđcăhiuăkhángănguyên.ăBiofilmălƠănhngălpămng,ăsnăstăvƠă
nhnădoăS. aureus tităraăvƠăbaoăbênăngoƠiăviăkhun,ăcóătácădngăgiúpăS. aureus
bámăvƠăxơmănhpăvƠoăniêmămc.
Kháng nguyên ahedrin (yuătăbám):ătăcuăcóăproteinăbămtăđcăhiu,ăcóătácă
dngăbámăvƠoăreceptorăđcăhiuătăbƠo.ăCóăthălƠăcácăprotein: laminin, fibronectin,
collagen.
bào khác nhau.
- Leucocidin: gơyăđcăchoăbchăcuăngiăvƠăth,ăkhôngăgơyăđcăchoăbchăcuă
đngăvtăkhác.ăBaoăgmăhaiămnhăFăvƠăS,ăkhiăbătáchăriăhaiămnhănƠyăthì tác
dngăgơyăđcăsăbămt.ăChăβ%ătrongăttăcăcácăchngăS. aureus cóăthătoă
leucocidin,ănhngăđnăgnă90%ăcácăchngăphơnălpăđcătăvtăxcătrênădaă
cóă toăđcă tă nƠy. Khángă thă chngăleucocidină cóă thăđă khángă táiănhimă
Staphylococci.
- cătăgơyătrócăvyă(Exofoliativeătoxin):ălƠăngoiăđcăt,ăgơyănênăhiăchngă
phng rpăvƠăchcălădaă(Scadedăskinăsyndrome)ăătrăem.ăETăgơyăraăsăphơnă
lyăbênătrongălpăbiuăbìăgiaăcácălpătăbƠoăsngăvƠăchtălƠmădaăphngălênăvƠă
Khóa lun tt nghip CBHD:ăTS.BSăVăBo Châu
16
SVTH: Trn Th Phng
lƠmămtădnăđiănhngălpăbiuăbìălƠmădaămtăncăvƠăcănhăvyătipătcă
nhimă trùng.ă că tă nƠyă cóă kahră nng esteraseă vƠă proteaseă giúpă tnă công
nhngăproteinăcóăchcănng duyătrìăsănguyênăvnăcaăcácă tă bƠoă biuă bì.ă
KhángăthăchuyênăbităcóăkhănngăchngăđcătácădngănƠyăcaăđcăt.
- cătăgơyăshockăTSSTă1ă(toxicăshockăsyndromeătoxin-1):ălƠămtăngoiăđcă
t,ăthucăhăproteinăđcăbităđnănhămtăđcătăsiêuăkhángănguyênăgơyăst.
PhnălnădòngăS. aureus phơnălpătăbnhănhơnăcóăhiăchngăshockănhimă
khunăđuătităraăloiăđcătănƠy.ăcătănƠyăgingăđcătărutăFăvƠăngoiăđcă
tăgơyăstăC.ăTrênăngi,ăđcătă cóăliênăquană tiăst,ăshockăvƠănhiuă triuă
chngăkhácăkăcăvtăđăbongăbênăngoƠiăda.ăTuyănhiênăchaăcóăbng chngă
trcătipăchoărngăđcătănƠyălƠănguyênănhơnăduyănhtăgơyăhiăchngăshockă
nhimă khun.ă Că chă gơyă bnh:ă TSSTă kíchă thíchă giiă phóngă TNFă (tumor
necrosis factor) và các interleukin I, II.
- Enterotoxin: lƠănhngăproteinăbnănhită(chuăsôiăđcăγ0ăphút),ă trongăcuă
trúcăcóăvòngăcysteinăăgiăgiúpănăđnhăcuătrúcăphơnătăvƠăkhángăsăphơnă
giiăprotein. Khongă50%ăS. aureus tităđcăđcătănƠy.ăBaoăgmă6ăloiătă
A-F.ăđcătănƠyălƠănguyênănhơnăgơyăngăđcăthcăn,ăđcăviăkhunătităraă